neb+t4连接酶

冉柿满2493DNA连接酶一共有几种?分别有什么特点? -
匡花蕊13112615694 ______[答案] DNA连接酶分为两类:常用的E·coliDNA连接酶(大肠杆菌中分离)和T4DNA 连接酶(T4噬菌体中分离的)

冉柿满2493最近做酶切连接,为防自连碱性磷酸酶将5'端去磷酸化,可是T4连接酶怎么连接去磷酸化的5'端和3' - OH端啊因为T4连接酶就是催化5'P和3' - OH没有了... -
匡花蕊13112615694 ______[答案] 据NEB M0202 T4 DNA 连接酶的产品说明: 该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键.该酶不仅能够催化平滑末端或粘性末端DNA之间的连接,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口. 也...

冉柿满2493Takara的T4连接酶反应产物可否直接用于转化 -
匡花蕊13112615694 ______ 可以,连接体系不要超过15ul,连接过夜后全部加入100ul感受态宿主菌中做转化.

冉柿满2493DNA 连接酶能链接单链DNA 吗 -
匡花蕊13112615694 ______ 不可以…… DNA连接酶一般实验室用的是基因改造后的T4 DNA连接酶,连接双链DNA以及有粘性末端的DNA片段,不能连接单链DNA

冉柿满2493DNA连接酶和DNA聚合酶的异同点同上 -
匡花蕊13112615694 ______[答案] 基因工程中所用的连接酶有两种:一种是从大肠杆菌中分离得到的,称之为E·coli连接酶.另一种是从T4噬菌体中分离得到,称为T4连接酶.这两种连接酶催化反应基本相同,都是连接双链DNA的缺口(nick),而不能连接单链DNA.DNA连接酶和...

冉柿满2493DNA连接酶的种类及区别?限制酶和DNA连接酶作用的化学键分别是什么?载体的条件是?(3点 ) -
匡花蕊13112615694 ______[答案] 1. (1)E·coli DNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端; (2)T4DNA连接酶:来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低. (3)热稳定的DNA连接酶(thermostableDNAligase),是从嗜热高温放线菌(...

冉柿满2493基因转录是否需要RNA连接酶?RNA连接酶作用是什么?RNA聚合酶能否将核苷酸连接... -
匡花蕊13112615694 ______[答案] 没做过就别乱答了,什么连双链、连粘末端都是胡扯.1. RNA连接酶是基因工程实验室才用到的酶,一般是T4 RNA ligase,可以将两条单链RNA,一条单链RNA与一条单链DNA连接成一条整链,也可以将两条DNA单链连接起来,或者将一条DNA的首...

冉柿满2493根据来源分类,DNA连接酶可分为? -
匡花蕊13112615694 ______[答案] 根据酶的来源不同,可分为E·coli(大肠杆菌)DNA连接酶和T4(T4噬菌体,属于病毒)DNA连接酶两类.