恒温电磁搅拌器

原代培养

原理

将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用 EDTA 或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖 这一过程称原代培养。

仪器、材料及试剂

仪器：培养箱（调整至 37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液 管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱（37℃）

材料：动物组织块

试剂：1640 培养基（含 20%小牛血清），0.25%胰酶，Hank′s 液，碘酒 

初代消化培养法

1. 准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒 20 分钟。开始工作前先洗 手、75%酒精擦拭手至肘部。

2. 布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。

3. 处理组织：把组织块置于烧杯中，用 Hanks 液漂洗 2~3 次，去除血污；如怀疑组织可 能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中 30~60 分钟。

4. 剪切：用眼科剪把组织切成 2~3 毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50 倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。

5. 消化：或用恒温水浴，或置于 37℃温箱消化均可，消化中每隔 20 分钟应摇动一次，如 用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6.  分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000 转/分）离心消化液 5 分钟，吸出上清，加入适量含有血 清的培养液。

7. 计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶 中。对大多数细胞来说，pH 要求在 7.2~7.4 范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明 液体变酸，可用 NaHCO3 调整。

8. 培养：置于 36.5℃温箱培养，如用 CO2 温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞， 纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。

初代组织块培养法

1. 剪切：把组织小块置于小烧杯或青霉素小瓶中，用 Hanks 液漂洗二三次以去掉表面血 污，吸静 Hanks 液，用眼科剪反复剪切 1mm3 块为止。

2. 摆布：用弯头吸管吸取若干小块，置于培养瓶中，用吸管弯头把组织小块摆布在培养瓶 底部，小块相互距离以 0.5cm 为宜，每一 25ml 培养瓶底可摆布 20~30 块。

3.  轻轻翻转培养瓶，另瓶底向上，注意翻瓶时勿另组织小块流动，塞好瓶塞，置 36.5℃温箱培养 2 小时左右（勿超过 4 小时），使小块微干涸。

4. 培养：从微箱中取出培养瓶，开塞，46 度斜持培养瓶，箱瓶底脚部轻轻注入培养液少 许，然后缓缓再把培养瓶翻转过来，让培养液慢慢覆盖附于瓶地上的组织小块。置温箱中 静止培养。待细胞从组织块游出数量增多后。再补加培养液。

传代培养法

原理

细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时 也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。 

材料和试剂

1. 细胞：贴壁细胞株

2. 试剂：0.25％胰酶、1640 培养基（含 10％小牛血清）

3. 仪器和器材：倒置显微镜，培养箱、培养瓶、吸管、废液缸等 

操作步骤

1. 吸除培养瓶内旧培养液。

2. 向瓶内加入胰蛋白酶和 EDTA 混合液少许，以能覆满瓶底为限。

3. 置温箱中 2~5 分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。

4. 吸除消化液，向瓶内注入 Hanks 液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注 意加 Hanks 液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单 独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用 Hanks 液冲洗，直接加入培养液。

5. 用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。

6. 计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。

无菌操作注意事项

1. 操作前要洗手，进入超净台后手要用 75%酒精或 0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要 擦试。

2. 点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间 不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧 焦形成碳膜。

3. 操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。

4. 不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。

5.  瓶子开口后要尽量保持 45℃斜位。

6. 吸溶液的吸管等不能混用。

申诞芳2187恒温磁力搅拌器价格 -
宿丁真18841874678 ______ 200-1000元不等.利用了磁场和漩涡的原理将液体放入容器中后,将搅拌子同时放入液体,当底座产生磁场后,带动搅拌子成圆周循环运动从而达到搅拌液体的目的.

申诞芳2187恒温磁力搅拌器怎么接节点温度计 -
宿丁真18841874678 ______ 这里会告诉你的.恒温磁力搅拌器是通过调节电压来改变对加热圈的供电.内部有一个线路板,当电接点温度计的两个插口导通以后就会停止对加热圈的供电.(你可以试一下,用一根铁棒,螺丝刀就很好,直接导通,你会听到哒的一声:继电器断开的声音,然后前面电压表回零,停止供电.)至于电接点温度计,其实就是在设定的温度上面导通两级而已.这里的售后服务完善,快捷有有效,专业级技术支持,及时解决客户的疑难问题.

申诞芳2187DF - 101S集热式恒温磁力搅拌器的加热方式 -
宿丁真18841874678 ______ DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器采用集热式加热法,被加热容器完全处于强烈的热辐射之中,加热速度是其它平面加热磁力搅拌器的三倍.温度均匀、效率高,更适应球型烧瓶进行加热反应.

申诞芳218778HW - 1恒温磁力搅拌器可长时间搅拌吗? -
宿丁真18841874678 ______ 这要看搅拌的液体粘度大小,粘度小的可长时间搅拌,粘度大的搅拌时间最好在一个工作日内

申诞芳2187我用数显恒温搅拌器搅拌液体样品,但是我不想它加热我的溶液,怎么样控制呢? -
宿丁真18841874678 ______ 磁力搅拌器一般有两个控制的旋钮,一个是控制转速的,一个是控制加热温度的.如果你不想加热那就调到最小(各个品牌都不一样,有的可以直接关闭,只运行搅拌功能,不知你使用的搅拌器行不行),如果还是加热,不排除温控器损坏的可能,那就需要维修.

申诞芳2187site:(emuch.net) 加热型磁力搅拌器 如何恒温?这种搅拌器是利用承重的金属面板直接加热的,跟反应器(三颈球形烧瓶)的接触面只是一个点,所以难以恒... -
宿丁真18841874678 ______[答案] 好像是比较难,可以试试在金属面上放上一水槽(可以用结晶皿)加上水做成水浴,调控水浴的温度 . 建议另备热水,以调温

申诞芳2187什么是电磁搅拌器?
宿丁真18841874678 ______ 电磁搅拌器是搅拌器具的一种,它是通过电磁力,也就是我们常常说的电磁现象为原理而产生的器械.我们生活中常见的电磁搅拌器主要有加热板式、数字式、电磁加热式三种.加热板式的外形是一个方形的板材,内部含有电磁装置,通电之后就会产生磁场与磁场力,力的大小受到电流的控制就会不断的变更,达到震动搅拌的目的.数字式是能够通过准确控制搅拌速度的装置,能够通过调整搅拌器的搅拌速度来满足使用者自己的使用需求.电磁加热式搅拌器能够集搅拌与加热为一体,在加热的同时能够进行搅拌,特别是在化学实验以及制药的生产活动中,这种电磁搅拌器发挥着重大的作用.

申诞芳2187磁力搅拌器在使用时有什么要注意的么? -
宿丁真18841874678 ______ 目前实验室中使用的搅拌器主要是两种:电动搅拌器与磁力搅拌器. 其中,磁力搅拌器适用于混合搅拌较稀的液体物在这里,简单介绍一下磁力搅拌器在使用过程中应注意的几个问题: 第一、在第一次使用时,先对照仪器说明书检查仪器所带...

申诞芳2187磁力搅拌器注意哪些?VELP磁力搅拌器在使用时呢? -
宿丁真18841874678 ______ 磁力搅拌器适用于混合搅拌较稀的液体物质.在这里,简单介绍一下磁力搅拌器在使用过程中应注意的几个问题: 1.在第一次使用时,先对照磁力搅拌器说明书检查仪器所带配件是否齐全,譬如搅拌子、电源线等; 2.调速时应由低速逐步调至高...

申诞芳2187电磁搅拌器的安装位置 -
宿丁真18841874678 ______ 根据电磁搅拌器在铸机冶金长度上的不同安装位置大致有以下几种模式: 结晶器电磁搅拌:Mold Electromagnetic stirring:MEMS搅拌器安装在结晶器铜管外面; 二冷区电磁搅拌:Strand Electromagnetic Stirring:SEMS搅拌器安装在铸坯外面; 凝固末端电磁搅拌:Final Electromagnetic stirring:FEMS用于方坯连铸,搅拌器安装在铸坯外面.