bsa封闭原理

萧先苇4424为什么做western blotting时用脱脂牛奶呢?
凤音振18231062609 ______ 膜上有蛋白缺损点,不用蛋白封蛋白缺损点容易出现非特异染色. 也可用BSA封,效果并不比脱脂奶粉好. 脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白.原理就是用非抗原的蛋白去封闭膜,避免标记抗体固定在膜上引起背景增高.

萧先苇4424酶标板包被 -
凤音振18231062609 ______ 1)聚苯乙烯材料能吸附蛋白质. 2)选择什么包被取决于你要检测什么,是抗原还是抗体.我们一般用HIV HCV 人IgG 包被来检测HIV HCV的病毒抗原.用HBsAg包被,来检测抗HBsAg抗体. 3)CB是碳酸盐缓冲液吧,在pH9.6的碳酸盐缓冲液...

萧先苇4424ELISA实验中什么叫封闭 -
凤音振18231062609 ______ 封闭是在用抗原或抗体包被ELISA板后,为了避免ELISA板在后续反应中吸附其他大分子(抗原、抗体)而出现非特异性显色反应,用BSA、牛奶等将板上未结合的位点封闭起来的过程.

萧先苇4424如何降低ELISA试剂盒实验背景的方法 -
凤音振18231062609 ______ ELISA实验的原理似乎很简单,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,间中夹杂着洗涤和封闭.然而,即使是平淡无奇的洗涤和封闭,如果做得不太好,也有可能毁了整个实验.在实验结束时,我们是否能获得有意义的信息,ELISA试剂盒...

萧先苇4424Elisa中的blocking buffer 、tween、BSA等问题 -
凤音振18231062609 ______ Tween-20有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力.在做westen blot时,用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点可以降低抗体的非特异性结合.封闭剂应该封闭所有未结合位点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的标委、也不与抗体或检测试剂有交叉反应.最常见的封闭剂是BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-20(0.05 - 0.1%)稀溶液. 一抗的稀释看你试验的要求了.二抗你说的是酶标抗体吧,这个要稀释到工作浓度,后面的显色效果才是最佳的! BSA主要是封闭液中用到,其实作用显而易见是起到封闭效果,就是结合包被过程中未结合的结合位点,提高ELISA中的特异性结合,提高实验的精确度.一般浓度是1%-2%

萧先苇4424elisa blocking buffer 到底是5%的bsa还是0.5%bsa -
凤音振18231062609 ______ 封闭液的浓度,与其他条件一样都需要摸索,在不同的ELISA中是不一样的,可以做几个浓度的作对比,选取合适的浓度.我现在用的封闭液也是BSA,一般是1%,2%,具体不同实验还是需要去摸索的.

萧先苇4424ELISA法中洗涤液中加入牛血清白蛋白的作用 -
凤音振18231062609 ______ 一般是一抗或二抗的稀释液中加入牛血清白蛋白(BSA),作用是防止抗体非特异性吸附,本底增高,洗涤液中一般不加BSA,要加吐温-80.

萧先苇4424蔗糖可以做封闭液吗 -
凤音振18231062609 ______ 1、ELISA实验中,蔗糖本身没有封闭作用;2、封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等.3、加蔗糖的主要目的是保护ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保护剂”的作用.4、蔗糖溶液一般在ELISA板子经过BSA封闭后加,当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理;那一种更好需要你实验后来验证.但多数选择前者.

萧先苇4424如何减少ELISA试剂盒实验中背景因素的影响 -
凤音振18231062609 ______ ELISA试剂盒实验的原理似乎很简单,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,间中夹杂着洗涤和封闭.然而,即使是平淡无奇的洗涤和封闭,如果做得不太好,也有可能毁了整个实验.在实验结束时,我们是否能获得有意义的信息,这在很...

萧先苇4424荧光色染发操作方法 -
凤音振18231062609 ______ 免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白,主要包括蛋白和一抗结合,其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗,荧光显微镜下即可观察到荧光,下文主要列举了三种细胞免疫荧光染色的实验步骤.一、zo-1...