引物与模板链怎么结合

胡庆禄2186PCR引物设计中,引物上是否需要每个碱基都与模板链结合? -
宦诞蚂17647973586 ______ 可以在引物上添加不配对的碱基,但是在引物的3'端,至少有三个碱基是严格配对的.但是这样的操作主要是为了添加酶切位点或者flag等. Tm值是根据两条链的退火情况来计算,不配对的碱基不算在内,所以你添加不配对的碱基对于Tm值几乎没有影响. 保证长度--没有必要添加不配对的碱基. 不产生二聚体--也没有必要,引物自身的碱基配对对于扩增影响不大,引物间的二聚体可以根据引物位置的选择来避免,无法避免时要保证3'端无配对. 所以不建议添加不必要的碱基来设计引物.(某些干扰实验除外)

胡庆禄2186高中生物,pcr技术,复性的时候为什么恢复双螺旋,恢复了引物怎么结合?而且书上也没画这个图 -
宦诞蚂17647973586 ______ 复性的时候引物结合到模板链上. 变性的时候两条模板链解开,复性的时候两条模板链分别与引物结合,延伸的时候是两条引物沿模板链延伸.

胡庆禄2186dna复制时,引物的作用是什么 解开dna双链 -
宦诞蚂17647973586 ______ 你做的是RT—PCR吗? PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性.模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备...

胡庆禄2186怎么设计引物 -
宦诞蚂17647973586 ______ PCR引物又称为寡核苷酸引物,也就是RNA,是由人工合成的,PCR引物通常是一对,引物1和引物2.由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制,也就是只能识别3'的尾端,而且只能把核苷酸连到已经和DNA模板互补产生的多核苷...

胡庆禄2186有关PCR技术的疑问:为何在低温退火时,原来的两条DNA链不会结合? -
宦诞蚂17647973586 ______ 因为引物要远小于模版长度,因此在退火温度下引物更容易结合到模板链上.也就是说,引物单链和模板单链共同竞争模板单链,但是由于引物小,摩尔浓度高,因此引物要远远优先结合于模板DNA.

胡庆禄2186如果引物与DNA链的一小段互补结合后原来的DNA链不就少了一段吗 如何复制出完整的DNA链?在PCR技术中引物是DNA还是RNA? -
宦诞蚂17647973586 ______[答案] 引物是脱氧核糖核酸,你看成分不是DNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)吗?那当然是DNA了.你引物要能结合上去,需要完全或者大部分与模板链互补才行,那么只要保证引物和模板链完全匹配,那么你合成的不就是完整的DNA链了?因为引物自身也成...

胡庆禄2186设计简单的引物;如何通过PCR获得目的基因 -
宦诞蚂17647973586 ______ PCR技术是扩增目的基因的方法.在这个过程中需要模板、原料、引物和酶等条件.包括三个阶段 一、变性:加热到90-95度,目的基因两条链解旋 二、复性:冷却到55-60度,引物结合到模板链上 三、延伸:加热到70-75度,合成子链.

胡庆禄2186退火温度是影响PCR特异性的较重要的因素.变性后温度快速冷却至40~60 ℃ 可使引物和模板发生结合.PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链... -
宦诞蚂17647973586 ______[选项] A. 由于模板DNA比引物复杂得多 B. 引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞 C. 加入引物的量足够多而模板链数量少 D. 模板链加热解旋已经变性不可能再次结合