原核表达载体种类

蔚治转3270表达载体有什么功能? -
计赖郭13031409399 ______ 表达载体四部分:目的基因、启动子、终止子、标记基因 常用细菌质粒进行构建,构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端(多为黏性末端,也有平末端),采用DNA连接酶连接,导入生物体实现表达.标记基因可帮助...

蔚治转3270完整的基因表达载体包括哪些 -
计赖郭13031409399 ______ 基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤,而基因表达载体的本质是DNA,组成元素有碳氢氧氮磷,其中氮在含氮碱基中,磷在磷酸基团中 完整的表达载体必须包括:1、复制子,在细菌中扩增时所必须.2、启动子,目的基因在细菌或细胞中转录所必须,转录了才能翻译,是谓“表达”.3、原核筛选标记,细菌增菌所必须.4、真核筛选标记,如果是真核表达,就是必须的.5、多克隆位点,即酶切位点,插入目的片段的区域.6、其他所需构件,可视实验设计情况而选用现成载体或在载体上自行添加.另:表达的起始和终止,在目的基因上附带起始密码子和终止密码子.

蔚治转3270关于原核表达基因测序问题 -
计赖郭13031409399 ______ 其实简单一点,可以直接克隆到表达载体上,送去测序确定之后再表达;我们以前一直这么做的;但是有些情况下,比如表达载体不是诱导型的,或者表达的蛋白对大肠杆菌宿主菌毒性很大,影响菌的生长,导致菌生长困难、提质粒困难等等,就会先克隆到一个克隆载体上面,做测序确定;然后再克隆到表达载体上. 通常来说我不太喜欢做两次克隆,总是酶切转化筛选;我喜欢选控制比较严谨的可调控性原核表达载体,比如pET系列的多个载体,直接把目的基因克隆上去.

蔚治转3270有没有什么质粒既能在细菌表达又能在细胞表达 -
计赖郭13031409399 ______ 所有的质粒都是在细菌(原核)中构建和扩增的,但要在真核细胞中表达需要真核表达载体,要在原核细胞中表达需要原核表达载体.这两种载体主要的区别是启动子和polyA加尾信号的不同,一个适合在原核细胞中表达,一个适合在真核细胞...

蔚治转3270常用的基因工程载体有哪些?各有什么优缺点? -
计赖郭13031409399 ______ 1、质粒载体 pBR322 2、克隆载体 3、表达质粒载体真核细胞常见表达载体 .pCMVp-NEO-BAN载体 特点: 该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对,主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以...

蔚治转3270真核表达载体和原核表达载体的区别 -
计赖郭13031409399 ______ 主要是因为原核和真核表达系统所需的表达元件不同. 比如说启动子,终止子在两种表达系统中是不一样的. 带有真核表达元件的是真核载体,能在真核生物内表达; 带有原核表达元件的是原核载体,能在原核生物内表达. 两者都具有的为穿梭载体. 1)真核表达载体和原核表达载体就是能在真核生物或原核生物中表达的载体,它们一般都带有能在真核生物或原核生物中表达的必需表达元件; 2)真核表达和原核表达的目的都是为了能够大量获得自己所需要的目的基因的表达产物,最好有生物活性,以便下一步的实验需要. 3)原核表达载体一般只能在原核生物中表达外源基因,但有些穿梭载体可以分别在真核和原核生物中表达它们的表达元件.

蔚治转3270表达载体和克隆载体一样吗?有什么区别?实验室常用有哪些? -
计赖郭13031409399 ______[答案] 1.不一样 2.载体的分类 按功能分成: (1)克隆载体:都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增.它是用来克隆和扩增DNA片段(基因)的载体. (2)表达载体 :具有克隆载体的基本元件(ori,Ampr,Mcs等)还具有转录/翻译...

蔚治转3270请简单说明从土壤中分离纯化自生固氮菌的过程……如题…… -
计赖郭13031409399 ______[答案] DNA 纯化 在生物技术实验中,我们粗提取的DNA需分离纯化去处蛋白质等杂质,我们都需要将最终的结果在琼脂糖凝胶, ... 可重新连接酶切后的λDNA.若连接成功,则说明有效. 原核表达 将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋...

蔚治转3270最常用的真核细胞表达载体有哪些?各在哪些细胞中表达? -
计赖郭13031409399 ______[答案] 真核细胞常见表达载体 1.pCMVp-NEO-BAN载体 特点:该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对,主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成,在大多数真核细胞内都能高水平稳...