如何构建重组质粒
证券之星消息，根据企查查数据显示康乐卫士（833575）新获得一项发明专利授权，专利名为“一种基于Tac启动子的质粒表达载体构建及其用途”，专利申请号为CN202310114443.2，授权日为2024年3月12日。
专利摘要：本发明涉及一种基于Tac启动子的质粒表达载体改造和构建方法，其中替换其SD序列并进一步敲除标签序列，如此构建的表达载体在重组外源蛋白表达中的应用，特别是在人乳头瘤病毒L1抗原蛋白表达及其L1抗原蛋白表达产物在预防宫颈癌中的用途。
今年以来康乐卫士新获得专利授权1个。结合公司2023年中报财务数据，2023上半年公司在研发方面投入了1.04亿元，同比减14.26%。
数据来源：企查查
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许玲钓2757构建重组质粒 -
温查龚18626478872 ______ 楼主设计引物的时候有加保护碱基吗,会不会切了PCR产物.1kb的目的基因不长不短.合成过程还要看序列的GC含量.如果有局部GC较高的区域,建议楼主分段合成.我之前自己合过几条3kb左右的序列,因为GC含量较高,试了很多种方案,差不多做了1个月.后面几条直接给金唯智合了,正常1kb左右的序列一周就能拿到了,楼主可以试一下.
许玲钓2757目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒,pBR322质粒是较早构建的质粒载体,其主要结构如图一所示.(... -
温查龚18626478872 ______[答案] (1)质粒上的抗性基因可作标记基因,便于鉴定受体细胞中是否导入目的基因.(2)在目的基因的两侧各有1个EcoRⅠ的切点,即目的基因两侧有-GAATTC-,且EcoRⅠ的切割位点在G和A之间,因此目的基因两侧被限制酶EcoRI切...
许玲钓2757重组质粒形成与复制都在细胞内吗? -
温查龚18626478872 ______ 此后,要把基因表达载体也就是重组质粒导入受体细胞,再对目的基因进行选择(质粒上有标记基因),然后让重组质粒复制和表达,(在这里重组质粒是随受体细胞共同复制的),这些是在细胞内进行的.
许玲钓2757(2011•松江区二模)科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组,并在大肠杆菌中成功表达.如图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程... -
温查龚18626478872 ______[答案] (1)将质粒切割开用限制酶,将目的基因与质粒连接起来用DNA连接酶.(2)由图中限制酶切割位置可知,目的基因插入的位置是氨苄青霉素抗性基因中.(3)步骤③是基因工程第三步:将目的基因导入受体细胞.(4)培养...
许玲钓2757回答下列有关生物工程技术问题.(1)在基因工程中,构建重组Ti质粒时,通常要用___分别切割___和___,再用___进行连接.整合了目的基因的重组质粒,... -
温查龚18626478872 ______[答案] (1)在植物基因工程中,构建重组Ti质粒时,通常要用(同种)限制酶分别切割含目的基因的DNA分子和Ti质粒,使它们产生相同的黏性末端,然后再用DNA连接酶进行连接.重组质粒在组成上含有启动子、终止子和标记基因....
许玲钓2757重组菌株构建与重组质粒的构建有什么联系? -
温查龚18626478872 ______ 首先构建重组质粒,无论是克隆载体还是表达载体,将该重组质粒转化至工程菌株中,无论是DH5a还是BL21其他菌株,携带该阳性质粒的工程菌株叫做重组菌株.
许玲钓2757(2014•金山区一模)图一为含有目的基因的DNA(外源DNA),图二为某质粒,表中是几种限制酶识别序列及其切割位点.用图中的外源DNA与质粒构建重组... -
温查龚18626478872 ______[答案] (1)质粒切割前是双链环状DNA分子,所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键,故不含游离的磷酸基团.从图1可以看出,质粒上只含有一个SmaⅠ的切点,因此被改酶切割后,质粒变为线性双链DNA分子,因每条链上含有一个游离的磷酸基团,因此切割...
许玲钓2757如图表示利用某种细菌中提取的抗虫基因培养抗虫玉米的大致过程.请回答下列问题:(1)A过程所需的酶是___.构建重组质粒时,将抗虫基因连接到Ti质粒的... -
温查龚18626478872 ______[答案] (1)A过程为示基因表达载体的构建过程,所需的酶是限制酶和DNA连接酶.图中D过程采用了农杆菌转化法,其原理是:农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.根据农杆菌的这一特...
许玲钓2757...请回答相关问题:(1)限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定___,并且使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的___键断开.(2)构建重组质粒时,常用Ti... -
温查龚18626478872 ______[答案] (1)限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列(或者碱基序列),并且使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开. (2)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有T-DNA,它能把目的基因整合到受体细胞染色体...
许玲钓2757怎么构建克隆载体和表达载体?
温查龚18626478872 ______ 首先根据你的实验需要选择相应的载体 其次分析你的基因序列以及载体序列上的酶切位点,切记在载体上所选择的酶切位点要和你的基因序列上相一致,并且这两个酶切位点在你的基因序列中并不存在,否则会将基因切断 再次就是对基因和载体进行酶切了,基因要是直接用带有酶切位点的引物进行PCR的话就不用再酶切了.酶切之后进行连接,一般都有连接试剂盒的. 最后的重组质粒要转化至大肠杆菌中进行扩增,然后提取这个质粒进行酶切鉴定.