抽提质粒的基本原理

厍恒诞3173在用碱裂解法提取质粒的过程中除质粒以外的DNA和RNA是怎么除去的碱裂解法提取质粒的原理是什么 -
堵承泥14749921958 ______[答案] Alkaline denatured bacterial chromosomal DNA and most of RNA,since they are much much bigger than plasmid DNA.Plasmid is still soluble and is in the solution under the same condition.Proteins also get denatured,also,chromosomal DNA is linked ...

厍恒诞3173质粒提取的步骤 -
堵承泥14749921958 ______ 实验一 ApaLI (178) P(BLA) ALPHA 质粒DNA的提取、 质粒DNA的提取、酶切 DNA的提取 及琼脂糖凝胶电泳 ApaLI (2367) EcoRI (397) AvaI (413)XmaI (413) SmaI (415) APr pUC19 BamHI (418) PstI (440)HindIII (448) P(LAC) ORI 2686 bp ApaLI ...

厍恒诞3173大量跟多数的区别?
堵承泥14749921958 ______ 大量是指数量很多,而多数则是指在一个规定范围内占量很大的一部分.

厍恒诞3173质粒DNA提取和细胞基因组DNA提取的异同 -
堵承泥14749921958 ______ 不同点 一、提取方法不同 DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法.化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法.生物方式:酶法. 质粒抽提方法即去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,...

厍恒诞3173如何判断提取质粒DNA的纯度 -
堵承泥14749921958 ______ 可以通过紫外吸收检测. 因为核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm得OD...

厍恒诞3173提取质粒时这样去除基因组总DNA
堵承泥14749921958 ______ 现在质粒提取无论手提还是试剂盒,其根本原理还是碱裂解法:当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性 而呈絮状,离心时可沉淀下来. 这就把基因组DNA去掉了.

厍恒诞3173质粒抽提的抽提方法 -
堵承泥14749921958 ______ 质粒抽提最常用的方法是碱裂解法,它具有得率高,适用面广,快速,纯度高等特点.关于碱裂解法的原理,复旦大学生化与分子生物学实验室的网站有一篇专论,大家可以去看一下.这是一篇美文,非常有趣.文中提到了一个与几乎所有能查...

厍恒诞3173质粒抽提的关键性控制因素有哪些? -
堵承泥14749921958 ______ 关于抽提质粒:1) 抽提质粒时,加入 Solution II和 III后要求轻柔混匀.我个人觉得不用这样,只要不是 非常剧烈,可以快速混匀.尤其可以运用在一次抽提多管质粒的时候,这样可以快速,而且 效果一点也不差.2) 抽提质粒时,用无水乙醇沉淀的...

厍恒诞3173醋酸钠的作用是什么?有的提取DNA的方法最后一步加入的溶液是70%乙醇和NaAc的,不懂NaAc在里面的作用. -
堵承泥14749921958 ______[答案] 原理举例:碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的.在pH值高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性.质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补...

厍恒诞3173质粒DNA的提取过程中加入酚:氯仿:异戊醇的目的是什么 -
堵承泥14749921958 ______ 酚:氯仿:的目的是沉淀蛋白质原理如下: 酞与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性过离心,变性蛋白质的密度比水的密度为大,因而与分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开. 水相异戊醇的目的是减少抽提过程中的泡沫产生,原理如下: 在抽提DNA时,为了混合均匀,必须剧烈振荡容器数次,这时在混合液内易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用.加入异戊醇能降低分子表面张力,所以能减少抽提过程中的泡沫产生.