定磷法测定rna含量的原理

敖邱卷593在进行动物细胞的RNA 的含量测定的时候,应该用什么定容RNA制品 -
夏严丹19548479916 ______ 加入1/10体积的NaAc(3M)和2ul糖原-80℃或-20℃放置1小时,然后于低温离心机4℃离心(13000rpm、20min),倒掉乙醇(注意不要倒掉沉淀),然后加入500ul75%乙醇溶液洗涤沉淀,低温离心(13000rpm,5min),然后将乙醇溶液吸干并晾干,接着就可以用DEPC水或RNase free水溶解沉淀即可~

敖邱卷593紫外法测RNA含量时,为什么要固定测定液的pH值,若不固定pH值,会影响测定结果吗?为什么? -
夏严丹19548479916 ______ 提取物中除了RNA还有少量的DNA,残留的DNA双链在微酸中会水解,DNA水解过后碱基暴露,形成寡聚核苷酸,寡聚核苷酸的紫外吸收高于DNA双链,会影造成结果紫外吸收值偏高

敖邱卷593核酸含量的测定 紫外吸收法的原理是什么? -
夏严丹19548479916 ______ 蛋白质也有紫外吸收,通常蛋白质的吸收高峰在280nm波长处,在260nm处的吸收值仅为核酸的1/10或更低,因此对于含有微量蛋白质的核酸样品,测定误差较小.若待测的核酸制品中混有大量的具有紫外吸收的杂质,则测定误差较大,应设法除去.不纯的样品不能用紫外吸收值作定量测定. 从A260/ A280的比值可判断样品的纯度.纯RNA的A260/ A280≥2.0;DNA的A260/ A280≥1.8.当样品中蛋白质含量较高时,则比值下降.RNA和DNA的比值分别低于2.0和1.8时,表示此样品不纯. 生物帮上面有这方面的详细介绍, 生物问答 http://www.zhibio.com/

敖邱卷593提取细胞RNA之后,为什么要测RNA浓度 -
夏严丹19548479916 ______ 提取细胞RNA之后,为什么要测RNA浓度 1、提取RNA测浓度时 A260/A280 大于3的原因可能是降解. 2、一般对于DNA,纯净的时候比值是1.8,而对于RNA则是接近2.0.如果超过这个值,那么最有可能的就是核酸降解了,因为寡聚的核酸和...

敖邱卷593定磷法测定核酸含量的优缺点是什么 -
夏严丹19548479916 ______ 可以用cuso4

敖邱卷593试述两种测定DNA 浓度的方法? -
夏严丹19548479916 ______[答案] 测定 RNA浓度按以下步骤进行操作:⑴ 取1μl RNA原液,放在0.5ml EP管中,加入249μl dd H2O,用移液枪反复混匀. ⑵ 用dd H2O为空白对照,调节A260零点.⑶ 倒掉比色杯中的水,加入稀释并混合均匀的RNA样液,测定A260值.倒...

敖邱卷593如何测量RNA的纯度和含量 -
夏严丹19548479916 ______ 1. 相关概念RNA质检参数OD260/OD280、OD260/OD230的意义.260、280、320、230nm下的吸光度分别代表了核酸、蛋白质、盐浓度和有机溶剂的值.A230: 测定其它碳源物质,如酚,糖类等.A260:核酸的吸收峰测,测RNA,DNA,引...

敖邱卷593如何鉴定核糖 -
夏严丹19548479916 ______ 核糖具有醛糖的通性 有醛基 和葡萄糖一样可以用斐林试剂检验