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双酶切法的优缺点

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-27

嵇步试1714双酶法制糖的优缺点 -
曲黎秦19334201650 ______ 优点副产物少,可用较高淀粉乳浓度,糖液质量高 缺点,生产周期长,过滤困难

嵇步试1714单酶切重组DNA有哪些弊端,如何避免 -
曲黎秦19334201650 ______ 单酶切重组DNA的弊端主要是可能会发生自身环化现象. 避免自身环化的方法:可以选择双酶切.

嵇步试1714两个相邻的酶切位点用双酶切能切开吗 -
曲黎秦19334201650 ______ 两个酶只相当于一个酶要具体看这两个酶的序列之间隔了多少个bp;还有就是如果这两个酶共用碱基的话就不行,有些酶的话隔的太近的话双酶切效率很低,需要分别单酶切

嵇步试1714不同的平末端可以用dna连接酶连起来吗 -
曲黎秦19334201650 ______ T4噬菌体DNA连接酶 外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子.重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接...

嵇步试1714单酶切和双酶切的定义分别是什么?它们有什么不同? -
曲黎秦19334201650 ______ 单酶切就是只用一个限制性内切酶去切你的质粒,环状的质粒就成为线状的了,但质粒的大小不变双酶切用两个限制性内切酶,质粒上就产生了两个缺口,环状质粒就变成两段线状DNA了.回收你需要的那一段,因为它的两端和你的目的基因带有互补的黏性末端(当然目的基因也要用这两种酶切才行),在T4DNA连接酶在作用下,它们就连到一起了.你该看看《生物化学》或基因工程方面的书.这都是基本的知识啊.

嵇步试1714构建载体时为什么用双酶切而不用但酶切 -
曲黎秦19334201650 ______ 有两个方面,一是载体本身酶切不充分,没有完全切开;二是去磷酸化不充分.

嵇步试1714设计ecor i和bamh i双酶切的目的是什么
曲黎秦19334201650 ______ 防止目的基因的自身环化.

嵇步试1714对于载体的单酶切和双酶切,胶图分别会如何?为什么会这样啊?谢谢帮忙回答? -
曲黎秦19334201650 ______ 单酶切一个电泳道上会有几个比较亮的带,而且你所根据基因大小所选择的条带内也不一定是你要的.原因是单酶切形成的粘性末端完全相同,就像拼图,除了内容不同,两边完全切合.所以结合方式过多,可能性也多,如质粒和目的基因正确连接,质粒和目的基因反转连接,质粒和质粒连接,目的基因与目的基因的连接. 双酶切一般会有3条带,而且正确现象应只有一个是非常亮的.因为两种酶识别两个位点切开,无论是质粒还是目的片段两端的粘性末端完全不同,还是拼图,内容不同,两端切合口也不同,除了一种连接方式外没有其他连接了.胶途中3条带分别为:目的片段条带,空质粒条带,最亮的重组质粒条带.

嵇步试1714双酶切防止目的基因反接 -
曲黎秦19334201650 ______ 双酶切以后目的基因上是有标记基因的,所以看是否有标记基因就能判断是否导入了多余基因.单切酶的话同理,如果是一个切割位点就更没问题了.

嵇步试1714载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗 -
曲黎秦19334201650 ______ 要具体看这两个酶的序列之间隔了多少个bp,有些酶的话隔的太近的话双酶切效率很低,需要分别单酶切;还有就是如果这两个酶共用碱基的话就不行,两个酶只相当于一个酶.

(编辑:自媒体)
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