原生质体的制备步骤
文侨固1716如何制作真菌丝状体的原生质体? -
施寿毅18629438781 ______ 楼主想要原生质体保持丝状结构,还是分段也可以? 如果不要球保持丝状结构,用机械法就可以吧: 先在高渗糖溶液中预处理,等质壁分离后用机械搅拌打碎细胞壁. 要想得到完整丝状体,EA3-867复合酶之类的酶制剂就可以吧? 楼主可以说的再具体一点儿,什么真菌?补充: 机械法就可以,机械法虽然获得的原生质体比例较少(打碎了一些),但不会对原生质体活力(完好的)产生太大影响. 用酶解法,PH,温度等尽量要适于指定霉菌的自身特点,酶解之前要先消毒,也可以用相应的高渗溶液处理一下子. 酶解过程长短各种菌不一定. 之后呢,用网孔纸过滤,或低速离心机离心提取原生质体就可以了. 这样行吧同学? 打字很累的~~~~ : )
文侨固1716水稻原生质体的制备 -
施寿毅18629438781 ______ 往含愈伤组织的培养液中加入纤维素酶和果胶酶,除去愈伤组织的细胞壁即得到原生质体. 具体步骤怎样,我没做过此实验,不能凭空编造,我也不清楚.
文侨固1716什么叫植物原生质体 如何进行植物原生质体的融合 -
施寿毅18629438781 ______ 植物细胞有细胞壁,那么脱去细胞壁的植物细胞就叫原生质体.具体的脂质体融合技术有点复杂,大体就是: 1、两亲本菌株的选择和遗传标记的制作(选择不同的营养缺陷型,(A: [a+b-], B:[a-b+]) 对药物抗性差异) 2、原生质体的制备(高渗条件) 3、原生质体再生(测定再生率) 4、融合(PEG、离心沉淀、电脉冲等) 5、融合子的检出(直接检出法和间接检出法) 6、实用性菌株的筛选
文侨固1716原生质体分离 -
施寿毅18629438781 ______ 原生质分离:酶(纤维素酶,离析酶) 步骤:叶片表面消毒→去除表皮→叶碎片漂浮在含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→培育→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次→重悬浮于培养基→除去...
文侨固1716植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程如图所示:(1)获得原生质体后,需对其进行活力检查,下列各实验中,最合适的检测实验是___.A.观察原... -
施寿毅18629438781 ______[答案] (1)细胞质的流动是活细胞都具有的特征,因此获得原生质体后,需对其进行活力检查,最合适的检测实验是观察细胞质的流动.(2)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中,需要经过③有丝分裂、⑦脱分化和⑧再分化过程...
文侨固1716枯草芽孢杆菌培养基的配制方法? -
施寿毅18629438781 ______ 枯草芽孢杆菌常用培养基配方: 1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂 枯草芽孢杆菌原生质体的制备 1 培养枯草芽孢杆菌 取亲本菌株T4412、TT2 新鲜斜面分别接一环到装有液体完全培养基(CM)的试管中,36℃...
文侨固1716试简述固定化细胞和固定化原生质体在结构,特性,制备条件方面的区别 -
施寿毅18629438781 ______ 1.固定化细胞的结构为具有水不溶性的载体上固定了细胞,并且这些细胞能在一定空间范围内活动;而固定化原生质体的结构为失去细胞壁的细胞,之所以让有细胞壁的细胞失去细胞壁,是因为细胞壁会阻碍胞内物质分泌、氧的传递和营养成分...
文侨固1716革兰氏阴性细菌怎样变成原生质体 -
施寿毅18629438781 ______ 革兰氏阴性菌要获得其原生质体要比阳性菌复杂得多,因为其细胞壁不仅有肽聚糖,还有脂多糖等等. 一般来说要获得其原生质体需要在培养细菌过程中加入足够量的EDTA以此来激活其细胞壁对于溶菌酶的活性,再用溶菌酶来处理获得. 用来研究用的革兰氏阴性菌一般被制成球状体(原生质球),即保留一部分细胞壁的革兰氏阴性菌.
文侨固1716植物细胞融合的步骤
施寿毅18629438781 ______ 原生质体制备——原生质体融合 原生质体制备:一般采用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶(以品种而异),显微镜下观察,细胞变圆 就可以了.离心洗涤 除酶,收集原生质体.纯化原生质体.期间注意用等渗溶液. 原生质体融合:化学融合(常用 PEG聚乙二醇诱导融合法 ), 有条件的话 电融合更可取,需要用到 电融合仪器.最主要和麻烦的是第一步 原生质体制备,融合是靠仪器完成的.
文侨固1716 酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用.蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取.为了... -
施寿毅18629438781 ______[答案] (1)为了使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效果 (2)果胶酶和纤维素酶 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 排除无关变量的干扰 (3)等渗溶液 (4)低渗涨破法