为什么要设计引物

金融界2024年3月15日消息，据国家知识产权局公告，迈克生物股份有限公司申请一项名为“多重PCR反应体系“，公开号CN117701689A，申请日期为2022年9月。

专利摘要显示，本发明提供了一种单管超多重的PCR检测引物探针的设计方法、反应体系以及基于所述方法和反应体系的多重靶标检测试剂盒。

本文源自金融界

易苏茗4885PCR引物的设计 -
后妹费19162251706 ______ PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列. 原则: 1、引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性. 2、碱基要随机分布. 3、引物长度一般在15~30碱基之间. 4、引物GC含量在40%~60%之间,Tm值最好接近72℃ 5、引物3′端要避开密码子的第3位 6、引物3′端不能选择A,最好选择T 7、扩增产物的单链不能形成二级结构 8、引物自身不能有连续4个碱基的互补 9、引物的5′端可以修饰,而3′端不可修饰 10、引物5′ 端和中间△G值应该相对较高,而3′ 端△G值较低 11、引物具有特异性 这是PCR的引物设计原则 具体你说的检测,是检测方法还是扩增产物分析或者其他什么内容?

易苏茗4885为什么设计引物G+C百分含量上下游引物要小于5 -
后妹费19162251706 ______ 为什么设计引物G+C百分含量上下游引物要小于5 1. 引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性. 2.产物不能形成二级结构. 3. 引物长度一般在15~30碱基之间. 4. G+C含量在40%~60%之间. 5. 碱基要随机分布. 6. 引物自身不能有连续4个碱基的互补. 7. 引物之间不能有连续4个碱基的互补. 8. 引物5′端可以修饰. 9. 引物3′端不可修饰. 10. 引物3′端要避开密码子的第3位.

易苏茗4885为什么PCR要将引物设计在不同的外显子上? -
后妹费19162251706 ______[答案] 貌似,为了区别DNA的污染.DNA上有外显子之间有内含子相隔,但是mRNA上是没有滴

易苏茗4885PCR的引物怎样设计, -
后妹费19162251706 ______[答案] PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否. 要设计引物首先要找到DNA序列的保守区.同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构.如这个区...

易苏茗4885CR引物设计原理是什么呢?
后妹费19162251706 ______ 有的模板本身条件比较困难,例如GC含量偏高或偏低,导致找不到各种指标都十分合适的引物;用作克隆目的的PCR,因为产物序列相对固定,引物设计的选择自由度较低

易苏茗4885什么是引物? -
后妹费19162251706 ______ [编辑本段]概念 引物,是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,在引物的3′-OH上,核苷酸以二酯链形式进行合成,因此引物的3′-OH,必须是游离...

易苏茗4885什么是基因组DNA污染?为什么设计引物时要跨外显子? -
后妹费19162251706 ______ 提RNA的时候有可能混了基因组DNA. 这样的话,PCR的时候,假如这个基因根本没表达,结果因为混了DNA进去,PCR就可以P出结果.但是这个条带不是从RNA来的.这就是DNA污染,它会干扰PCR的结果. 可以在提取RNA后,用DNA酶处理,这样分解可能混入的DNA来避免.也可以通过合理设计引物来避免,即使有DNA混入,这样设计的引物也只扩增RNA,而不扩增DNA. 这就要求引物得最好设计成跨外显子接头.因为DNA上的基因外显子和内含子是隔开的,而RNA上内含子被切掉了,是外显子链接在一起.剩下的,自己想去吧,已经快接近结果了……

易苏茗4885需要将目地片段与细菌连接重组表达.是否应先设计目的基因和细菌的引物?怎麽设计?是否需要知道全序列?还需要双酶切,引物要如何设计? -
后妹费19162251706 ______[答案] 与细菌的质粒连接重组吧? 要将基因表达就把基因连在表达载体上即可 基因的引物是一定要设计的 细菌的引物是什么东西? 引物设计原理就是碱基互补配对 还有DNA聚合酶(Taq酶)需要的反应条件 以及一些注意事项 你这一分不给 实在不想多说

易苏茗4885为什么PCR引物设计中引物可以不从扩增序列两头开始?不从两头开始能得到上下游引物以外的序列吗? -
后妹费19162251706 ______[答案] 这个问题很简单,扩增序列应该称为目的基因,目的基因一般都上万bp,从两头开始当然不合适.PCR扩增只能扩增出上下游引物之间的序列,因为只有引物之间的DNA双链是解链状态的.你的问题说明你对基础知识掌握的不好,透彻的理解PCR的原...