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革兰氏染色照片

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-24

何为革兰氏染色


革兰氏染色是细菌鉴别染色方法中最常使用的,染色结果可区分革兰氏阳性菌及阴性菌,是鉴定细菌最重要的分类依据之一。


染色有4种试剂(029010 革兰氏染色液)

初染剂:结晶紫,步骤中最先使用的试剂,把细菌染成蓝紫色。

媒染剂:革兰氏碘液,可与初染剂结合,形成结晶紫及碘复合物(CV-I),加强染料颜色的固定。

脱色剂:95%乙醇,因阳性菌与阴性菌细胞壁构造不同,而有不同的脱色反应。

复染剂:番红,被上述步骤脱色的细菌,就会被这此试剂染成红色

革兰氏染色原理:

革兰氏染色法是由丹麦微生物学家汉斯-克理斯蒂安-革兰(Hans Christian Gram)于1884年发明,至今仍为鉴别细菌之最重要方法。依据革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性以及革兰氏阴性两类。其染色原理推测与此两类细菌之细胞壁结构有重大关系。

说法有二

其一为:革兰氏阴性细菌的细胞壁含脂量高,酒精脱色时会将部份脂质萃取出来,而使细胞壁结构松动,通透性增加,故结晶紫-碘复合体(CV-I)被带出细菌体外而无色。革兰氏阳性细菌的细胞壁几乎不含脂质,酒精甚至会使细胞壁脱水,故结构更加致密,结晶紫-碘复合体就被留在细菌体内。

其二为:酒精处理时,会使细菌的细胞壁肽聚醣(peptidoglycan)空隙缩小。革兰氏阳性细菌之细胞壁肽聚醣较厚,而革兰氏阴性细菌较薄,所以造成结晶紫-碘复合体离开革兰氏阴性细菌的机会较大。故以酒精脱色后,取用红色的番红进行复染,此时无色的革兰氏阴性细菌就会变成粉红色,而原本已染上蓝色的革兰氏阳性细菌就会变成紫色。

革兰氏染色注意事项:

不论何种染色法,最基本都要先熟习抹片的制作,抹片应厚薄适中,且宜匀而薄,细菌量不宜太多。

染色时,脱色步骤可影响结果正确与否,脱色过度会使初染剂流失,使革兰氏阳性细菌变为革兰氏阴性细菌的颜色:但脱色不足,则无法完全去除CV-I复合物,结果使革兰氏阴性细菌呈现革兰氏阳性细菌的颜色。此步骤非常需要经验的累积。

每种染剂之间,以蒸馏水或无菌水充分清洗,以除去剩余的染液。

宜使用18-24小时培养的新鲜菌落,因老化的细菌易失去保留初染剂的能力,而显示出错误的结果,可能部分染成红色,部分呈紫色。

建议每次染色时,可以带品管玻片一起染色,确定染色时间及步骤正确。

来源:网络转载。
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松司苗4378如何判断未知菌的革兰氏染色正确与否? -
屈钢胖18557181623 ______ 革兰氏染色必须在同一载玻片上做阴阳对照结果才才可信.比如左边是阳性菌枯草芽孢杆菌,中间是未知菌,右边是阴性菌大肠杆菌.一起同时做染色,芽孢杆菌紫色,大肠杆菌红色的情况下,说明染色操作没有问题,未知菌是阳性就是阳性,阴性就是阴性.不过很多时候,由于操作技术问题,同一块菌斑中有的是阳性有的是阴性的情况也会发生.这种时候无法判断,就要重做.所以革兰氏染色法受到操作的影响太大,现在学术界判断革兰氏阴阳性也只是把传统的染色方法作为参考,到底阳性阴性以电子显微镜切片后的细胞膜亚显微结构照片作为主要依据.

松司苗4378革兰染色的关键步骤是什么 -
屈钢胖18557181623 ______ 脱色时间的掌握,是革兰染色成败的关键. 革兰氏染色四大基本步骤:结晶紫初染、碘液媒染、乙醇脱色、沙黄复染,其中乙醇脱色是关键.因为如果脱色过度,有可能会使革兰氏阳性菌呈假阴性,如果脱色不够,有可能使革兰氏阴性菌呈假阳...

松司苗4378影响革兰氏染色正确性的因素有哪些 -
屈钢胖18557181623 ______ 一、影响因素 1、在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果,假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,导致脱色不完全. 2、假阴性可能是因为细胞固定过度,造成细胞壁通透性的改变,而出现假阴性结...

松司苗4378革兰氏染色法是什么鬼,有什么用? -
屈钢胖18557181623 ______ 革兰氏染色法的重要意义是:革兰氏染色法不仅用来观察细菌的形态,而且它还是细菌鉴定的重要方法,微生物的细胞小且透明,在普通光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色,使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地...

松司苗4378要得到正确的革兰氏染色结果注意哪些操作,哪一步是关键步骤 -
屈钢胖18557181623 ______ 革兰氏染色: (1)涂片:涂片方法与简单染色涂片相同. (2)晾干:与简单染色法相同. (3)固定,与简单染色法相同 (4)结晶紫色染色:将玻片置于废液缸玻片搁架上,加适量(以盖满细菌涂面)的结晶紫染色液染色1分钟. (5)水洗:倾去...

松司苗4378革兰氏染色的关键步骤是什么 -
屈钢胖18557181623 ______ 革兰氏染色四大基本步骤: 结晶紫初染 碘液媒染 乙醇脱色 沙黄复染 其中乙醇脱色是关键 因为如果脱色过度,有可能会使革兰氏阳性菌呈假阴性 如果脱色不够,有可能使革兰氏阴性菌呈假阳性

松司苗4378革兰氏染色的注意事项
屈钢胖18557181623 ______ 1、选用活跃生长期菌种染色,老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性.2、涂片不宜太过厚,以免脱色不完全造成假阳性.3、脱色是革兰氏染色是否成功的关键,脱色不够造成假阳性,脱色过度造成假阴性.

松司苗4378革兰染色是什么?
屈钢胖18557181623 ______ 也可用革兰染色法,刚果红染色或PAS染色法染色后镜检,其阳性率均比直接镜检法高.革兰染色,孢子和假菌丝染成兰色;刚果红和PAS染色,孢子和假菌丝则染成红色.

松司苗4378革兰氏染色的关键步骤是什么 -
屈钢胖18557181623 ______[答案] 革兰氏染色四大基本步骤: 结晶紫初染 碘液媒染 乙醇脱色 沙黄复染 其中乙醇脱色是关键 因为如果脱色过度,有可能会使革兰氏阳性菌呈假阴性 如果脱色不够,有可能使革兰氏阴性菌呈假阳性

松司苗4378革兰氏染色法中若不用蕃红染液复染,能否分辨出革兰氏染色结果? -
屈钢胖18557181623 ______[答案] 革兰氏染色原理和番红复染本身并无关系. 但是,但是, 你能指着一片空白的照片说这些细菌没有被结晶紫染色所以是阴形吗? 鬼知道那里有没有细菌.

(编辑:自媒体)
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