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pcr内参ct值范围

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-25

喻诸疤4439Realtime PCR中的内参Ct值相差很大是为什么 -
蔚兴急13183945420 ______ 不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象,但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因,如果目标基因和内存基因表达量(CT值差)过大,用内参基因来衡量目标基因的表达量(绝对值)就不完全可靠,但至少可以说明目标基因表达非常低.

喻诸疤4439如何分析real - time PCR结果 -
蔚兴急13183945420 ______ SYBR@Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料,与双链DNA结合后,其荧光大大增强.这一性质使其用于扩增产物的检测非常理想.SYBR@Green I 的最大吸收波长约为497nm,发射波长最大约为520nm.在PCR反应体系中,加入过量SYBR@Green 荧光染料,SYBR@Green 荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR@Green 染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步.

喻诸疤4439做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 -
蔚兴急13183945420 ______ 内参就是在cDNA里面的啊 比如你有三种反转录的cDNA 就分别用内参的引物做三组 和目标基因一起做就行了 不过是要单独加 不是和目标基因的引物加在一个孔里

喻诸疤4439求解荧光定量PCR检测报告单 -
蔚兴急13183945420 ______ UU,CT是性病,不是艾滋病,艾滋病是免疫缺陷型病毒引起的,英语是HIV. 而且,你的检测结果是阴性,就是说你没有感染UU(支原体)和CT(淋球菌).1000是医院的检测下限,<1000也就是阴性的意思.

喻诸疤4439实时荧光定量PCR的结果该怎样分析?为什么最好不用Syber Green? -
蔚兴急13183945420 ______[答案] 如果有标准曲线,按照标准曲线计算.一般都是相对量.则用delta delta CT方法来计算.举例如下:对照组基因A的CT值为20,内参(比如βactin)CT值15.实验组基因A CT值18,内参CT值14.首先算加样量:delta CT=15-14=1.2的1次...

喻诸疤4439q - PCR的几个问题? -
蔚兴急13183945420 ______ 1 可以先平均再求差值,也可以先差值再平均.两种方式的variation应该是一样的.2 可以去掉,但是少于3个的样品没有统计学上的意义.你可以自己看看.1 看内参和目的基因的Ct值没有问题2 对数期的线条应该是比较漂亮的,前头的不好看正常.很有软件有美化这些线条的功能,所以会很漂亮,这个不用太在意,只要你的Ct值重复孔是一样的就好.

喻诸疤4439如何处理Real time PCR的数据结果 -
蔚兴急13183945420 ______ 学习做Realtime PCR, 实验结果是出来了,得到的内参、目的基因的Ct 值在15-25 之间,熔 融曲线基本上也是单峰,但不太会处理这个结果,对着数据发愁...不同的处理方法得到不 同的结果...做的是相对定量,SYBR Green, 选用2^(-...

喻诸疤4439如何分析real time PCR的数据结果 -
蔚兴急13183945420 ______ 学习做Realtime PCR, 实验结果是出来了,得到的内参、目的基因的Ct 值在15-25 之间,熔 融曲线基本上也是单峰,但不太会处理这个结果,对着数据发愁.不同的处理方法得到不 同的结果.做的是相对定量,SYBR Green, 选用2^(-△ △ Ct)法 ...

喻诸疤4439我想问一下荧光定量PCR法用2 - △△Ct计算相对定量的问题 -
蔚兴急13183945420 ______ 你一次实验做的数据,内参可以得到几个CT值,目的基因也会得到几个.这样的话,根据平均的CT值,就会得到一个倍数(相对量).实验肯定不会只做一次吧,至少重复3次以上.这样就会得到3个以上的倍数了.3个以上的数值就可以算均数和标准差了.

喻诸疤4439用SYBR Green - PCR做相对定量,加RNA量一致,那么所有内参的CT值是不是要求一致,至少相差不大? -
蔚兴急13183945420 ______ 理论上是越一致越好.如果有很大的差异,说明实验有较大的误差,或者样本有降解.

(编辑:自媒体)
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