紫外分光光度计比色皿

摘 要： 为发展绿色无毒、操作简单且结果准确的 NC 含氮量测量方法，基于硝化纤维素（NC）在碱液中水解后产生的亚硝酸根（NO 2 -\n）与硝酸根（NO 3 - ）的摩尔比与 NC 含氮量之间的线性关系，采用紫外分光光度计法分析了 NC 含氮量。在相同的反应条件下水解 5种已知含氮量的 NC标品，通过紫外分光光度计测定了水解液中的 NO2 - 和\nNO 3 - 含量，对测量体系的反应条件进行了优化；通过最小二乘法确定NO 2 - 和 NO 3\n- 的摩尔比（y）与 NC 标品含氮量（x）之间的线性关系；最后用 3 种验证用\nNC 样品对此法进行验证。结果表明，通过紫外分光光度计可同时测定碱解液中 NO 2-\n和 NO 3- 的含量，其最佳反应条件为：氨基磺酸浓度为 20 g·L -1 ，反应时间为 30 min；在最佳反应条件下得到了 R 2 为 0.9893的 y与 x间的线性关系式；验证结果表明，采用紫外分光光度计法得到的含氮量与实际含氮量非常吻合，相对标准偏差 RSD（n=4）均小于0.150%。

关键词： 硝化纤维素（NC）；含氮量；紫外分光光度计；NO 2 - 和 NO 3 - 测定

实验部分

试剂及仪器

试剂：不同含氮量的 NC 标品和验证用\nNC 样品

亚硝酸钠、硝酸钾、氢氧化钠、氨基磺酸，

仪器：DZ‑1BCⅡ型真空干燥箱

FA2004 型电子分析天平

DF‑101S 集热式恒温加热磁力搅拌器

UV‑1500C 紫外可见分光光度计

样品处理

NC 样品：分别称取 0.025 g\n8 种不同含氮量的 NC 样品置于 10 mL 离心管中，将 5 mL 浓度为1 M 的氢氧化钠溶液小心加入每个 NC 标品的离心管中，盖上盖，在 60 ℃水浴锅搅拌反应 2 h 后，将离心管转移到冰浴中 15 min，快速冷却反应混合物，停止脱硝，同时将反应液用 0.22 μm 有机尼龙膜进行过滤，滤液转移到干净的离心管中。将 50 μL水解产物转移到10 mL 容量瓶中，用纯水定容，最后通过分光光度计测定水解液中 NO 3 -\n与 NO 2 - 的浓度。

测量体系：在 219 nm 波长处\nNO 2 - 与 NO 3 -\n的摩尔吸光系数相等，且溶液的吸光度具有加和性，因此通过 NO 2 -\n与 NO 3 - 的总吸光度减去NO3 - 的吸光度可计算得到 NO\n2 - 的吸光度，其中氨基磺酸溶液能够破坏水解液中的 NO 2\n- ，既可作为测定 NO2- 吸光度的空白参比，也可作为测定 NO3 - 吸光度的测量样品。因此将每种NC水解液制备3组测量体系样品。

实验过程

紫外分光光度计法可行性验证

通过对比水解液与NO 3- 标准溶液的紫外吸收分布曲线，确定水解液的“受污染”程度，以验证紫外分光光度计法的可行性。将0.05 g干燥的NC（N含量≥13.15%）水解 2 h 后产生的水解液稀释 400 和 800 倍，使用UV‑3600i Plus 紫外可见分光光度计测量其紫外吸收光谱分布；同时为了比较水解液与近似浓度的标准溶液的紫外吸收分 布，测量了浓度为20 mg·L -1 和100 mg·L -1\n的 KNO 3 标准溶液的紫外吸收光谱分布。

NO 3- 与 NO 2- 标准曲线建立

为分析溶液中的 NO 3- 与 NO 2- 浓度，需建立紫外分光光度计吸光度值与溶液浓度之间的线性关系。

由于所溶解的有机物在 219 nm 和 275 nm 处均有吸收，而 NO 3- 在 275 nm 处没有吸收。因此，通过在219 nm 处的吸光度（A219）减去\n2 倍在 275 nm 处吸 光 度（A275），即 A219‑2A275，校 正 NO 3- 的 吸光度。

KNO 3 和 NaNO 2 标准母液配制：分别称量烘干的KNO 3 81.452 mg 和 NaNO 2\n75 mg 于 100 mL 烧 杯中，用纯水溶解后，在\n500 mL 容量瓶中定容，其中NO 3- 与 NO 2 ‑ 的浓度均为 0.1 g·L -1\n。

KNO 3 和 NaNO 2 标准系列溶液配制：用移液枪吸取 0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4 mL标准母液分别于10 mL容量瓶中，用纯水定容，所得溶液浓度分别为4，6，8，10，12，14 mg·L -1 。

NO 3 - 标准曲线：分别取 2 mL 标准系列溶液，加0.1 mL纯水，用石英比色皿在 219 nm 和 275 nm 波长处，以纯水为参比，测定吸光度（A219、A275），以标准系列浓度为横坐标、吸光度 A219‑2A275 为纵坐标绘制标准曲线如图 1所示，通过最小二乘法拟合得到 NO 3 -浓度与吸光度的函数关系y=49.257x+0.0484，R2 =0.9991。

NO 2- 的 标 准 曲 线 ：分 别 取 2 mL 标 准 溶 液 ，加0.1 mL纯水，用石英比色皿在 219 nm 波长处，以纯水为参比，测定吸光度（A219），以标准系列浓度为横坐标、吸光度 A219 为纵坐标绘制标准曲线如图 2 所示，通过最小二乘法拟合得到 NO 2 - 浓度与吸光度的函数关系为 y=75.286x+0.0397，R 2 =0.9998。

仪器参数

UV-1500CPC紫外可见分光光度计

仪器特点

*主机中文操作系统，7英寸彩色触摸屏显示

*宽大的触摸屏可显示多组数据，菜单显示，可直接显示图谱

*巨大的内存空间，可存储多组数据和曲线

*自动调0、调100%功能

*波长自动调节

*滤色片自动切换

*宽大样品池（5mm～100mm）

*具有最多十点标样建标准曲线测量功能

*可通过直接输入K、B因子建立标准曲线进行定量测量

\n \n \n*可直接输入标样和对应浓度值建立标准曲线进行定量测量

*可断电保存测量设置的标准曲线参数

*配备通用并行打印接口，可打印标题栏、测量数据、曲线参数、曲线标准样品点和曲线

*支持外接U盘存储及传输实验数据

*可通过PC软件控制实现光谱扫描等更精确和灵活的测量要求

技术指标及基本参数

*光路结构：C-T式 

*波长范围： 190～1100nm

*光谱带宽： 2nm

*波长准确度：±0.5nm

*波长重现性：≤0.2nm

*透射比准确度: ±0.3% τ

*透射比重复性：0.15% τ

*杂散光：≤0.04% τ (220nm NaI，340nm\nNaNO2)

*稳定性： 0.001A/h（500nm预热后）

*测光方式：透过率、吸光度、浓度、能量

*波长调节：自动调节

*光度范围： -0.3～3A

*显示方式：7英寸彩色触摸屏

*检测器：进口硅光二极管

*光源：进口氘灯，进口钨灯

*电源： AC 220V/50Hz或110V/60Hz

*功率： 120W

*仪器尺寸：480×350×220mm

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*主机净重： 15Kg

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宰眨舒4439可见光波长范围多少?为什么紫外分光光度计不可用玻璃比色皿? -
家类红13359334660 ______[答案] 你好, 可见光的波长范围是400nm~760nm,红620nm--760nm 橙592nm--620nm 黄578nm-- 592nm 绿500nm-- 578nm 青464nm--500nm 蓝446nm --464nm 紫400nm--446nm. 不能用玻璃比色皿是因为紫外线的玻璃的透射能力很低(玻璃吸收紫外光...

宰眨舒4439石英比色皿为什么要配盖子?不用会有什么影响么?使用紫外分光光度法测吸光度时,所配的石英玻璃比色皿一般都配有盖子,而一般的分光光度法测量所... -
家类红13359334660 ______[答案] 会有影响,但不大.一般的分光光度法测量所用的比色皿是没有盖子的,是因为他们主要是有色水溶液,挥发的慢,所以有没有盖子都行.而紫外分光光度法测吸光度时,主要以无色的乙醇溶液较多,溶剂挥发速度较快,如果只测吸光度的话时间短,...

宰眨舒4439UV2250 紫外分光光度计用什么样的比色皿 -
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宰眨舒4439荧光分光光度计和紫外分光光度计的区别 -
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宰眨舒4439紫外分光光度计波长扫描时要扫两个比色皿?波长扫描的时候,参比液槽和样品液槽上都要放装有同样的标准溶液的比色皿吗?我是测定咖啡因的,. -
家类红13359334660 ______[答案] 答: 【1】波长扫描的时候,就是制作吸收光谱曲线. 【2】参比液槽加入参比液,样品液槽装有标准溶液.

宰眨舒4439紫外分光光度法能测病料中的病毒浓度吗?
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宰眨舒4439紫外分光光度计在490nm或者410nm测定吸光值时是用石英比色皿还是玻璃的呢? -
家类红13359334660 ______[答案] 这个波长在紫外和可见之间偏可见,还是用玻璃吧,毕竞便宜,如果两种都有的话,可以做个空白,哪个在此波长范围内吸光度大,就不用哪个

宰眨舒4439为何紫外光分光光度计要用石英比色皿? -
家类红13359334660 ______ 一般紫外光区用石英比色皿,可见光区用玻璃比色皿.石英比色皿可用在全波段,玻璃比色皿只能用于340nm以上波长,因为玻璃不透紫外光.