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elisa试剂盒工作原理

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-26

ELISA是蛋白定量的金标准,也是免疫学研究中最常用的实验方法之一。很多人觉得ELISA很简单,其实不然。威奥生物带你绕开ELISA实验中出现的各种问题,轻松搞定ELISA实验。

酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法,分为三种方法,夹心法、竞争法、间接法,最常用的就是夹心法。

ELISA夹心法原理示意图

如何选择合适的ELISA试剂盒?

1、知道所需要品牌试剂盒的命名规则,如威奥生物的命名规则是:种属-检测指标-英文简称-ELISA检测试剂盒

① 样本的来源种属,首先要确定您的样品是一个来自哪里,然后选择对应的试剂盒种属

② 需要检测样本中的哪个指标

2、待测因子的表达水平(对应检测限的高低,表达水平较高的可以选择普通的kit,如果表达水平过低,已经落在盒子的检测限之外,可以考虑选择定制高灵敏的盒子,有更低的检测下限)

3、仪器——最关键是需要有酶标仪,检测波长需要450nm

ELISA操作流程(夹心法)

ELISA夹心法操作流程

实验注意事项

1、每一个不同的试剂盒都要重新检测标准品,做标曲,否则会有较大误差。

2、每次洗涤的步骤都要洗干净,如果是手动洗涤,每次拍板用的滤纸都要更换,防止交叉污染。

3、加样量要完全精准,使用洗液枪枪头不能有多余液滴残留,会导致加样量偏多。

4、孵育样品、检测抗体和显色底物均需要覆盖封板膜,减少污染和挥发,且每次使用后都要更换新的封板膜,防止交叉污染。

5、血清样本取样时要注意,避免溶血、脂血等样本。如样本条件受限,建议用样本稀释液适当稀释,减少基质效应影响。

6、实验之前将微孔板和试剂在室温下平衡;不要将微孔板置于温度变化太大的地方(如阳光直射、通风处等);可用铝箔包住微孔板底部及下部外沿降低边缘效应和漂移;不使用边缘的孔。综上所述以尽量减少边缘效应。

7、ELISA数据处理有专门的软件,并且要核对说明书选择合适的拟合曲线。

ELISA是一种广泛应用于大分子蛋白和小分子激素定量检测的免疫诊断技术。合适的样本预处理、优质的仪器&试剂、正确的实验操作,是保证ELISA实验结果准确可靠的必要条件。

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钱衫左3857elisa试剂盒的组成结构 -
苍伏韦18991393157 ______ 1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激.使用不含热原和内毒素的试管.收集血液后,1000*g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离. 2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测.1000*g离心30分钟去除颗粒. 3、 细胞上清液:...

钱衫左3857如何处理酶联免疫试剂盒最后的数据 -
苍伏韦18991393157 ______ 数据检测出来 然后根据具体的进行计算就行 如果还不懂可以参照elisa试剂盒说明书

钱衫左3857elisa试剂盒的基本组成和研制程序是怎样的.求解! -
苍伏韦18991393157 ______ 完整的ELISA试剂盒包含以下各组分: (1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂); (2)酶标记的抗原或抗体(结合物); (3)酶的底物; (4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中); (5)结合物及标本的稀释液; (6)洗涤液; (7)酶反应终止液. 楼主你说的研制程序是指什么?楼主,我建议你去注册生物秀论坛,那上面关于Elisad的原理,试剂,操作步骤,注意事项,可能存在的问题都有详细说明,而且都比较专业,可信.

钱衫左3857试剂盒的组成 -
苍伏韦18991393157 ______ 完整的ELISA试剂盒包含以下各组分: (1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂); (2)酶标记的抗原或抗体(结合物); (3)酶的底物; (4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中); (5)结合物及标本的稀释液; (6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水; (7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的最终体积而异,在板式ELISA中一般采用3mol/L.

钱衫左3857黄曲霉毒素B1酶联免疫检测试剂盒检测方法是什么? -
苍伏韦18991393157 ______ 就是ELISA方法啊,基本原理是抗原抗体反应+酶联化学显色反应

钱衫左3857您知道ELISA试剂盒操作注意事项有哪些吗 -
苍伏韦18991393157 ______ ELISA试剂盒操作注意事项: 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存. 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果. 3.各步加...

钱衫左3857什么叫试剂的规格呀?? -
苍伏韦18991393157 ______ 药物的数量和质量 举例:植物钙调素(CAM)ELISA试剂盒 用于定量检测植物血清、血浆及相关液体样本中的植物钙调素 工作原理:植物钙调素试剂盒采用双位点夹心酶联免疫吸附法(ELISA),测定样品中植物钙调素(CaM)的水平.向预...

钱衫左3857elisa试剂盒什么是ELISA试剂盒 -
苍伏韦18991393157 ______[答案] ELISA就是酶联免疫吸附试验,具体的概念看摆渡百科. ELISA试剂盒就是为测定某一个目标蛋白所需要的主要试剂的套装.一般包括标准品(一般是重组蛋白),抗体,稀释缓冲液,辣根过氧化物酶及其底物等等.

钱衫左3857ELISA的优点和影响因素? -
苍伏韦18991393157 ______ ELISA检测技术的优点近二十几年来,免疫学分析方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比.继50年代的免疫荧光...

钱衫左3857ELISA试剂盒定量和定性的区别 -
苍伏韦18991393157 ______ 定性分析与定量分析应该是统一的,相互补充的;; 定性分析是定量分析的基本前提,没有定性的定量是一种盲目的、毫无价值的定量;; 定量分析使之定性更加科学、准确,它可以促使定性分析得出广泛而深入的结论 定性试剂盒是判断一种物质在某种样本中的有无,一般表示为阴性或者阳性,具体是通过OD值来判定的,不能计算出该物质的具体浓度.一般定性试剂盒只会自带一种阴性标准和一种阳性标准. 定量试剂盒是用来测定一种物质在某种样本中的具体浓度值是多少,一般是有单位的,比如ng/ml,这种试剂盒主要是用来测定这种物质的具体变化情况,例如是升高了还是降低了,升高了多少,降低了多少等等.一般用到定量的试剂盒的时候就已经确定样本中含有该物质.

(编辑:自媒体)
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