cacl2是沉淀吗

细胞经过一些特殊方法（电击法、CaCl2 法）等处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改 变，成为能允许外源 DNA 分子进入的细胞，即感受态细胞（Compenent cells）。

1 实验方法原理：

带有外源 DNA 的重组质粒，在体外构建后，导入宿主细胞，随着细胞的大量复制、繁殖， 才能够有机会获得纯的重组质粒 DNA，该过程称之为转化过程。受体细胞经过一些特殊方 法（如：CaCl2，RuCl 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，能容许外源 DNA 的载体分子通过。

2 实验材料、试剂、仪器耗材：

E. coli DH5α 菌株

LB 固体培养基、LB 液体培养基、CaCl2、硫酸镁、SOB、TFB 等 培养皿、恒温摇床、聚丙烯管、电热恒温培养箱、台式高速离心机、无菌工作台、烧瓶、恒 温水浴锅、低温冰箱、制冰机、分光光度计、微量移液枪、锥形瓶、试管等

3 实验步骤：

1、从 37℃培养 16-20 h 的平板中挑取一个单菌落(直径 2-3 mm)，转到一个含有 100 ml LB 或 SOB 培养基的 1L 烧瓶中。于 37℃剧烈振摇培养 3 h。一般经验，1 OD600 约含有大肠 杆菌 DH5α 109 个/mL。

2、将细菌转移到一个无菌、一次性使用的、用冰预冷的 50 ml 聚丙烯管中，在冰上放置10 min，使培养物冷却至 0℃。

3、于 4℃用 Sorvall GS3 特头（或与之相当的转头）以 4 100 r/min 离心 10 min，以回收 细胞。

4、倒出培养液，将管倒置 1 min 以使最后的痕量培养液流尽。

5、每 50 ml 初始培养液用 30 ml 预冷的 0.1 mol/LCaCl2-MgCl2 溶液(80 mmol/L MgCl2，20 mmol/L CaCl2)重悬每份细胞沉淀。

6、于 4 ℃用 Sorvall GS3 转头（或与之相当的转头）以 41 00 r/min 离心 10 min，以回 收细胞。

7、倒出培养液，将管倒置 1 min 以使最后的痕量培养液流尽。

8、每 50 ml 初始培养物用 2 ml 用冰预冷的 0.1 mol/L CaCl2(或 TFB)重悬每份细胞沉淀。

9、此时，可以用新鲜制备的感受态细胞直接做转化实验，也可以将细胞冻存于-  70℃。

4 注意事项：

1. 为达到高效转化，活细胞数务必少于 10 8 个细胞/mL，对于大多散大脑杆菌来说，这相 当于 OD 值为 0.4 左右。为保证细菌培养物的生长密度不致过高，可每隔 15-20 min 测定 OD600 值来监测，用监测的时间及 OD 值列一个图表，以便预测培养物的 OD600 值到 0.4 的时间，当 OD600 值达到 0.35 时，收获细菌培养物。

2. 在菌株与菌株之间，OD 值与每毫升中活细胞散间的关系变化很大，因此有必要通过漶 量特定脑杆菌的生长培养物在生长周期的不同时相的 OD600 值，并将各稀释维度的培养物 铺于无抗生素的 LB 琼脂板以计算每一时相的活细胞散，从而使分光光度计读数得到标准化。 3. 对大多数大肠杆菌（MC106 除外），采用 TFB 代替 CaCl2 可得到相同或更好的结果。 Dagert 和 Ehrlieh 的实验(1979)曾表明，细胞可以于 4℃在 CaCl2 溶液中保存 24-48 h， 在贮存的最初 12-24 h 内，转化率增加 4-6 倍，然后降低到初始水平。

4. 克隆的新鲜程度，一定要选新鲜平板的单克隆，即刚涂布生长过夜的平板。

5. 菌体的 OD600 值，JM109 或 BL21，OD 值为 0.35，DH5α 为 0.4，要尽量保证 OD值不要过高，更不能超过 0.6。

6. 低温处理的时间，做完后冰上保存 12-24 h 后分装，并保存于-80℃。

7.   试剂和用品，所有的用品（离心管、药瓶等）用新的，如果使用旧的，要确保干净，CaCl2溶液。

周苏贡1047CaCl2为什么能与碳酸根离子生成沉淀?不是生成的碳酸钙和盐酸会?
长狄吴17148283838 ______ 本题实质是离子共存和离子检验,第二次检测中,铝离子与碳酸根离子不能共存,明显错误.一 三 检测均正确,据此可判断溶液的阴阳离子,因不含其他还原性离子,可用c方法检验硫酸根离子,用d方法检验碳酸根离子时,碳酸根和硫酸根均能与钙离子生成沉淀,故不行.

周苏贡1047碳酸氢钠为什么不与氯化钙反应碳酸氢根部分电离形成碳酸根 碳酸根不会和钙离子反应生成沉淀吗?还有高中书上写着 离子反应的实质是通过反应使溶液中... -
长狄吴17148283838 ______[答案] NaHCO3电解为Na+和HCO3- 而CaCl2则点解为Ca2+和2Cl- CaCO3沉淀的形成是CO3 2-和Ca2+相结合 这里的电解反应只有HCO3-和Ca2+没有CO3 2-,因此,无法沉淀 强酸制弱酸是指浓度的改变,这里的浓度指酸在水溶液里的浓度改变,因此无关

周苏贡1047NaOH与CaCl2反应生成的Ca(OH)2为什么是沉淀 -
长狄吴17148283838 ______[答案] 一方面,生成的Ca(OH)2是微溶于水的,所以是沉淀,另一方面,Ca(OH)2也可以吸收空气中的CO2 产生CaCO3 沉淀.不过主要是第一个愿因,Ca(OH)2溶解度小.

周苏贡1047澄清石灰水通co2为什么有沉淀,沉淀又消失,通cacl2溶液呢 -
长狄吴17148283838 ______[答案] 通入SO2先变浑浊,因为生成亚硫酸钙(不溶),然后由于亚硫酸钙太多,又继续反应生成亚硫酸氢钙(可溶),又变澄清.Ca(OH)2+SO2=CaSO3沉淀+H2O Ca(OH)2+SO2=Ca(HSO3)2 CO2的原理与此类似.先生成碳酸钙CaCO3,再生成碳酸氢钙...

周苏贡1047将过量CO2分别通入下列几种溶液,最终有沉淀生成的是CaCL2溶液 NaSiO3溶液 Ca(CLO)2溶液 饱和碳酸钠溶液 -
长狄吴17148283838 ______[答案] Na2SiO3溶液和饱和碳酸钠溶液 1.CaCL2溶液和CO2不反应. 2.Na2SiO3+ 2CO2(过量)+2H2O = H2SiO3(沉淀) + 2NaHCO3 3.Ca(ClO)2 + 2CO2(过量)+2H2O = Ca(HCO3)2 + 2HClO 4.Na2CO3+ CO2+ H2O = 2NaHCO3 (沉淀)

周苏贡1047碳酸根离子的检验,取少量待测液,加入CaCl2溶液有白色沉淀产生;再取少量待测液,加入盐酸,产生无色无味的气体,将气体通入澄清石灰水中产生白... -
长狄吴17148283838 ______[答案] 1、硝酸钙的问题:理论上是可以的.但是相比较而言,氯化钙更加经济,并且较为常见. 2、为了排除碳酸氢根的干扰. 3、碳酸氢根也可以与酸反应生成二氧化碳,但是不能与氯化钙反应生成沉淀. 4、是.但是硫酸根的话就没有第二步的气体产生了.如...

周苏贡1047H2CO3能和CaCl2反应吗?H2CO3能和CaCl2反应吗?有人说能,因为是复分解反应,反应生成了CaCO3沉淀.也有人说不能反应,因为H2CO3是弱酸,而... -
长狄吴17148283838 ______[答案] 不能,我们先假设能反应,产物是碳酸钙和盐酸.但是这有个矛盾.虽然产生了沉淀,但是产物里面有盐酸,而盐酸是强酸,碳酸是弱酸,怎么能用弱酸制得强酸?所以不会反应.

周苏贡1047加入caci2溶液,有白色沉淀生成,溶液中一定存在碳酸根离子吗 -
长狄吴17148283838 ______ CaCl2=Ca2++2Cl- 可能是形成Ca的沉淀,也可能形成Cl的沉淀 初中常见的OH-,CO3-,与Ca2+形成沉淀 Ag+,与Cl-形成沉淀 这样说加入cacl2溶液,有白色沉淀生成,溶液中不一定是碳酸根离子

周苏贡1047SO2气体通入CACL2溶液有沉淀吗? -
长狄吴17148283838 ______ 没有 如果生成了沉淀,那么就有HCl生成,而反应物可以看成是SO2+H2O==H2SO3 属于弱酸制强酸了(弱酸是弱电解质,弱酸制出了的强酸又会和弱酸盐反应生成弱酸,),所以没有(一般只能强酸制弱酸) 如果通入用HNO3酸化过的BACL2溶液中会有沉淀,HNO3把SO3 2-氧化成SO4 2-,所以有沉淀(H2SO4是强酸)

周苏贡1047在CaCl2溶液中通入CO2气体,会产生沉淀吗?CO2会先和溶液中的水反应,生成碳酸,再和CaCl2反应,生成CaCO3沉淀吗? -
长狄吴17148283838 ______[答案] 有个叫“强酸制弱酸”的说法.碳酸是弱酸,不能制出盐酸. 再说,即使能反应,碳酸与氯化钙生成碳酸钙和盐酸,盐酸又和碳酸钙反应了,不就又回去了!