吸光度标准曲线怎么画

       文丨初八没烦恼
       编辑丨初八没烦恼


       荞麦又称乌麦
       ，为一年生廖科草本、具有双子叶的植物，是一种药食两用的小杂粮农业作物，荞麦中含有包括蛋白质、膳食纤维和微量矿质元素等27种有益的化学物质。
       营养物质占比多数优于一般的粮食作物，最重要的是荞麦中含有其他作物所缺乏的类黄酮生物活性成分，中国是荞麦原产地之一。


       此次根据修订的中国荞麦属植物分类学，将产地为中国的荞麦属28个种归并为21个，其中栽培种有3个，即为甜荞麦和
       苦荞麦和金荞麦
       。
       类黄酮是荞麦体内发挥重要生理作用的一类低分子量的酚类次生代谢产物，又名黄酮类化合物，大多数都有颜色。


       荞麦黄酮化合物
       在荞麦种子、花及根部等器官中广泛分布，类黄酮包括芦丁、牡荆素、槲皮素、花青素、黄酮醇和异牡荆素等。
       类黄酮
       具有抗氧化、抗糖尿病、改善心脏和血管疾病、抗炎杀菌、镇痛等多种药理作用，随着对荞麦黄酮化合物营养和药用价值的了解，荞麦也被广泛应用。


       研制出多种荞麦加工制品，涵盖医疗类、保健类、米面茶饮类等，近年来，国内外对作物种皮颜色与品质相关的研究越来越多。
       如通过测定胡麻籽粒颜色与棕榈酸、亚麻酸含量等品质性状发现，
       种子明度
       、红绿度、黄蓝度均与棕榈酸有显著的相关性，二者为正相关。


       籽粒的b*值与油酸含量有显著负相关性、与亚麻酸含量有显著正相关性，种子颗粒较大，a*较小、b*较大的品种胡麻品质较高。
       通过对5种种皮颜色差异较大花生的营养成分、结构特性以及种皮色素进行综合研究发现，粉红色的“铜仁珍珠”花生蛋白质含量最高，呈味氨基酸中天门冬氨酸和
       谷氨酸
       含量最高。


       含量最低的为紫色条纹的
       “紫魁”花生
       ，通过对荞麦粒色与品质、千粒重、谷壳率的综合分析得出，黑色荞麦氨基酸含量最高，褐色荞麦的维生素E含量最高。
       灰色荞麦维生素PP含量最高，褐色荞麦所含硒元素最多，但是通过分析荞麦种皮颜色与类黄酮含量关系，研究荞麦品质的研究鲜有报道。


       对123份
       不同的荞麦种子类黄酮
       含量及其颜色差异进行分析，研究荞麦种皮颜色与种子中类黄酮含量的关系。
       以期能够通过荞麦种皮颜色快速判断种子中类黄酮含量高低，为筛选富含类黄酮的荞麦品种奠定基础。


       通过观察甜荞和苦荞的种皮颜色，可以看到甜荞大多为黑褐色、棕色，偏向黑色，3号的种皮颜色最浅，为棕色。
       编号为3号的甜荞种皮颜色最深，为黑褐色，苦荞大多为棕色、灰色、黄色，偏向黄色，编号为7号的苦荞种皮颜色最浅，呈黄色，
       4号的种皮颜色最深，呈黑色
       。


       种皮色差值测定对甜荞和苦荞种子色差值进行测定，结果显示，123份荞麦材料种皮亮度范围在中，由甜荞色差值可看出，
       甜荞种皮
       颜色的范围在值最小的20201043，颜色为褐色。
       a*值最大的是20201066，颜色为黑褐色，值在5.23±0.47~9.09±0.53之间，值最小的20201001，颜色为褐色，最大的是20201041。


       b*种皮褐色，的值在6.12±0.37~12.56±1.62之间，的值最小的是3号，颜色为棕色，的值最大的是20201051，种皮颜色黑褐色，由苦荞色差值可看出。
       苦荞种皮颜色
       的的范围在22.26±0.30~41.35±0.92，值最小的是20202024，颜色为黑色，值最大的是20202033，颜色为灰色，在2.24±0.24~8.88±0.06范围中，值最小的是20202009。


       颜色为黑褐色，值最大的是20202010，颜色为黄色，在2.18±0.08~14.83±0.24，值最小的是4号，颜色为黑色，值最大的是7号，
       颜色为黄色
       。
       对荞麦种皮色差各指标间进行显著性分析，分析结果可以看出，66份甜荞的、均大于0.05，差异性不显著，说明不同甜荞材料间、变化及差异较小，值小于0.05，差异性显著。


       说明不同甜荞材料间变化及差异较大，57份苦荞中、值均小于0.01，差异性极显著，说明不同荞麦材料间变化及差异明显。
       由吸光度和标准曲线可以得出123份荞麦种子类黄酮含量，
       66份甜荞种子
       中类黄酮含量在10.90±0.80~17.18±0.63mg/g之间，其中20201014的类黄酮含量最低，为10.90±0.80mg/g。


       种皮颜色为黑色，含量最高的是20201051，为17.18±0.63mg/g，种皮颜色为黑褐色，57份苦荞种子中类黄酮含量在14.65~43.84mg/g之间，
       4号的类黄酮含量最低。
       为14.65±0.57mg/g，种皮颜色为黑色，类黄酮含量最高的是7号，为43.84±1.09mg/g，种皮颜色为黄色，通过对比甜荞和苦荞中的类黄酮含量发现。


       苦荞种子中类黄酮含量大部分高于甜荞，且甜荞各品系之间类黄酮含量差异变化不大，对种子中类黄酮含量进行显著性分析。
       结果表明甜荞、苦荞的变化及差异都比较小，
       差异性不显著
       ，说明同一品种间的差异较小。


       种皮颜色与类黄酮含量相关性分析
       对比甜荞与苦荞的色差值与种子中类黄酮含量进行显著性分析，结果显示，甜荞与苦荞相比种皮的、类黄酮含量差异显著性，说明差异极显著，不同品种之间种皮颜色的亮度。
       红度和类黄酮含量都有很大差异，
       甜荞与苦荞
       种皮相比值显著性，差异性显著，甜荞种皮颜色相似，大多为黑褐色、棕色，而苦荞种皮颜色类型多样。


       所以两个品种间、类黄酮含量差异性显著，对种皮颜色与种子类黄酮含量进行相关性分析，可以看出，甜荞中与种子类黄酮含量没有显著的相关性，测定值分布范围小。
       甜荞种皮颜色较单一，亮度大多相似，表示红绿色，荞麦种皮颜色中没有红色和绿色，所以与的无显著性相关，与种子类黄酮含量显著性相关，表示黄蓝色，
       荞麦种皮无蓝色。


       因此，荞麦种皮颜色越接近黄色，种子中类黄酮含量越高，在苦荞中，种皮颜色、、均与种子中类黄酮含量显著相关。
       苦荞种皮颜色与
       种子类黄酮
       含量二者呈正相关，荞麦种皮越接近黄色，荞麦种子类黄酮含量越高。


       种皮值与种子中类黄酮含量呈显著相关性，荞麦种皮无蓝色，所以越大，种皮颜色越接近黄色，种子中类黄酮含量就高。
       荞麦种皮颜色差异是荞麦种类识别和分类的重要特征，在荞麦种皮中曾鉴定出18种不同的代谢物，包含16种类黄酮，其中有14种类黄酮都
       与荞麦种皮颜色有关。


       荞麦中所含的类黄酮参与了次生代谢的过程，并与苦荞种皮颜色有关，通过组织化学特异染色方法可快速检测到荞麦种皮中的类黄酮物质。
       在培育荞麦种子中对种皮颜色做出早期预测，研究通过荞麦种皮颜色、种类等方面快速筛选出类黄酮含量高的荞麦品种，从种皮颜色和测定
       种子类黄酮
       含量发现。


       种皮颜色观察和色差值测定
       种皮颜色与类黄酮含量呈正相关，种皮颜色越偏向黄色，的值越大，种子中类黄酮含量越高，从123份荞麦类黄酮测定结果来看，苦荞种子类黄酮含量显著高于甜荞。
       同时苦荞值也大于甜荞，但种皮的和对种子中类黄酮含量的影响，还需进一步实验证明其相关性，甜荞分为
       黑色、褐色、棕色、灰色
       四种。


       但本实验所选用材料较多，结果表明甜荞种皮颜色较单一，多数为黑褐色、棕色，颜色变化范围较小，苦荞不同材料间种皮颜色变化差异较大。
       从黑色、黑褐色、褐色、棕色、灰色、淡黄色和黄色均有分布，变化范围大，荞麦作为一种公认的研究价值高的粮食作物，
       类黄酮
       的提取方法也是备受重视。


       可用醇提取法，以甲醇为溶剂提取黄酮，用分光光度计测定总黄酮含量，也可采用超声波、微波辅助醇提取法两种方法提取苦荞中黄酮类化合物。
       并且，对比分析总黄酮含量和提取时间，发现微波提取法比超声提取法好，实验采用醇提取法，以60％的乙醇为溶剂，使用酶标仪测定荞麦种子中类黄酮含量，
       甲醇具有刺激性气味
       。


       具有毒性，乙醇低毒性，在实验操作过程中，对实验人员伤害性较小，便于操作，提取方法，酶标仪可以一次性测定大量样品。
       节约时间、试剂用量
       和样本，操作简单、检测速度快，从而提高测定效率，最重要的是酶标仪可以减少样品间类黄酮含量的误差。


       种皮颜色观察，用数字显微镜对123份荞麦种子拍照，记录种皮颜色，种皮色差值测定，每份荞麦种子经人工去杂、剔除病害、杂粒和不饱满粒后。
       利用精密色差仪测量种子颜色参数，在避光的条件下对123份不同的荞麦种子随机选取10个不同的点进行色差平均值测定，
       测定3次。


       然后求平均值，算出每一种荞麦种皮色差范围，获得测量值，其中，L*表示亮度，L*值越大，种皮颜色越亮，反之越暗，a*表示红绿色，a*值越大。
       种皮颜色越偏向红色，反之越偏绿色，b*表示黄蓝色，b*值越大，种皮颜色越偏黄色，
       反之越偏蓝色。


       荞麦因种子
       中富含类黄酮，而成为一种药食同源的作物，种皮颜色会受植物体内类黄酮含量影响，研究以123份不同的荞麦材料为研究对象，测定荞麦种皮颜色及类黄酮含量。
       并对种皮颜色与类黄酮含量进行相关性分析，以期能够通过种皮颜色快速判断荞麦种子中类黄酮含量高低，为筛选富含类黄酮的荞麦材料奠定基础。


       荞麦种皮颜色和类黄酮含量分析结果中看，甜荞颜色较单一，多数为黑褐色、棕色，类黄酮含量变化范围较小，苦荞不同材料间颜色变化差异较大。
       黑色、黑褐色、褐色、棕色、灰色、淡黄色和黄色均有分布，类黄酮含量变化范围大，分析种皮颜色与类黄酮含量关系表明，二者呈正相关，荞麦种子中
       类黄酮含量越高
       ，种皮越接近黄色。

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