革兰氏染色意义

​何为革兰氏染色

革兰氏染色是细菌鉴别染色方法中最常使用的，染色结果可区分革兰氏阳性菌及阴性菌，是鉴定细菌最重要的分类依据之一。

染色有4种试剂（029010 革兰氏染色液）：

初染剂：结晶紫，步骤中最先使用的试剂，把细菌染成蓝紫色。

媒染剂：革兰氏碘液，可与初染剂结合，形成结晶紫及碘复合物(CV-I)，加强染料颜色的固定。

脱色剂：95%乙醇，因阳性菌与阴性菌细胞壁构造不同，而有不同的脱色反应。

复染剂：番红，被上述步骤脱色的细菌，就会被这此试剂染成红色

革兰氏染色原理：

革兰氏染色法是由丹麦微生物学家汉斯-克理斯蒂安-革兰(Hans Christian Gram)于1884年发明，至今仍为鉴别细菌之最重要方法。依据革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性以及革兰氏阴性两类。其染色原理推测与此两类细菌之细胞壁结构有重大关系。

说法有二

其一为：革兰氏阴性细菌的细胞壁含脂量高，酒精脱色时会将部份脂质萃取出来，而使细胞壁结构松动，通透性增加，故结晶紫-碘复合体(CV-I)被带出细菌体外而无色。革兰氏阳性细菌的细胞壁几乎不含脂质，酒精甚至会使细胞壁脱水，故结构更加致密，结晶紫-碘复合体就被留在细菌体内。

其二为：酒精处理时，会使细菌的细胞壁肽聚醣(peptidoglycan)空隙缩小。革兰氏阳性细菌之细胞壁肽聚醣较厚，而革兰氏阴性细菌较薄，所以造成结晶紫-碘复合体离开革兰氏阴性细菌的机会较大。故以酒精脱色后，取用红色的番红进行复染，此时无色的革兰氏阴性细菌就会变成粉红色，而原本已染上蓝色的革兰氏阳性细菌就会变成紫色。

革兰氏染色注意事项：

不论何种染色法，最基本都要先熟习抹片的制作，抹片应厚薄适中，且宜匀而薄，细菌量不宜太多。

染色时，脱色步骤可影响结果正确与否，脱色过度会使初染剂流失，使革兰氏阳性细菌变为革兰氏阴性细菌的颜色：但脱色不足，则无法完全去除CV-I复合物，结果使革兰氏阴性细菌呈现革兰氏阳性细菌的颜色。此步骤非常需要经验的累积。

每种染剂之间，以蒸馏水或无菌水充分清洗，以除去剩余的染液。

宜使用18-24小时培养的新鲜菌落，因老化的细菌易失去保留初染剂的能力，而显示出错误的结果，可能部分染成红色，部分呈紫色。

建议每次染色时，可以带品管玻片一起染色，确定染色时间及步骤正确。

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迟滢咽2984革兰氏染色法的重要性是什么? -
那储子18427164313 ______ 取经火焰固定的标本片,加结晶紫液于涂片上,染色1分钟,轻轻用水冲去染液;片上加革兰氏碘溶液,作用1分钟,用水冲洗;倾尽玻片上的积水后,滴加适量95%乙醇于涂片上,作用0.5~1分钟,进行脱色;水洗后,以复红染液复染1分钟,水洗净用滤纸吸干后镜检.脱色是该染色法的关键,注意涂片不再有颜色褪下即停止,脱色时一般不要把染料倾去,应用水把染料浮起再冲去,以免染料颗粒附着在玻片上.本染色法可用于鉴别革兰氏阳性及阴性菌.

迟滢咽2984试分析革兰氏染色法在细菌分类中的意义 -
那储子18427164313 ______[答案] 革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的细胞壁的结构和成分间的显著差别不仅反映在染色上,更反映在一系列形态、构造、化学组分、生理生化和致病性等的差别上,从而对生命科学的理论研究和实际应用产生了巨大的影响!

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那储子18427164313 ______ ① 杀死微生物,固定其细胞结构;② 保证菌体能牢固地粘附在载玻片上,以免水洗时被水冲掉; ③ 改变菌体对染料的通透性,一般死细胞原生质容易着色.

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那储子18427164313 ______[答案] 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是: 1)涂片固定. 2)草酸铵结晶紫染1分钟. 3)自来水冲洗. 4)加碘液覆盖涂面染1分钟. 5)水洗,用吸水纸吸去水分. 6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30秒后...

迟滢咽2984对新分离到的细菌进行革兰氏染色有什么作用? -
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那储子18427164313 ______ 细菌先经碱性染料结晶紫染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌紫色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G-).为观察方便,脱色后再用一种红色...

迟滢咽2984为什么革兰氏染色有十分重要的理论与实践意义 -
那储子18427164313 ______ 通过革兰氏染色,将细胞分为两类G+和G-,而且更容易观察细胞的形态. 理论方面:革兰氏染色法揭示了细胞的细胞壁的特性. 实践意义:更快更准确的为细胞及细菌的鉴定缩小了范围.革兰氏阳性菌能产生外毒素,革兰氏阴性菌能产生内毒素.