小鼠pcr基因敲除实验

蒋朗树3352什么是完全基因敲除和条件型基因敲除 -
王玲琰15048751624 ______ 完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性. 条件型基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除.

蒋朗树3352基因敲除自20世纪80年代末发展起来,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术,下图是基因敲除技术之一的示意图:该技术的主要步骤及应用... -
王玲琰15048751624 ______[答案] (1)第一步是构建打靶载体.把2个标记基因(新霉素抗性基因neo和单纯疱疹病毒胸苷激酶基因HSV-TK)插入到含目的基因(与待敲除的基因同源)的载体中,使目的基因失活. (2)第二步是将打靶载体通过显微注射技术导入ES细胞中,失活的目的...

蒋朗树3352为何基因敲除需要用到嵌合体小鼠 -
王玲琰15048751624 ______ 嵌合体是指动物的两颗受精卵融合在一起成为一个个体并成长.遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体,亦指染色体异常类型之一.转基因小鼠制备过程中必须要经历的一个过程,所以基因敲除小鼠必须要用到嵌合体小鼠.

蒋朗树3352分子生物学实验员,和基因敲除小鼠模型实验,这两份工作哪个技术含量更高?或者哪个更难? -
王玲琰15048751624 ______  分子生物学实验员,和基因敲除小鼠模型实验,这两份工作后者技术含量更高. 他们属于两个不同的研究方向.分子生物学是指从分子水平上研究生命现象物质基础的学科.研究细胞成分的物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系,如遗传信息的传递,基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能,以及细胞信号的转导等. 而基因敲除属于狭义的基因工程.仅指用体外重组DNA技术去获得新的重组基因,按人们意愿设计,通过改造基因用基因敲除手段,获得有遗传缺陷的动物等. 目前来说,后者更难,研究方向更明确,也更有挑战性和意义.

蒋朗树3352怎么用特异性重组的方法来敲除某个基因
王玲琰15048751624 ______ 把你要敲除的基因先从序列中找出来.以这个基因的两端的几个碱基设计两对特异性引物(引物中不包含要敲除的基因).在靠近要敲除的基因两端引物中各加上一个同种限制性内切酶位点,PCR扩增,扩增产物没切回收,回收产物连接.连接产物中就不含要敲除的基因了.最后测序确认.

蒋朗树3352诺贝尔生理学或医学奖得主马里奥·卡佩基等三位科学家创造了“基因敲除”的方式: 用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA 同源序列中,使某一个基因... -
王玲琰15048751624 ______[选项] A. 这种嵌合体小鼠长大后体内存在外源基因,而且可能会遗传给后代 B. 在基因敲除中需要用到限制性核酸内切酶等 C. 通过“基因敲除”方式导致的变异类型属于基因突变 D. 基因敲除技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究

蒋朗树3352那位高手能告诉一下genotyping是什么技术 -
王玲琰15048751624 ______ 原理就是基因敲除的老鼠一般是用2只 +/- 的老鼠交配,生下来的后代有1/2 +/-,1/4 +/+ 和1/4 -/-. 有些基因敲除老鼠从外表不能分辩到底是 +/+, +/-和-/-,就需要genotyping.原理就是做基因敲除的时候,人为地在目的基因前面插入一截序列使目的基因失去表达.设计引物用PCR扩增这个片段的话,已敲除的genome会和wild type的PCR产物长度不同.利用PCR产物的长度来判断老鼠到底是+/+, +/-还是-/-.其实就是PCR,属于技术员干的活.

蒋朗树3352科学家创造了“基因敲除” -
王玲琰15048751624 ______ 您的问题中是要求选错误的选项,C是错的,ABD都是对的.以下是我的解释,如果有说的不对的地方,希望有朋友来补充.C选项错在,基因敲除是定向的改变小鼠基因组中的一段DNA序列,它是定向改变的,即是靶向的去改变.我们可以定...

蒋朗树3352科学家创造了“基因敲除”技术:用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中,使某一个基因被取代或 -
王玲琰15048751624 ______ A、这种嵌合体小鼠长大后,体内存在人类囊肿性纤维化病的致病基因,属于杂合体,可能会遗传给后代,故A正确; B、根据题干信息“用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中”,则需要限制酶和DNA连接酶,故B正确; C、依题干信息可知,“基因敲除”实质上是用外源基因取代或破坏DNA同源序列中的某一个基因,导致其失活,属于基因重组,故C错误; D、“基因敲除”技术成功的培育出了患囊肿性纤维化病的小鼠,可作为实验材料利于人类对遗传病进行研究,故D正确. 故选:C.