edci催化机理

在现代生物医学研究中，荧光标记已经成为一种不可或缺的技术，它使研究人员能够实时监测生物分子，跟踪细胞，识别蛋白质，研究细胞信号传导，以及进行分子诊断等。而实现这些目标的关键是荧光标记试剂，其中吖啶酯作为发光标记试剂之一，它在这些研究中经常出现，其类型多种，仅仅nsp系列的就有4种，包含吖啶盐NSP-SA、吖啶盐NSP-SA-NHS、吖啶酰肼NSP-SA-ADH以及吖啶酯NSP-DMAE-NHS。下面就重点带大家了解一下这个系列的吖啶酯。

吖啶酯

一、吖啶酯NSP系列简介

吖啶酯NSP系列是一组在生物检测和荧光标记领域广泛应用的化合物，他们均具有高度灵敏度和特异性，大致介绍如下：

1、吖啶盐NSP-SA：引入了磺酰胺基团，其稳定性高，抵抗水解的能力强，在酸性溶液中(pH<4.8)都很稳定,与蛋白质偶联物在室温下保存4周,其光量子产率不降低,冻干品在-20°C下,可以保存一年以上。同时在亲水性上进行了改变，引入丙磺酸内盐，增加了其溶解性，使其与抗体、核酸等形成的标志物可以水溶，促使发光检测可以在水中进行，不过因其为吖啶羧酸，需要加入缩合剂EDCI等，才能与含胺基的蛋白发生偶联反应。

2、吖啶盐NSP-SA-NHS：这是一种关键的荧光标记物质，它有着空间位阻大，水解稳定性好和信噪比高等性质，其光量子产率优于吖啶酯AE-NHS，可应用于直接化学发光分析及化学发光免疫分析中。同时NSP-SA-NHS化学发光不需任何催化剂和增强剂，在有过氧化氢的稀碱性溶液中就能发光，从而降低了背景发光，提高了信噪比，干扰因素少。此外在其它地方也有许多优势，如光释放迅速集中、发光效率快、发光强度大，标记物稳定，在2-8℃条件下可保存半年。

3、吖啶酰肼NSP-SA-ADH：为吖啶磺酰胺内盐，由于C-N键与C-O键的键级不同，C-N键大于C-O键，吖啶酰胺类化合物抵抗水解的能力强。因其是吖啶酰肼，含有游离氨基，吖啶酰肼末端适用直接偶联含有醛基的多糖,核酸或者蛋白质等。

4、吖啶酯NSP-DMAE-NHS：NSP-DMAE-NHS是一种发光理想的免疫分析标记物质，NSP-DMAE-NHS与抗体(Ab)偶联物的发光强度更高，且为闪光型发光，在0.4s时达到理想峰值。相比于AE-NHS型的热稳定性也明显提高，如在室温下，在pH值7.0的PB缓冲液中，经过两周的时间，发光活性只降低了3.6%。

虽然吖啶酯系列很多，但它们的发光母体和机理是一致的，其发光性能区别也不大，一般会根据实验要求进行选择。

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