测质粒浓度选dsdna

岑辉谈3640为什么质粒浓度在不同的超微量分光光度计上测得会不一样 -
蔡烁烟19821119052 ______ 超微量分光光度计Optizen Pop Nanohandler Bio为两用型光度计,既可超微量测试,也可实现通用光度计所有功能:T/ABS/C、定量测量、定性测量、动力学测量等.产品技术参数简介:1、波长范围:190—1100nm2、光学系统:改良型CT式光...

岑辉谈3640做质粒浓度检测.看书上一般说2ul的DNA样品加上98ul的无菌去离子水.总共是100ul.但是一般的紫外分光光度计,要到比色皿的2/3,一般都需要比100ul多很多... -
蔡烁烟19821119052 ______[答案] 您好!① 有50μl的比色杯,你可以去找找或者问问厂家.② 一般提取的质粒浓度都在1ug/ul左右,也就是20个OD260,这个浓度也就稀释到50倍左右测定比较准确,所以不好再稀释了.如果紫外不好测,那干脆就跑个电泳大致定量一下...

岑辉谈3640质粒 - 20度存储四个月,对测序结果有影响吗 -
蔡烁烟19821119052 ______ 没有影响,一般的质粒浓度都很高,用试剂盒提取得到的质粒大概有1ng/ul,因此对测序完全没有影响,你只要送个5ul给测序公司就够了.

岑辉谈3640根据DNA marker 在凝胶电泳中条带亮度,测定目的质粒的浓度,这个方法靠谱吗? -
蔡烁烟19821119052 ______ 在同一块胶中,同样的反应体系(模板浓度,dNTP浓度,PCR反应程序等等)的不同样本,如果胶带亮度不一致可以认为二者浓度有差异.这就是半定量PCR.精确定量需要用到realtime

岑辉谈3640碱法抽提质粒为何含RNA -
蔡烁烟19821119052 ______ 只要你在solution 1里面加了RNase,就没有问题.你看一下你测量结果的260/280,在1.8-2.0的范围内,就比较准确.如果>2.0,说明RNA污染比较严重. OD测DNA是个比较成熟和精确的做法.说测出来的都是RNA的,回去多看看书.只要在1.9左右,完全可以认为是DNA的浓度. RNA是非常容易降解的,否则提RNA的试剂啦枪头啦就不会要求都用RNase free的了.何况你还加了RNase.

岑辉谈3640如何通过琼脂糖凝胶来鉴定质粒DNA的纯度,浓度
蔡烁烟19821119052 ______ 跑电泳啊,如果有多条条带说明东西不纯. 在保证纯度的情况之下测OD值,再转换成质量,似乎是1OD等于33.8ug???然后根据质粒的大小,计算质粒的分子量.把质量除以分子量,就得到摩尔数了.

岑辉谈3640测质粒OD值怎么算浓度 -
蔡烁烟19821119052 ______[答案] 对质粒,双链DNA: 1 OD(260) = 50 μg/ml

岑辉谈364050分急求 如何用光敏生物素标记质粒? -
蔡烁烟19821119052 ______ 生物素化质粒ds-DNA:将含质粒pBR332的大肠杆菌在含氨苄青霉素的LB培养基中扩增,取纯培养物用MagicTM DNA纯化系统,按Promega公司所附操作说明书提取质粒ds-DNA.取纯化的不含单链DNA的大肠杆菌质粒ds-DNA直接与长臂光敏...

岑辉谈3640质粒在微生物育种中的作用是什么? -
蔡烁烟19821119052 ______ 质粒:凡游离于原核生物核基因组以外,具有独立复制能力的小型共价闭合环状的dsDNA分子,即cccDNA(circular covalently closed DNA),就是典型的质粒. 质粒具有许多有利于基因工程操作的优点: 1) 体积小,便于DNA的分离和操作; ...

岑辉谈3640为什么提取质粒测出来OD值了,跑胶没有条带? -
蔡烁烟19821119052 ______[答案] 只要制备胶等过程都没问题,marker也跑出条带了,那这种情况最有可能的原因还是质粒的浓度过低.所以,虽然OD值可测出来,但胶显示不出来,我就遇到过这样的情况,还算很普通的现象.下次再加大菌量就行.