提取dna漂洗液pw过多

于魏标1988DNA提取过程中,用体积分数70%的冷酒精可以进一步纯化DNA?对吗? -
樊缪潘15826509567 ______ 可以这么说,先使用95%酒精和醋酸钠或异丙醇洗涤,之后用75%酒精洗涤,目的是洗去加入的盐,乙醇浓度太高达不到脱盐效果,太低DNA会融掉,异丙醇沉淀以后有人用无水乙醇洗一遍,目的是加速DNA的干燥,因为异丙醇的挥发性没有乙醇好 , 主要目的还是为了除盐,前面沉淀DNA时加入的盐会影响你后续的克隆操作,如酶切和PCR

于魏标1988请问:提取DNA时洗涤沉淀为什么要用70%的乙醇? -
樊缪潘15826509567 ______ 因为无论用哪种方法提取,沉淀DNA时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和DNA分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与DNA结合形成DNA-阳离子盐溶于溶液中,再用无水乙醇可以将DNA-阳离子盐沉淀下来,但这样一来,DNA中就含有较多的盐离子,这势必会影响下一步实验的进行,所以要用70%乙醇洗涤DNA沉淀(因为在70%乙醇里DNA是不溶的,而盐离子却可溶),用无水乙醇则达不到这个目的!OK?

于魏标1988提取DNA,加无水乙醇分离后,出现分层,为什么? -
樊缪潘15826509567 ______ 另外无机盐离子浓度异常也会影响DNA的析出; 还有就是有人动过你的乙醇. 如果是偶然事件,基本上就这些.

于魏标1988请问DNA提取遇到单宁过多或者果胶过多怎么办 -
樊缪潘15826509567 ______ 单宁属于多酚类物质,对于这种物质,提取DNA的过程中主要是通过两种办法,一种是在CTAB抽提液中加入抗氧化剂,如beta巯基乙醇,DTT,抗坏血酸等.使用的比例根据实际情况来调整.还有一种办法是在CTAB抽提液中加入高分子聚合...

于魏标1988抽提质粒 PW漂洗液如果没有吹干就加水洗脱会怎么样? -
樊缪潘15826509567 ______ 我也用tiangen的小提试剂盒,这么巧. 我没遇到过你的情况,每次都是将质粒晾干至没有酒精味了再溶解.应该会有影响吧,说明书上都说了,PW中加有酒精的,酒精会影响到酶的活性,对下一步的PCR、酶切都有影响. 现在说什么都晚了,你先PCR一下试试,能P出来当然好了,P不出来只有重提质粒了.也不是多麻烦的事啊.还有,溶解后你电泳检测了吗?

于魏标1988提取DNA时过度研磨会使DNA断裂吗 -
樊缪潘15826509567 ______ 当你研磨过度使容器温度过高达到dna失活温度时有可能是dna双链断裂.. 开玩笑的,那样早没法做实验了. 研磨需要非常充分,不存在过度一说,不会使其断裂的.

于魏标1988在提取DNA时,要用75%预冷乙醇进行DNA沉淀,请问其机理是什么? -
樊缪潘15826509567 ______ 可我提取的时候好像是用95%的乙醇沉淀的,而后再用70%的乙醇洗涤. 1.为什么用无水乙醇沉淀DNA? 用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法.乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对...

于魏标1988DNA提取方法有哪些 -
樊缪潘15826509567 ______ DNA提取的几种方法 (1).浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及...

于魏标1988提取DNA时为什么先用氯化钠,后用酒精.不干脆用酒精, -
樊缪潘15826509567 ______ 提取DNA时先加0.14mol/L氯化钠,因为在这种浓度的氯化钠溶液中,DNA的溶解度最低,而蛋白质的溶解度增加,这样通过过滤能将DNA分离开,以除去蛋白质.再加入95%的酒精能使DNA沉淀,因为在这个浓度下DNA溶解度最低.如果直接加酒精不先加氯化钠,DNA和蛋白质都能被酒精所沉淀,就无法将DNA和蛋白质分离开.所以必须先加氯化钠后加酒精,顺序不能颠倒.