mirna测序分析流程
鱼娥柔4799miRNA荧光定量PCR结果怎么看 -
晁典有19358027566 ______ 荧光定量我用罗氏的反应速度算是相当快的,在样本处理(提出核酸)后,放在荧光定量PCR仪器上一般需要30分钟~1小时左右.但是如果你的样本比如支原体的含量非常高,可能在没有运行结束已经可以看出结果了,但是如果说5分钟就出结果了,确实太快了点.如果是realtime做表达量,用excel的制图,将每个个体的Ct值平均数做出柱状图就可以了.如果你还做了标曲的话,就用制图中的散点图看R2值. 其实这些功能做定量PCR的时候电脑程序应该会自动分析才对. 具体情况具体分析.
鱼娥柔4799怎样检查基因组注释结果的可靠性 -
晁典有19358027566 ______ 基因组注释主要包括四个研究方向:重复序列的识别;非编码RNA的预测;基因结构预测和基因功能注释.我们将分别对这四个领域进行阐述. 1:重复序列的识别. 重复序列的研究背景和意义:重复序列可分为串联重复序列(Tendam repeat...
鱼娥柔4799如何筛选目的基因的miRNA
晁典有19358027566 ______ 你指的是寻找miRNA的靶基因位点吗? 一般都是利用生物信息学软件进行预测,但这种预测都是有局限性的,比如miRNA可能会与靶基因之间产生错配,这样会丢失一些靶基因,另外预测的都未经过实验的验证,还需要进行实验的验证来去伪存真. 当然植物可以使用降解组测序的方法来进行靶基因预测,原理就是植物中miRNA与mRNA往往是碱基近乎完全匹配来结合后将mRNA降解,剪切位点通常位于miRNA的第十位或第十一位碱基,被剪切后的片段可以通过建库后进行测序,可以真实的得到miRNA在mRNA上的作用位点的序列. 动物的就不行了,动物中一般是miRNA结合在mRNA上对mRNA翻译进行抑制,无法像植物那样得到其降解后的小片段进行测序验证
鱼娥柔4799谁知道microRNA芯片、microRNA测序和基因表达谱芯片区别,具体些,谢谢 -
晁典有19358027566 ______ microRNA芯片和基因表达谱芯片都是芯片.芯片指样本荧光染色杂交到芯片上,通过各个点亮度差异来判断表达差异的方法.区别是一个针对microRNA,微小RNA.另一个针对mRNA,信使RNA.microRNA测序区别于芯片分析方法.直接测出小片段的序列然后用生物统计方法合并区段等最终计算出表达差异.microRNA芯片与microRNA测序是用不同平台研究同样的问题.
鱼娥柔4799求助miRNA QRT - PCR引物设计 -
晁典有19358027566 ______ miRNA引物设计(茎环法+染料法检测) 设计方法:通用茎环后端加miRNA后面6个碱基的反向互补序列为反转录引物,正向引物为miRNA去除后面6个碱基的序列,反向引物在茎环上.反转录茎环通用序列:...
鱼娥柔4799DNA测序技术的试验流程是什么?
晁典有19358027566 ______ (3)立刻将凝胶转移至1升(总量的一半)预冷的显影液充分振荡直至模板带开始显现或开始出现第一批条带,把凝胶移入剩下的1升显影液中继续显影2~3分钟或直至所有条带出现.
鱼娥柔4799如何预测具有miRNA结合位点的环状RNA -
晁典有19358027566 ______ 先做rna测序,筛选预测所需的环状RNA,之后设计特异引物用荧光定量做环状RNA验证.
鱼娥柔4799求助miRNA QRT - PCR引物设计 -
晁典有19358027566 ______ miRNA引物设计(茎环法+染料法检测) 设计方法:通用茎环后端加miRNA后面6个碱基的反向互补序列为反转录引物,正向引物为miRNA去除后面6个碱基的序列,反向引物在茎环上.反转录茎环通用序列:...
鱼娥柔4799什么是miRNA? -
晁典有19358027566 ______ MicroRNA (miRNA):是含有茎环结构的miRNA前体,经过Dicer加工之后的一类非编码的小RNA分子(~21-23个核苷酸).MiRNA,以及miRISCs(RNA-蛋白质复合物)在动物和植物中广泛表达.因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能,miRNA被认为在调控发育过程中有重要作用.
鱼娥柔4799求高手指导 DNA测序实验怎么做 具体步骤是怎样的 -
晁典有19358027566 ______ 生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸,每组寡核苷酸都有固定的起点,但却随机终止于特定的一种或者多种残基上. 由于DNA上的每一个碱基出现在可变终止端的机会均等,因些上述每一组产物都是一些寡核苷酸混合物,这些寡核苷酸的长度由某一种特定碱基在原DNA全片段上的位置所决定. 在可以区分长度仅差一个核苷酸的不同DNA分子的条件下,对各组寡核苷酸进行电泳分析,只要把几组寡核苷酸加样于测序凝胶中若干个相邻的泳道上,即可从凝胶的放射自影片上直接读出DNA上的核苷酸顺序.