ct值负600考虑什么

厉咱菲1882相对荧光定量PCR中,2( - ΔΔCt)是怎么回事?比如我用T基因为内参,得到了耐药菌A、B、C基因的Ct值的均值和敏感菌的A、B、C基因的Ct值的均值,怎么... -
汤终寇18912635623 ______[答案] 耐药菌A,B,C的ct值分别先减去它们各自的内参基因T的ct值,这是ΔCt1,敏感菌的也一样,得到ΔCt2,用ΔCt1-ΔCt2就是ΔΔCt,然后求负倒数就是2(-ΔΔCt)了,这个数值就是你耐药菌和敏感菌不同基因的表达量差异倍数

厉咱菲1882实时荧光定量PCR的结果该怎样分析?为什么最好不用Syber Green? -
汤终寇18912635623 ______[答案] 如果有标准曲线,按照标准曲线计算.一般都是相对量.则用delta delta CT方法来计算.举例如下:对照组基因A的CT值为20,内参(比如βactin)CT值15.实验组基因A CT值18,内参CT值14.首先算加样量:delta CT=15-14=1.2的1次...

厉咱菲1882可不可以将不同浓度梯度的cDNA在同一板做定量PCR对基线和CT值得设置有影响吗? -
汤终寇18912635623 ______[答案] 没有影响,标准曲线就是这样做出来的.梯度稀释的模板有不同的Ct值,然后就可以根据这个做标准曲线了.

厉咱菲1882如何确定引物二聚体和扩增产物的Tm值? -
汤终寇18912635623 ______[答案] 最近在做qPCR,今天遇到个样品的浓度很低,想看看能不能做出样品10倍梯度稀释的曲线,于是照常做了. 结果最后的溶解曲线发现,头三个的Tm是84,之后的5个样品时77.从Ct值来看,也是头三个还有点像样,后面的Ct都是33-34. 很显然后面的...