引物和模板的关系

能淑朋3753医学常识中PCR的实验步骤有哪些?
璩胃许15954661512 ______ PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:模板DNA的高温变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链解离,使之成为单链,以便与引物结合.退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合.引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补链.

能淑朋3753PCR技术原理是什么? -
璩胃许15954661512 ______ 原发布者:yqjklhq 一.简述PCR基本原理?PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右...

能淑朋3753PCR反应中引物和模板的正确结合是关键吗?
璩胃许15954661512 ______ A、复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的,A正确;B、变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,使DNA双链得以打开,B错误;C、延伸过程需要加入热稳定DNA聚合酶(Taq酶)、ATP、四种脱氧核苷酸,C错误;D、PCR技术是在较高温度下进行的,因此PCR与细胞内DNA复制相比所需要DNA聚合酶具有更高的耐热性,D错误.故选:A..

能淑朋3753PCR失败的原因及如何改善 -
璩胃许15954661512 ______[答案] PCR反应的五要素 1、引物 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度.理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增. 设计引...

能淑朋3753PCR与LAMP的关系 -
璩胃许15954661512 ______ 这两个方法我感觉原理还差挺多的,LAMP,环介导等温扩增法,英文名称为loop-mediatedisothermal amplification,,是一种新型的核酸扩增方法,其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,在链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase...

能淑朋3753模板DNA有什么特点?
璩胃许15954661512 ______ 由于模板DNA比引物复杂得多,引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞

能淑朋3753想请教一下RACE特异性引物的设计 -
璩胃许15954661512 ______ 1 越靠两头越好,因为靠近两头扩增的两个片段就短,将来测序的时候花钱少,但前提是你得保证引物的TM值和RACE配套引物的TM值接近,还有引物的GC含量别太离谱2 可以分开设计,但是5'race 我们自己设计的引物时下游引物,应和已...

能淑朋3753引物设计问题,以mRNA序列设计引物,然后用cDNA为模板来扩增,在设计引物时mRNA序列是否要反转序列?我想的是,不反转的话设计的引物是和... -
璩胃许15954661512 ______[答案] cDNA和mRNA的序列是互补的,如果用两个引物,最后的两条DNA序列分别对应于mRNA和cDNA中的一段.由于引物方向从5'至3',所以两个引物对应于mRNA和cDNA中相应序列即可.

能淑朋3753PCR的引物怎样设计, -
璩胃许15954661512 ______[答案] PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否. 要设计引物首先要找到DNA序列的保守区.同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构.如这个区...