定量按rna浓度还是cdna

冶帝媚2527进行荧光定量pcr实验时,对提取RNA质量要求多高 -
虞祁娴17589997419 ______ 260在0.2以上,260/280在1.9~2.1之间,电泳条带单一且足够亮,几乎没有降解.

冶帝媚2527定量pcr如果已经反转录,如何调量.在做反转录之前没有定mrna量,能否实时荧光后根据内参定量 -
虞祁娴17589997419 ______ 可以将RNA原液测一下OD值,根据260、280、320的数值计算出RNA浓度,然后调整反转录的反应体系,从而得到CDNA的量.没有定RNA的量的话,如果做相对定量是可以得出相对量值的,但是如果做绝对定量,就不能得出准确结果.

冶帝媚2527RNA用反转录试剂盒进行反转录时,一定要知道RNA的含量吗? -
虞祁娴17589997419 ______ 询问卖试剂盒的公司 效果比较好.其次是查文献和上论坛提问 同种材料 同种试剂盒 别人做过的 可比性较高. 如果是直接说明针对某种样品 说明了取多大样品量的 往往就是取样了一路按说明做.成功与否与样品本身和试剂盒质量有关. 如果是已经提了RNA的,只反转录 若试剂盒上说明了可收拾的模板的量的范围的 取其内的一个值 除以浓度( 溶解提取的RNA后 比色法测定 用核酸蛋白微量测定仪 或者紫外分光光度计 记录od值 换算出以微克每毫升表示的浓度值 这一步也得到衡量提取物的品质的od值比 一般要求在一个范围之中 才认为后续使用比较保险 说不定还需纯化或 直接要重提以保质保量的) 计算好取样的体积 取了上样 使用试剂盒转录.

冶帝媚2527如何判定核酸样品的纯度 -
虞祁娴17589997419 ______ 您好! ① 如果是看DNA或者RNA的纯度,可以通过OD260/OD280比值来衡量,DNA OD260/OD280比值在1.8-2.0;RNA >2.0.如果比值② 如果是多个核酸样品混合物,则通过电泳来看目的条带在混合物中比例. 百度教育团队【海纳百川团】为您解答. 感谢您的采纳 O(∩_∩)O .如有疑问,欢迎追问.

冶帝媚2527在提mRNA的时候OD值偏低在1.3左右,用这个反转录之后做出来的荧光定量PCR的结果可信吗 -
虞祁娴17589997419 ______ 是OD260/280吗?最适范围在1.8~2.0之间. 1.3 ,低于最适范围,说明有蛋白等污染,会影响后续PCR试验中的酶活性.

冶帝媚2527做定量pcr时 提取的rna什么情况下能用 -
虞祁娴17589997419 ______ 做定量pcr时 提取的rna什么情况下能用 1.其实反转录要求不是很高,所有器具消毒操作带手套口罩就行,没必要加RNaseInhibitor 2.OD260/280实际上反应的是蛋白质杂质的比例,可以间接的反应有没有RNA酶污染,所以这个比值低了有可能是...

冶帝媚2527用吸收紫外线法定量测定核酸? -
虞祁娴17589997419 ______ 平时用紫外吸收法进行估算很是方便快捷 1) 浓度估算 RNA浓度= 40 X A260 (mg/L) 也就是说如果你配的RNA溶液在260nm处吸收(A或OD)为1, 则这个溶液的浓度为: 1X40=40mg/L 至于摩尔浓度就要你自己根据序列用软件计算分子量后...

冶帝媚2527如何测量RNA的纯度和含量 -
虞祁娴17589997419 ______ 1. 相关概念RNA质检参数OD260/OD280、OD260/OD230的意义.260、280、320、230nm下的吸光度分别代表了核酸、蛋白质、盐浓度和有机溶剂的值.A230: 测定其它碳源物质,如酚,糖类等.A260:核酸的吸收峰测,测RNA,DNA,引...

冶帝媚2527如何做好RNA质控 -
虞祁娴17589997419 ______ 样品中RNA的纯度及整体质量对于后续的实验有重要的影响.以下是进行PCR array前RNA质控的推荐标准: 定量:NanoDrop/Spectrophotometer(用于检测样本中的核酸浓度,蛋白与核酸的比例及是否存在污染,例如有机物/盐离子等污染)...

冶帝媚2527蛋白定量分析 -
虞祁娴17589997419 ______ 蛋白质的定量定主要有直接紫外吸收法、Bradford法和Lorry法三种.蛋白质中存在着含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,所以任何一个蛋白质都具有280nm附近的紫外吸收峰,在此波长范围内,蛋白质溶液的光密度OD280nm与其浓度呈正比关系...