质粒图片
金融界2024年3月27日消息，据国家知识产权局公告，楚天科技股份有限公司申请一项名为“一种通过大肠杆菌高密度发酵提高mRNA模板质粒产量的方法“，公开号CN117757691A，申请日期为2023年12月。
专利摘要显示，本发明提供了一种通过大肠杆菌高密度发酵提高mRNA模板质粒产量的方法，步骤为：使用基础培养基对质粒生产菌株进行第一阶段培养；载入补料培养基，进行第二阶段培养；提高发酵温度至35℃以上，进行第三阶段培养，培养结束后收获mRNA模板质粒。本发明通过接种时提高接种量来减少发酵时分裂次数，减少质粒丢失的风险；发酵前期和中后期分别通过降低发酵温度和控制补料速度，来控制细菌的生长速率进一步降低质粒丢失的风险；再综合优化发酵的pH和中后期发酵温度等工艺参数，是细菌生长更稳定，质粒含量得到大幅提升。
本文源自金融界
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皇红古731如图所示是四种不同质粒的示意图,其中ori为复制必需的序列,amp为氨苄青霉素抗性基因,tet为四环素抗性 -
尹念养13846767059 ______ A、图中酶切位点在ori序列上,该序列被破坏,重组质粒将无法进行复制,因此受体细胞既不能在四环素培养基上生长,也不能在氨苄青霉素培养基上生长,A错误; B、图中酶切位点没有破坏三个基因,因此含重组DNA的细胞既能在四环素培养基上生长,也能在氨苄青霉素培养基上生长,B错误; C、图中酶切位点在氨苄青霉素抗性基因上,氨苄青霉素抗性基因破坏,则含重组DNA的细胞能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长,C正确; D、图中酶切位点在四环素抗性基因上,由于仅四环素抗性基因破坏,则含重组DNA的细胞能在氨苄青霉素培养基上生长而不能在四环素培养基上生长,D错误. 故选:C.
皇红古731[转]如何阅读分析质粒图谱
尹念养13846767059 ______ 一个合格质粒的组成要素1. 复制起始位点Ori 即控制复制起始的位点.原核生物DNA分子中只有一个复制起始点.而真核生物DNA分子有多个复制起始位点.2. 抗生素抗性基因 可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+3. 多克隆位点MCS 克隆携带外...
皇红古731为什么用同一种限制酶处理质粒和外源DNA形成方式很多 -
尹念养13846767059 ______ 为什么用同一种限制酶处理质粒和外源DNA形成方式很多 (1)质粒切割前是双链环状DNA分子,所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键,故不含游离的磷酸基团.从图1可以看出,质粒上只含有一个SmaⅠ的切点,因此被改酶切割后,质粒变为线性...
皇红古731下图是细菌DNA和质粒的电泳图,marker很正常,dna和质粒作为太严重了.麻烦哪位大仙帮分析一下,谢谢! -
尹念养13846767059 ______ 1、Marker没问题,说明胶和电泳没有问题,问题出在提取的产品上.2、基因组拖尾严重,一部分在孔内没有电泳出来,一部分跑到了前端,说明提取过程中蛋白污染,DNA纯度低,另外,部分DNA被降解成小分子的片段,提取条件需要优化.3、质粒没有提出来,原因有很多可能,比如菌量不够,菌长老了,质粒被降解,等等,重新摇菌提取是惟一的办法.
皇红古731质粒的提取原理 -
尹念养13846767059 ______ 质粒提取是指去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒. 目录 一、质粒提取原理 质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体.作为一个具有自身复制起点的复制单位...
皇红古731如图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图.图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb... -
尹念养13846767059 ______[答案] (1)由图可知,质粒A中缺少标记基因,质粒B中的复制原点被酶切割,所以A、C不能作为运载体.(2)由图可知,获取目的基因使用的限制酶是PvuⅠ,所以切割质粒B也用该限制酶,同时目的基因与运载体连接的时候还需要DN...
皇红古731如图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的有关资料.图中质粒表示基因工程中经常用的载体 - pBR322质粒,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗... -
尹念养13846767059 ______[答案] (1)由于基因的选择性表达,人生长激素基因只在垂体细胞中表达,不在其他细胞内表达,因此只能从垂体细胞提取人生长激素mRNA. (2)PCR技术设计引物时一定要有一段已知人生长激素基因的脱氧核苷酸序列. (3)分析图解可知,质粒上存在...
皇红古731如图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图.复制原点是质粒能正常复制的必需组成.图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝... -
尹念养13846767059 ______[答案] (1)由图可知,质粒A中缺少标记基因,质粒C中的复制原点被酶切割,所以A、C不能作为运载体. (2)由图可知,获取目的基因使用的限制酶是PvuⅠ,所以切割质粒B也用该限制酶,同时目的基因与运载体连接的时候还需要DNA连接酶.用DNA连接...
皇红古731图1为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图.图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb... -
尹念养13846767059 ______[答案] (1)由图可知,质粒A中缺少标记基因,质粒C中的复制原点被酶切割,所以A、C不能作为运载体. (2)用DNA连接酶连接时,可能出现质粒环化、目的基因环化、形成重组质粒,有3种长度的结果. (3)根据题意,质粒长度为2.7kb,目的基因长度...
皇红古731 下图为基因的定点诱变过程的部分过程图解,请据图回答下列问题: (1)图中的质粒的本质是______.(2)将定点诱变过的质粒引入细胞进行复制后,可得... -
尹念养13846767059 ______[答案] (1)小型环状DNA (2)两 (3)人工诱变是遗传物质的不定向改变,而基因的定点诱变技术是对遗传物质的定向改变 (4)小改