提质粒酚氯仿作用

徐和很1581质粒提取过程中,应注意哪些操作,为什么? -
寇钢炉15212852898 ______[答案] 1.提取过程应尽量保持低温.2.提取质粒DNA过程中除去蛋白很重要,采用酚/氯仿去除蛋白效果较单独用酚或氯仿好,要将蛋白尽量除干净需多次抽提.3.沉淀DNA通常使用冰乙醇,在低温条件下放置时间稍长可使DNA沉淀完全.沉淀DN...

徐和很1581DNA抽提过程中为什么要加入醋酸钠?] -
寇钢炉15212852898 ______ 碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术.可是我收研究生十几年了,几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少.追其原因,我想大概是因为《分子...

徐和很1581酚氯仿抽提法抽出的质粒是超螺旋结构的,但用小抽试剂盒(碱裂解)抽出来的不是超螺旋的
寇钢炉15212852898 ______ 同志,首先你要明确一点酚氯仿抽提质粒是不分什么超不超螺旋的,只要是质粒无伦它有否缺口都能提,而且更重要的是,你酚氯仿前面那一步是什么,因为酚氯仿这步其实是用来除去蛋白质的,真正提取分离是看你前面这步用的是什么方法.我估计你一个是手提一个是试剂盒,而这两个结果不在同一条带上的问题.首先你要明确一点,琼脂糖胶的结果也是有误差的,然后我建议你用marker看你抽提的实际是不是在你目的位置上,只要是在,那么你的抽提质粒应该就是能用的.至于你说不在一条带上的问题由原理到操作都可能会产生这样的结果,而且这与什么超不超螺旋也是没有直接的关系的,因为如你所述你这两种方式都不能分离超螺旋和缺口的质粒DNA,提出来都是会混一起的.

徐和很1581蛋白质抽提原理
寇钢炉15212852898 ______ 是否记错?我个人来说从没听说过用氯仿异戊醇可以“抽提”蛋白质的,氯仿异戊醇是在抽提DNA时除去蛋白质、脂质等杂质的时候用的. 抽提和去除是不同的概念...抽提对被提物质有纯度和活性的要求,而去除只要去了就行了. 酚-氯仿-异戊醇提取DNA时,去除蛋白质的原理是让蛋白变性,从而离开水相,留于有机相或中间相.而DNA则大部分留在水相.

徐和很1581酚氯仿抽提DNA体系后出现的现象及成因,沉淀DNA时为什么要用无水乙醇 -
寇钢炉15212852898 ______[答案] 酚氯仿抽提DNA后,会使溶液分层,上层为水相,含有DNA;中间为蛋白(有时看不到);下层为有机相. 原因是酚氯仿可以使蛋白质变性,从而从溶液中析出,但是蛋白密度会小于酚氯仿,所以离心后它分布在中间;而DNA溶于水而不溶于有机相....

徐和很1581质粒的提取原理 -
寇钢炉15212852898 ______ 质粒提取是指去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒. 目录 一、质粒提取原理 质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体.作为一个具有自身复制起点的复制单位...

徐和很1581生活中和自然界当中有哪些降解质粒这些降解质粒用来做什么?处理什么? -
寇钢炉15212852898 ______[答案] 也可以在第二次抽提时,将酚与氯仿混合(1:1)使用.呈粉红色的酚可否使用?如何保存酚不被空气氧化?:保存在冰箱中的酚,容易被空气氧化而变成粉红色的,这样的酚容易降解DNA,一般不可以使用.为了防止酚的氧化,可加入疏基乙醇和8-羟...