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转化需要的质粒浓度

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-25

晁辉齿4631浓度为0.7ug/ul的质粒,现需要做转化到感受态细胞里,取1ul用dd H2O 稀释到35ul ,浓度为20ng/ul .但是转化只需要2ul左右.那么剩下的稀释的33ul 应该如何... -
孔诚狠18243097811 ______[答案] 没必要用TE,-20度冰箱保存长期有效.

晁辉齿4631转化了的质粒的细菌为什么要恢复培养 -
孔诚狠18243097811 ______ 培养之后,根据质粒上的筛选标记,才能知道是否发生了转化. 或者是为了让质粒在细菌中大量复制.

晁辉齿4631PCR产物TA克隆,PGEM - T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大? -
孔诚狠18243097811 ______ 那得看你用多少浓度的胶跑,如果用1%的琼脂糖电泳30min,你的主带(超螺旋的闭环质粒DNA)会在3Kb-2Kbmarker之间,如果是单酶切产物,则应该在3.5kb的marker附近.

晁辉齿4631大肠杆菌感受态细胞转化实验正负对照 -
孔诚狠18243097811 ______ 转化 A.将-70 0C下保存的感受态细胞(200μl),室温下解冻后放置于冰上. B.将ND-PUCm-T质粒DNA溶液(不超过50ng)或PCR产物与pUCm-T质粒的连结产物,体积不超过10μl,轻轻摇匀,冰上放置30min. C.42 0C水浴中热击90s或370C...

晁辉齿4631质粒的提取原理 -
孔诚狠18243097811 ______ 质粒提取是指去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒. 目录 一、质粒提取原理 质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体.作为一个具有自身复制起点的复制单位...

晁辉齿4631质粒载体倒入原核细胞时为什么要将细胞制备成感受态 -
孔诚狠18243097811 ______ 原核细胞正常状态不会主动吸收质粒载体,在感受态时细胞膜通透性增加,通过热击或电穿孔技术使载体进入细胞

晁辉齿4631几种感受态细胞制备 的效果比较 -
孔诚狠18243097811 ______ 现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状.将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养,即可筛选出转化子(Transformant,即带有异源DNA 分子的受体细胞).目前常用的感受态细胞制备方...

晁辉齿4631我有个质粒已经测序了,但保种的菌液没长起来.所以用质粒做了转化,重新挑斑还需要测序吗? -
孔诚狠18243097811 ______ 如果是普通的质粒的话,没有关系,你抽个质粒跑个胶,看看大小对不对就行了. 如果你的质粒上有重复序列,那你要保证你的菌的基因型可以保持这个质粒的稳定.不然质粒会丢失或者改变. 如果你的质粒上有同源序列,那你的菌得是重组酶缺陷的,不然结果同上一条.

(编辑:自媒体)
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