gapdh在wb中的作用

臧选曲3712哪位知道GAPDH内参有什么优点? -
陈芝爸19738438380 ______ ◆Real-time PCR技术的原理就是用一种标准对照能够估计出一种特异性靶DNA或RNA分子的相对含量. ◆这种标准对照就是参照物,在定量PCR中,用它来作为扩增系统的阳性对照,并作为未知样品定量的标准,同时通过竞争性作用校正扩增...

臧选曲3712western blot 的一抗是内参抗体吗 -
陈芝爸19738438380 ______ 内参抗体是个什么鬼? 一抗就是你要检测的目的抗体. GAPDH作为内参的话,也是要孵它的一抗

臧选曲3712请问,GAPDH作为RT - PCR内参的原理是什么呀?我知道为什用它做内参了,就是不清楚怎么用它, -
陈芝爸19738438380 ______[答案] 一般认为一些持家基因的表达量在不同状态下变化不大,所以可以认为它们表达是恒定的,故而用来做内参 简而言之,就是... 要比较其中某基因A表达转录变化,就分别比较两个样品中A相对于GAPDH的表达即可.譬如,如果第一个条件下A:GAPDH...

臧选曲3712请教western blot转膜的原理 -
陈芝爸19738438380 ______ 原理: 1. 电场力作用条件下,带电粒子(PAGE胶中的蛋白)会发生定向迁移; 2. 蛋白大小如果超过膜孔径(0.22μm or 0.45μm),不会透过膜; 3. WB用的膜具有蛋白吸附作用;

臧选曲3712什么时候选择线粒体内参抗体?
陈芝爸19738438380 ______ 我们知道,在Western Blotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参蛋白,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在各组...

臧选曲3712western blot的抗体怎么选择? -
陈芝爸19738438380 ______ 做原核表达蛋白western一个要注意的问题就是上样的蛋白不能太大,最好在100ng以下.以防止因为蛋白量太大引起非特异性信号.

臧选曲3712做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 -
陈芝爸19738438380 ______[答案] 你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来. 常说的qPCR,... 也就是表达量为2倍的关系. 这里,我们可以知道内参的作用,即通过测量内参,可以在后面分析过程中将不同样品的起始量...

臧选曲3712请帮忙解释一下,PCR,RT - PCR,GAPDH.real time之间的联系. -
陈芝爸19738438380 ______ 看来是做RT-PCR的, PCR是聚合酶链式反应,也就是体外特异性扩增DNA片段,是所有PCR技术的基础; RT-PCR有2种理解,即反转录RCR(reverse transcription PCR,以RNA为模板扩增DNA)或实时PCR(real time PCR),很显然,您指的...