常用原核表达载体
一、背景介绍:抗性基因(resistant gene)
(1) 在质粒图谱中的AmpR、KanR等表示质粒载体中的筛选标签,多为抗生素抗性基因,方便后续通过抗生素筛选阳性克隆。
(2) 抗生素兼具了成本低廉、易操作、可控制等优点。
(3) 只存在单抗性的质粒多为原核克隆载体和原核表达载体。
(4) 存在两种或以上的抗性的多为穿梭质粒。
(5) 抗性基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否,如果抗性基因成功导入并表达基因,那么该生物就具有相应的抗性,据此判断基因表达载体是否成功导入细胞内。
(6) 在分子生物学实验中常用存在于质粒上的抗性基因,如抗四环素基因,将目的基因接到含该标记基因的质粒上,再将重组质粒导入受体细胞。理论上,受体细胞(如大肠杆菌)就对四环素表现抗性,当实验员用选择培养基(比如含有四环素的培养基)来培养受体细胞时,能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功地导入了重组质粒,这样,成功导入重组质粒的细胞就被选择出来。
二、抗生素储存液常用品种有哪些
(1) 常用原核抗性
抗生素 | 英文名 | 英文缩写 | 贮存浓度(mg/ml) | 工作浓度(mg/L) | 保存条件 |
氨苄青霉素 | Ampicillin | Amp | 100 | 100 | -20℃ |
卡那霉素 | Kanamycin | Kan | 50 | 50 | -20℃ |
氯霉素 | Chloramphenicol | Chl | 25 | 25 | -20℃ |
壮观霉素 | Spectinomycin | Spe | 100 | 100 | -20℃ |
四环素 | Tetracycline | Tet | 10 | 50 | -20℃ |
链霉素 | Streptomycin | Str | 50 | 50 | -20℃ |
庆大霉素 | Gentamicin | Gen | 50 | 50 | -20℃ |
硫酸安普霉素 | Apramycin sulfate | Apr | 25 | 25 | -20℃ |
红霉素 | Erythromycin | Ery | 100 | 600 | -20℃ |
利福平 | Rifampin | Rif | 50 | 50 | -20℃ |
头孢噻肟钠 | Cefotaxime sodium | Cef | 50 | 50 | -20℃ |
羧苄青霉素钠 | Carbenicillin | Car | 50 | 50 | -20℃ |
(2) 常用真核抗性
抗生素 | 英文名 | 英文缩写 | 贮存浓度(mg/ml) | 工作浓度(mg/L) | 保存条件 |
新霉素 | Neomycin | Neo | 100 | 100 | -20℃ |
嘌呤霉素 | Puromycin | Kan | 50 | 50 | -20℃ |
潮霉素B | Hygromycin B | Hyg | 50 | 50 | -20℃ |
博来霉素 | Zeocin/blemycin | Zeo/ble | 100 | 100 | -20℃ |
杀稻瘟菌素 | Blasticidin S | Blast | 10 | 75 | -20℃ |
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