酶切后出现一抹状

敖肯胖4405DNA经限制性内切酶切割后产生几种末端?
逯习畅18343897367 ______ DNA分子经过限制性内切酶切割 产生的DNA片段末端通常有两种形式: 黏性末端和平末端. 1. 黏性末端 黏性末端是错位酶切造成的,即当 限制性内切酶在它识别序列的中心轴线 两侧将DNA的两条链分别切开,中间会 相隔几个核苷酸,切下后的两端会形成 一种回文式的单链末端,这个末端能与 具有互补碱基的目的基因的DNA片段 连接,所以称为黏性末端. 2. 平末端 平末端是平切造成的,即限制性内 切酶在它识别序列的中心轴线处切开, 会形成一个无黏性末端的平口,即产生 平末端.

敖肯胖4405DNA酶切反应不彻底电泳图谱是怎样的?DNA若发生降解,酶切图谱又是怎样的
逯习畅18343897367 ______ DNA酶切反应不彻底电泳图谱会产生额外的条带,比如本来一个大片段彻底切开后可以产生3个小片段.如果不彻底切开,那电泳的时候就会又有大片段,又有两两组合的中等判断,也会有3个小片段. 如果发生降解,条带就会变得模糊,没有降解的部分还是会产生条带.最坏的情况就是形成一片小分子的斑块.

敖肯胖4405酶切之后跑电泳发现,上面的大片段都连在一起了,而且特别的亮,成一片,而底下的小片段很浅很浅?? -
逯习畅18343897367 ______ 1、没切完全;2、切下来的片段太小

敖肯胖4405全基因组DNA双酶切,没有弥散条带或者条带异常 -
逯习畅18343897367 ______ 你的实验目的和详细步骤没说清楚.我先就现有的描述分析一下: 很有可能是DNA酶或者是连接酶这2步出了问题.首先,你的第一步酶切结果和预期的不一样,你就要怀疑是否酶出了问题.测试一下也很简单,找有酶切位点的质粒来试一下就知道了.看一下缓冲液是否用对了.条件是否正确.这一步的可能性最大.这些酶是你专用的还是公共试剂,公共试剂失活的可能性就更大了. PCR做不出来,你的引物设计位点在哪里?是否是要连接后才能出结果,那除了酶切没有完成外,DNA连接酶出错也是有可能的.

敖肯胖4405dna分子经限制酶切割产生的dna片段末端通常用的两种方式是哪两种? -
逯习畅18343897367 ______ 简单来说,限制性内切酶识别DNA序列中的回文序列.有些酶的切割位点在回文的一侧(如EcoR I、BamH I、Hind等),因而可形成粘性末端,另一些Ⅱ类酶如Alu I、BsuR I、Bal I、Hal Ⅲ、HPa I、Sma I等,切割位点在回文序列中间,形成平整末端.

敖肯胖4405酶切产物电泳检测无条带这是怎么回事?最近做酶切,出现很奇怪的现象.我四种要酶切的样品,分别进行单酶切和双酶切,结果电泳结果是只有一个可以切出... -
逯习畅18343897367 ______[答案] 建议你做如下改进: 1.原始质粒上样2ul,电泳检测,确定质粒质量没问题; 2.所有酶切体系均改为10ul,其中质粒2ul,酶0.1ul (双酶切时另一种酶也加0.1ul ),buffer终浓度为 1*,剩下为去离子水.酶切时间为4小时左右. 3.电泳用的凝胶最好为新鲜配...

敖肯胖4405双酶切线性DNA分子,一个切黏性末端,一个切平末端,切好后片段连接出问题!! -
逯习畅18343897367 ______ 不管什么养的末端,你用的都是特异的酶切位点,在粘末端附下游有平末端酶的识别位点的话,你说的情况可能出现.你在分析序列的时候,应该选择整条DNA上只有一个酶切位点的酶

敖肯胖4405蛋白污染的dna,酶切应该怎么处理 -
逯习畅18343897367 ______ RNA提取步骤:1. 匀浆处理:① 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积不应超过TRIzol体积10%.② 单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培...

敖肯胖4405tev酶切目的蛋白除去his标签但是无反应的原因 -
逯习畅18343897367 ______ 所谓的无反应是指什么? 是指酶切反应没有发生吗?就是切前和切后没有变化? 如果是这样的话,先看下酶切的缓冲液是否合适,一般最好是使用pH7.0左右的缓冲体系.比如20mM Tris-HCl,0.5mM EDTA,1mM DTT,pH7.0 酶切温度在30度左右 如果目的蛋白有二硫键形成的二聚体,为了确保不破坏二硫键,可以用1mM GSH 加1mM GSSG来代替DTT.

敖肯胖4405如何避免限制性内切酶产生星号活性 -
逯习畅18343897367 ______ 1.酶加少一点2.切的时间短一点3.体系中的甘油少一点4.buffer中的镁离子少一点 一般只需要控制前2个就行了.