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酶的底物抑制

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-26

环凯生物酶底物法检测系统(含质控样)  
   — GB/T5750-2023《 生活饮用水标准检验方法》酶底物法  
   — HJ1001-2018《 水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定酶底物法》

酶底物法检测系统

● GB 4789.28《 食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂质量控制》要求验证每一批培养基,确保所接收的每批培养基满足质量要求;

● EPA《饮用水检测实验室认证手册》第五版(2005年1月)中对质量控制的要求:每一批培养基以及实验室自制的培养基在使用前都应该采用阳性和阴性菌株进行无菌性检验。

产品特点:适用性广/可靠度高

参照GB/T 5750-2023《生活饮用水标准检验方法》和 HJ1001-2018《 水质总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定酶底物法》中酶底物法检测培养基的要求,环凯生物自主研发了酶底物法专用的MMO-MUG培养基,通过100株包含大肠菌群、大肠埃希氏菌或粪(耐热)大肠菌群(包括从水样分离的菌株和标准菌株)的验证,结果显示培养基特异性高,阳性菌株特征明显,无假阴性情况。灵敏度高,可精确检出低至 1MPN/100mL 水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌或粪(耐热)大肠菌群活菌,而对水样中常见包括酶底物假阳性菌株在内的非大 肠菌群抑制明显。产品通过了生活饮用水、地表水、地下水、生活污水和工业废水在内超200份样品的测试。

为了满足客户的方法验证、培养基适用性验证、阳性对照和 定量检测等需求,环凯生物推出可溯源的质控样。产品结果显示底物或荧光底物特异性高,通过抑菌剂抑制其他异养菌,可准确检测出水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌或粪(耐热)大肠菌群活菌。通过颜色或荧光判读结果,阴阳性区分明显。

产品特点:操作简单/检验周期短

只需4步即可完成检测,平均每分钟可检测一份样品。

检验周期只需24小时,无需验证试验。

产品检测原理

总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌能产生β-半乳糖苷酶,使培养基中的无色底物邻硝基苯β-D-吡喃半乳甘糖分解黄色的邻硝基苯酚,其中大肠埃希氏菌还能同时产生β-葡萄糖醛酸酶,使培养基中的4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸酶 分解为-甲基伞形酮,在紫外灯照射下产生荧光。在36±1℃经培养后培养孔变黄的为总大肠菌群;培养孔变黄并伴有荧光的为大肠埃希氏菌;44.5℃培养后培养孔变黄的为粪大肠菌群,变黄并有荧光的为大肠埃希氏菌。统计阳性反应出现的数量,对照MPN图表,分别计算出总大肠菌群,粪大肠菌群,大肠埃希氏菌的浓度值。

酶底物法检测系统(含质控样)技术参数

—— 水中大肠菌群检测酶底物法产品系列(含质控包)技术参数

饮用水检测

—— 适用于自来水系统、疾病预防控制中心、进出口检验检疫 系统、第三方检测实验室
符合GB/T5750-2023《生活饮用水标准检验方法》酶底物法(MMO-MUG)培养基

质量控制体系(质控样)

请在专业技术人员指导下完成

意义:
   ● 符合GB27043-2012  合格评定能力验证的通用要求,符合CNAS-CL01-A001-2022  对微生物实验室的要求;
   ● 用于识别培养基、设备、方法是否准确及评估操作人员的能力和确认其资格;
   ● 检测测量方法的有效性。

操作步骤
   01 准备1个空的无菌瓶(>300 mL) 和300mL 稀释液(无菌水或无菌PBS 缓冲液)。
   02 将质控样冻干粉从冰箱中取出,置于室温10~15分钟平衡温度。
   03 打开质控冻干粉,加入稀释液3mL溶解冻干粉,待充分溶解后全部转移到无菌瓶中。
   04 加少量的稀释液冲洗冻干粉瓶,回收所有质控样菌悬液到无菌瓶中,将剩余的稀释液倒入,充分振荡确保均匀,总体积为300mL。
   05 每个质控样冻干粉的量可做3个平行实验,将质控样悬液倒入取样瓶,每瓶定容到100mL 刻度。
   06 将 MMO-MUG培养基倒入每个含质控样取样瓶中,混匀。将所有混合液倒入97孔定量盘中并封膜,在36士1C培养24小时。 
   07 判读:黄色孔格为总大肠菌群阳性,黄色且显荧光为大肠埃希氏菌阳性,对照MPN表定量计数。

酶底物法检测配置单一饮用水检测

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巫士萧2193酶的抑制调节? -
鬱烁疮18836495329 ______ 楼上,只说了一部分,我再补充一下吧. 1.通过抑制剂抑制酶活:一般是外源添加抑制剂,酶的抑制剂有三类,竞争性抑制剂、非竞争性抑制剂和反竞争性抑制剂,各自产生不同的抑制效应. 2.别构调节:这主要别构酶来说,这种酶除了具有底物结合部位外,还有和调节物结合的部位,调节物不一定是抑制酶活,也可能会激活酶. 3.酶促产物抑制酶活:很多酶的活性都受其产物的抑制,特别是在系列反应中,终产物往往是代谢途径上第一个酶的抑制剂. 4.酶的化学修饰:最常见的就是酶的磷酸化和去磷酸化修饰,通常是磷酸化激活酶,相对的去磷酸化则抑制酶活. 5.酶分子的聚合和解聚:大多数情况下,酶和一些小分子的调节因子结合从而引起酶的聚合和解聚,使其在活性和非活性之间转变.

巫士萧2193酶抑制 -
鬱烁疮18836495329 ______[答案] 酶抑制作用(enzyme inhibition)是指酶的功能基团受到某种物质的影响,而导致酶活力降低或丧失的作用.该物质即称为酶抑制剂.酶抑制剂对酶有选择性,是研究酶作用机理的重要工具.很多药物,毒物和用于化学战争的毒剂都是酶抑制剂.此外,还...

巫士萧21931.一个酶作用于多种底物时,其天然底物的Km值应该是() A 最大 B 与其它底物Km值相同 C最小 D居中2.哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度()... -
鬱烁疮18836495329 ______[答案] 仅提供思路 第一题 不同的酶具有不同Km值,它是酶的一个重要的特征物理常数. Km值只是在固定的底物,一定的温度和pH条件下,一定的缓冲体系中测定的,不同条件下具有不同的Km值.其中Km值最小的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物. ...

巫士萧2193...在可逆性的酶抑制中分为竞争性抑制和非竞争性抑制 : 有些调节物分子在外形上与作用底物相似 因此能与底物竞争结合酶的活性位点 这种调节物被称为酶... -
鬱烁疮18836495329 ______[答案] (1)专一性(1分)(2)不可逆(1分)(3)竞争性(1分)(4)脂肪(1分) 缓冲(1分)( 5)竞争性(1分) 底物浓度越高底物与酶活性位点结合的机会越大竞争性抑制剂与酶活性位点结合的机会越小(2分) 如图所示:(2分)

巫士萧2193下列关于酶的竟争性抑制作用的说法正确的是( ). -
鬱烁疮18836495329 ______[选项] A. 抑制剂结构一般与底物结构相似 B. Vmax术变 C. 增加底物浓度可减弱抑制剂的影响 D. 使Km值增大

巫士萧2193酶的竞争性抑制剂具有( ) -
鬱烁疮18836495329 ______[选项] A. 与酶分子相似的结构 B. 与底物分子相似的结构 C. 与编码酶的基因结构相似 D. 将底物与酶相连的能力

巫士萧2193酶抑制剂是与酶结合并降低酶活性的分子,分为竞争性抑制剂和非竞争性抑制剂,其抑制作用原理如图B、C所示(图A所示为酶催化底物发生变化的作用原理... -
鬱烁疮18836495329 ______[选项] A. 非竞争性抑制剂会使酶失活 B. 两种抑制剂均只降低酶的活性 C. 非竞争性抑制剂与该酶催化的底物化学结构相似 D. 竞争性抑制剂与酶的活性位点具有互补结构,可被该酶催化分解

巫士萧2193酶活性受多种因素的影响,图1表示酶A和酶B在不同温度下催化反应速率的变化曲线,图2表示抑制酶活性的两个模型(模型A中的抑制剂与底物竞争酶的活... -
鬱烁疮18836495329 ______[答案] (1)酶A的最适温度是40℃,酶B的最适温度是80℃,由此可见,酶B可能来自热泉中的细菌体内的酶.(2)酶B的最适温度是80℃,在0~80℃的温度范围内,随温度的升高,酶B的活性逐渐升高.酶A在70℃时失活,如果先将酶A...

巫士萧2193在生物化学反应中,当底物与酶的活性位点形成互补结构时,可催化底物发生变化,如图甲I所示.酶的抑制剂是与酶结合并降低酶活性的分子.竞争性抑制剂与... -
鬱烁疮18836495329 ______[选项] A. 当抑制剂与酶结合后,酶的结构发生改变 B. 当提高底物浓度后,底物分子与酶活性部位结合的几率增加,使抑制剂的作用减弱 C. 竞争性抑制剂的化学结构与底物的结构相似,非竞争性抑制剂的分子结构与底物的不相似 D. 酶的基本组成单位是氨基酸或脱氧核糖核苷酸

(编辑:自媒体)
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