荧光定量数据作图

邴咐珊4695荧光定量pcr时电泳图怎么分析 -
骆倩钟15077219735 ______ 要求内参的亮度一致,才能比较基因表达差异半定量RT-PCR参照的做法一般3.电泳扫描后,计算灰度值,先用同一标本的内参和目的进行比较,然后用这个

邴咐珊4695请问大家这是荧光定量pcr中的什么图呀,能解释下吗?多谢了 -
骆倩钟15077219735 ______ 这是标准曲线.利用你的cDNA进行梯度稀释,一般是对倍稀释,去跑realtime PCR,得到的数值就可以画出这样对应的图.一般的PCR机器都有这个功能,可以自行生成.得到的曲线一个是检测你自己的操作有没有问题,一个是检测你的引物有没有问题.然后利用这个标准曲线可以标定你的未知cDNA的浓度.不知这样有没有说清楚.

邴咐珊4695如何稀释实时荧光定量PCR的引物 -
骆倩钟15077219735 ______ 用已知浓度的DNA样本(通常是质粒)梯度稀释成一系列的样本.做实验的时候,这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内.一起做PCR.标准品的荧光强度和已知的浓度作图,可以得到一条标准曲线.而待测样本的荧光强度测出以后,就可以在标准曲线上算出样本浓度了.

邴咐珊4695实时荧光定量PCR的结果该怎样分析? -
骆倩钟15077219735 ______ 1、如果有标准曲线,按照标准曲线计算; 2、一般都是相对量,则用delta delta CT方法来计算; 3、引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性; 4、模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起; 5、看CT值是分析...

邴咐珊4695如何分析荧光定量pcr实验结果? -
骆倩钟15077219735 ______ 如果是realtime做表达量,用excel的制图,将每个个体的Ct值平均数做出柱状图就可以了.如果你还做了标曲的话,就用制图中的散点图看R2值.其实这些功能做定量PCR的时候电脑程序应该会自动分析才对.具体情况具体分析.

邴咐珊4695荧光定量的方法有哪些 -
骆倩钟15077219735 ______ 可以做siRNA或者miRNA降低其蛋白表达量,观察表型;提高蛋白表达,观察表型;PT-PCR可用作研究其对预测下游目的基因的mRNA表达量的影响.荧光定量PCR对此意义不大,荧光定量用来检测蛋白定量还行.

邴咐珊4695如何设计sybrgreen法荧光定量pcr引物 -
骆倩钟15077219735 ______ 引物 荧光定量PCR 是利用荧光定量PCR 仪(如ABI 7500、stepone、ROChe LightCycler、Bio-Rad CFX96 等)通过实时追踪 PCR 每一步循环的荧光信号 值来达到对起始模板量的定量分析.一次成功的荧光定量 PCR 反应除了需要稳 定的仪器...

邴咐珊4695请教版上有没有大侠实时荧光定量PCR做细菌定量 -
骆倩钟15077219735 ______ 实时荧光定量PCR做细菌定量 用已知浓度的DNA样本(通常是质粒)梯度稀释成一系列的样本.做实验的时候,这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内.一起做PCR.标准品的荧光强度和已知的浓度作图,可以得到一条标准曲线.而待测样本的荧光强度测出以后,就可以在标准曲线上算出样本浓度了.

邴咐珊4695实时荧光定量PCR具体实验步骤是什么?
骆倩钟15077219735 ______ 变性→退火→延伸三个基本反应步骤,答:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析.随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加.我们实验室用BIOG 染料法荧光定量PCR和BIOG探针法荧光定量PCR测得的扩增曲线起跳值一般在30左右,每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图.

邴咐珊4695什么是实时荧光定量PCR?有什么应用领域?与传统PCR有什么区别? -
骆倩钟15077219735 ______ .荧光共振能量传递 (FRET) 某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光,当另一屏蔽基团与其距离合适时,原发射光将会被屏蔽基团所吸收,并转化为其他波长的发射光或热能,称之为FRET.2.荧光化学:荧光定量PCR所使用的荧...