感受态细胞转化法

鬱奖侧1213谁做过酶切质粒的实验啊,制感受态细胞然后转化呢?求详细过程及注意要点! -
暴洋泼19677243905 ______ 大肠杆菌电转化感受态细胞制备 第一天: 1. 将适合菌株(如XL1-Blue, DH5α)置于LB或其他营养丰富的培养基上,在37°C下过夜培养 2. 高温灭菌大的离心瓶(250-500ml)以备第二天摇瓶用 3. 准备几瓶灭菌水(总量约1.5升),保存于冷冻室...

鬱奖侧1213感受态细胞的转换率是怎样的呢?
暴洋泼19677243905 ______ 转化率为:1000克隆X103ng/铺板1ngDNAug106cfu/ug转化pGEM-T应用108cfu/ug感受态细胞如没有菌落或少有菌落,感受态细胞的转化率太低

鬱奖侧1213影响感受态细胞转化效率的因素有哪 重组子筛选的主要方法有哪些? -
暴洋泼19677243905 ______[答案] 1.影响感受态细胞转化效率的因素主要有温度和催化剂 2.重组子筛选一般方法是标记基因.即在基因片段上插入一段抗生素基因,然后在含有病菌和核苷酸的培养皿上培养,存活下来的即使符合条件的重组子. 3.还有染色法和人工筛选法

鬱奖侧1213感受态细胞的制备时有什么注意事项 -
暴洋泼19677243905 ______ 感受态细胞的制备时的注意事项: 1、培养温度.较低的温度培养有利于感受态的形成,这样可以获得较高的感受态,但太低又不实用,因而产生了 Inoue 的高效感受态制备方法,它实际是利用了所有有利于感受态的文献而得出的一 个非常理想...

鬱奖侧1213CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞原理?
暴洋泼19677243905 ______ 原理:转化:将外源DNA分子引入受体细菌,使之获得新的遗传性状. 受体细菌一般是限制修饰系统缺陷的变异株,不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体(R-,M-),可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代.受体细胞经过一些特...

鬱奖侧1213什麽是感受态细胞 -
暴洋泼19677243905 ______ 感受态细胞(competent cell):理化方法诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态. 、 CaCl2法: 操作: 1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温(0℃)预处理的低渗氯化钙溶液中,便会造成细胞膨胀,细胞膜通透性发生变...

鬱奖侧1213单子叶植物中常用的一种基因转化方法是( ) -
暴洋泼19677243905 ______[选项] A. 农杆菌转化法 B. 基因枪法 C. 花粉管通道法 D. 显微注射法

鬱奖侧1213将目的基因导入微生物细胞的最常用方法是( ) -
暴洋泼19677243905 ______[选项] A. 感受态细胞法 B. 显微注射法 C. 基因枪法 D. 农杆菌转化法

鬱奖侧1213基因工程的四个步骤分别是:第一步___;第二步___;第三步___;第四步___.基因工程育种能够___(填“定向”或“不定向”)改变生物的性状. -
暴洋泼19677243905 ______[答案] 基因工程技术的基本步骤: (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成. (2)基因表... (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法...

鬱奖侧1213几种感受态细胞制备 的效果比较 -
暴洋泼19677243905 ______ 现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状.将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养,即可筛选出转化子(Transformant,即带有异源DNA 分子的受体细胞).目前常用的感受态细胞制备方...