条件对照和空白对照
菌落计数的一般步骤
1、样品的稀释
2、培养和计数
3、结果与报告
01 样品的稀释
固体和半固体样品:称取25g置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000r/min~10000r/min均质1min~2min,或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min,制成1:10的样品匀液。
液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。
上步完成后,用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。
根据对样品污染状况的估计,选择1个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1mL样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
之后,及时将15mL~20mL冷却至48℃的平板计数琼脂培养基(可放置于48℃±2℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。
注意事项:
1,移液过程使用的器具,都应避免微生物污染。使用耐高压移液枪,核查洗耳球无菌程度,避免移液枪触及均质袋或试管内壁……
2,样品匀液完成后,可按相同操作,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1mL无菌吸管或吸头。
02 培养和计数
样品稀释完成后,就要进行培养和菌落计数了。
待琼脂凝固后,将平板翻转,36℃±1℃培养48h±2h。水产品30℃±1℃培养72h±3h。
如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(约4mL),凝固后翻转平板,按相同条件进行培养。
培养完成后,就要进行菌落计数了,计数可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示。
选取菌落数在30CFU~300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
大片菌落:其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。
链状生长:当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。
03 结果与报告
为了生成结果和报告,需要根据计数结果和公式计算出菌落总数。需要注意的是,对于菌落数量不同的培养皿,计数原则有所不同。
若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。
称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。
来源:环凯转载于“品微生物检测”公众号;内容版权归原作者所有。
提醒:文章、视频、图片等所有内容,仅用于学习交流,若有侵权内容及其他涉法内容,请及时联系删除或修改,特此声明!
","gnid":"9c3f779872a6d6f13","img_data":[{"flag":2,"img":[{"desc":"","height":"480","title":"","url":"https://p0.ssl.img.360kuai.com/t0125e34297c180acdd.jpg","width":"640"}]}],"original":0,"pat":"art_src_0,fts0,sts0","powerby":"pika","pub_time":1712727201000,"pure":"","rawurl":"http://zm.news.so.com/0dfee0b4d33102bc422d476b454502b1","redirect":0,"rptid":"cef02c47ac69e8a6","rss_ext":[],"s":"t","src":"环凯微生物","tag":[],"title":"菌落计数的基本步骤(样品稀释+培养计数+结果报告)
田定性3599 对照实验的常用方法和解题思路 (1) 对照实验常用方法 ① 空白对照:设置两组实验,一组给予该实验的自变量处理,另一组不作任何处理.例如,温度对... -
贺甘曲13535162940 ______[答案] (2) 热能 升高 (4)③ 备用的葡萄糖溶液 ④ 适量的酵母菌培养液和液体石蜡油 与 A 瓶所加酵母菌培养液等量的酵母菌培养液 与 A 瓶所加酵母菌培养液等量的蒸馏水 (5) 小于 酵母菌厌氧呼吸放出的能量比需...
田定性3599设计生物对照试验的基本原则? -
贺甘曲13535162940 ______[答案] ⑴单一变量原则 ⑵对照性原则 ①空白对照②条件对照③自身对照④相互对照 ⑶等量原则 对照实验设置的正确与否,关键就在于如何尽量去保证“其它条件的完全相等” ⑷科学性原则
田定性3599谁有高中生物实验总结,越详细越好!谢谢了! -
贺甘曲13535162940 ______[答案] 高中生物实验总结 一、实验设计的基本内容 1、实验名称:是关于一个什么内容的实验. 2、实验目的:要探究或者验证的某一事实. 3、实验原理:进行实验依据的科学道理. 4、实验对象:进行实验的主要对象. 5、实验条件:完成该实验必备的仪器...
田定性3599生物中实验组条件好还是对照组条件好 -
贺甘曲13535162940 ______ 实验组是在变量情况下生长,对照组是正常下的情况
田定性3599在生物实验中如何确定实验组和对照组 -
贺甘曲13535162940 ______ 生物实验设计的基本原则之一就是要设计对照实验(或称对照组),如何确定对照组呢?对此,好像大家没有一致的认识.由于人们对生物实验中的实验组和对照组认识的差异,常常会在一些具体问题上争论不休,特别是在对照组的确定上出现...
田定性3599举例说明探宄实验中的实验组和对照徂 -
贺甘曲13535162940 ______ 一个实验通常分为实验组和对照组(控制组).实验组是施加实验变量处理的被试组;对照组是不施加实验变量处理的对象组,两者对无关变量的影响是相等的,两组之间的差别,被认为是来自实验变量的结果. 如 2005年春季高考 3题中为研究...
田定性3599什么是对照实验,设置对照实验有哪些注意 -
贺甘曲13535162940 ______ 指虽给对象施以某种实验处理,但这种处理是作为对照意义的,或者说这种处理不是实验假设所给定的实验变量意义的.例如,“动物激素饲喂小动物”实验,采用等组实验法,其实验设计方案是:甲组:饲喂甲状腺激素(实验组);乙组:饲喂甲状腺抑制剂
田定性3599生物中实验组是( )组,对照组是( )组,求解 -
贺甘曲13535162940 ______ 实验组是指试验中进行探究的部分(进行变化的一组),对照组是指试验中进行比较的部分.通常情况下,你可以从以下两个角度进行区分:1实验 组的结果是之前不知道的,只有通过实验才能知道.而对照组是自己已知的,不用试验就知道的常识.2 实验组是复杂的,有许多的变量,须通过“控制变量法”来进行研究.而对照组是简单的,几乎没有任何变量.
田定性3599文章中,对照和对比的区别 -
贺甘曲13535162940 ______ 两者区别没有太大.对比这个概念比较多.对比的定义:把两种相对或相反的事物或一个事物的两个方面举出加以对照,使对立面更加鲜明.对比是一种修辞方法,对照是对比时运用的方法.故在语文分析中一般多用"对比"这个概念
田定性3599对照实验的对照组和实验组怎么判别 -
贺甘曲13535162940 ______ 对照组就是不做处理的那一组 生物实验设计的基本原则之一就是要设计对照实验(或称对照组),如何确定对照组呢?对此,好像大家没有一致的认识.由于人们对生物实验中的实验组和对照组认识的差异,常常会在一些具体问题上争论不休,...