异戊醇在dna提取中的作用
金融界2024年3月9日消息，据国家知识产权局公告，贵州茅台酒股份有限公司申请一项名为“白酒生产用曲的微生物总DNA提取方法“，公开号CN117660438A，申请日期为2023年11月。
专利摘要显示，本申请提供的白酒生产用曲的微生物总DNA提取方法，包括：S10：在研磨器具中加入研磨珠、未经前处理的待提取白酒生产用曲以及溶菌酶溶液，混匀，室温放置第一预设时长，得到第一混合液；S20：在第一混合溶液中加入DNA沉淀促进剂和十二烷基磺酸钠水溶液混匀，加入DNA抽提酚和氯仿‑异戊醇溶液后研磨，得到经研磨裂解的第二混合液，其中，所述十二烷基磺酸钠水溶液中十二烷基磺酸钠的质量分数为10wt％～20wt％。对白酒生产用曲进行直接裂解，省去了可能导致预测数据失真的前处理步骤，简化操作步骤，在裂解时选用没有有毒挥发性试剂的十二烷基磺酸钠水溶液作为裂解液保证微生物DNA提取效果的同时极大限度的降低了生产用曲中色素等杂质因素的残留。
本文源自金融界
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阳洁艺15720389696 ______ 其实提取细菌基因组DNA并不是要用到上面提到的所有试剂.TE是用来浮起细菌的.如果是阳性菌的话最好是用溶菌酶处理一下.SDS可以让细胞裂解,并与核蛋白结合(当然也包括DNA).蛋白酶K自然是降解蛋白的.到这一步可以直接用异丙醇沉淀,70%乙醇洗一次(洗去少量的盐分).凉得差不多再用少量TE溶解就得到DNA了.当然,在蛋白酶K处理过后,也可以用1.4M NaCl沉淀一下蛋白(DNA在此浓度溶解度增加,而蛋白减小).或者用酚:氯仿:异戊醇(25::24:1)PH>7.8抽提,去蛋白.其后依旧用异丙醇沉淀,70%乙醇洗.CTAB/NaCl功能与SDS相当,但一般用于提取植物基因组.
邢童妹4518DNA提取中整个实验过程中,一共有几次离心?每次离心的作用是什么? -
阳洁艺15720389696 ______ 一般是三次离心. 第一次离心是在细胞破碎后,目的是除去溶液中的固体杂质. 第二次离心是在第一次离心的上清中加入苯酚/氯仿/异戊醇溶液以后,目的是将DNA和蛋白质等杂质分离. 第三次离心是在第二次离心的上清中加入氯仿/异戊醇溶液之后,目的是进一步纯化DNA、并除去上一步中引入的苯酚.