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蛋白裂解液加多了怎么挽救

来源:baiyundou.net   日期:2024-07-29

高畅章2657蛋白纯化时是否需要将加入的蛋白酶抑制剂去掉
荀米诗19196189867 ______ 一般添加的都是小分子的物质,而且也不会和目标蛋白结合,纯化过程一般就去除了,所以不用特别考虑去除的问题. ……………… 详细资料请参考:on http://product.bio1000.com/100154/

高畅章2657蛋白裂解液在室温放置多久失效? -
荀米诗19196189867 ______ 是裂解完细胞的裂解液还是配置好准备用来的裂解的缓冲液? 如果是裂解完成的未离心分离的裂解液,需要4°保存,不然因为胞内释放出大量的杂质,比如核酸,内毒素,核酸内外切酶,病毒等,这些杂质会在室温发挥作用,可能会酶解你的目标蛋白. 如果是配置好准备用来的裂解的缓冲液,只要保证不室温放置过夜就没什么问题.过夜放置可能缓冲液自身会长菌,造成污染.

高畅章2657western及ip细胞裂解液p0013中含有酶吗 -
荀米诗19196189867 ______ western及ip细胞裂解液p0013中含有酶 个人建议啊,稍微取一点样品出来做一个蛋白浓度测定,例如用Nanodrop什么的,只用个几微升.不然所有的判断都没有基础,感觉有时候挺骗人的.或者是弄点出来跑电泳,看看胶上的情况.如果担心裂解效率低,可以多加裂解液,但是这样的话,蛋白浓度会更低的.你如果是因为IP没有条带而觉得浓度低的话,建议做WB,或者是多弄几个孔的样品做一个IP再看.因为Ip不仅和裂解有关,还和抗体的结合能力和特异性都有关系,不好判断的.

高畅章2657western blot 提蛋白,加了裂解液RIPA,不粘稠,是不是蛋白浓度太低,能不能往下做 -
荀米诗19196189867 ______ 不粘稠没关系,测浓度.

高畅章2657细胞裂解液 用什么稀释 western -
荀米诗19196189867 ______ 可以用细胞裂解用的溶液,或者PBS,tris-NaCl溶液进行稀释.

高畅章2657细胞系裂解液和提取,有了ripa裂解液怎么提取蛋白 -
荀米诗19196189867 ______ 加到细胞培养皿里面 摇15分钟 然后刮下来吸出来 是做western的话加Loading buffer 再95°煮10分钟就OK啦 ………………………… ……………………………… 更多具体材料请参考: 细胞系裂解液和提取 http://product.bio1000.com/100129/

高畅章2657western blot 裂解液加多少 比例 -
荀米诗19196189867 ______ PMSF是一种蛋白酶抑制剂,因为其在水溶液中不稳定,所以用异丙醇或无水乙醇溶解,一般在用之前现加入裂解液.因此他是裂解液中的一种成分,而不是裂解液 附: PMSF 即Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名为苯甲基磺酰氟.分子式...

高畅章2657wb上样前用裂解液处理蛋白,裂解液要加入蛋白酶抑制剂吗 -
荀米诗19196189867 ______ 一般加到裂解液中,可以购买商业化的产品.推荐一个配方,矾酸钠和氟化钠.

高畅章2657提取细胞蛋白质:细胞加入裂解液后离心,是取上清液还是取沉淀物,上清液是什么成分多,沉淀物又是什么细胞加入RIPA和PMSF后,14000转离心5分钟... -
荀米诗19196189867 ______[答案] 取上清液,上清液中主要含有蛋白质、糖类、核酸等;沉淀主要是一些细胞碎片,包括一些细胞器等等.

高畅章2657蛋白裂解液在室温放一夜还能用吗? -
荀米诗19196189867 ______[答案] 是裂解完细胞的裂解液还是配置好准备用来的裂解的缓冲液? 如果是裂解完成的未离心分离的裂解液,需要4°保存,室温过夜放置肯定不行的,因为胞内释放出大量的杂质,比如核酸,内毒素,核酸内外切酶,病毒等,这些杂质会在室温发挥作用...

(编辑:自媒体)
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