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pcr可以二次扩增吗

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-26

阚顺艳1757各位高人,请问聚合酶链式反应(PCR),反应本身来说应该属于有机化学还是生物学? -
裘钧咽19313049968 ______ PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链.基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制. 不属于有机化学反应,属于分子生物学范畴

阚顺艳1757融合PCR的操作原理及注意事项 -
裘钧咽19313049968 ______ PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物. 实验操作注意事项 1、戴一次性手套,若不小心溅上反应液,立即更换手套. 2、使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸...

阚顺艳1757巢式pcr是什么意思?
裘钧咽19313049968 ______ 巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应.在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增.河南省公安医院肝病治疗中心肝病专家解释说,由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性.一般应用于动物方面.如:病毒,梅毒螺旋体,HIV,肿瘤基因等.

阚顺艳1757什么是潮试PCR??? -
裘钧咽19313049968 ______ 不是潮试而是巢式 巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR),使用两对(而非一对)PCR引物扩增完整的片段.第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似.第二对引物称为巢式引物(因为他们在第一次PCR扩增片段的内部)结合在第一次PCR产物内部,使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增.巢式PCR的好处在于,如果第一次扩增产生了错误片断,则第二次能在错误片段上进行引物配对并扩增的概率极低.因此,巢式PCR的扩增非常特异.http://baike.baidu.com/view/688277.htm 具体百度百科有

阚顺艳1757检测出有brca基因突变就一定要切除卵巢吗? -
裘钧咽19313049968 ______ 体检一定要查BRCA基因检测,预防卵巢癌就靠它了

阚顺艳1757pcr有时能得到产物,有时得不到,怎么办 -
裘钧咽19313049968 ______ cybegreen 会影响DNA分子的TM值4-8度,建议在常规PCR时也加入Cyb green 优化反应条件到看到特异条带为止,再用优化条件上real time PCR. 建议楼主,RG6000跑完了之后,去跑个凝胶电泳,如果有条带说明是机器程序没设好.

阚顺艳1757怎样通过巢式pcr提高扩增的灵敏度 -
裘钧咽19313049968 ______ 采用巢式PCR进行扩增,在多轮扩增结果中提高扩增特异性和灵敏度.与普通PCR不同的是,它采用两对引物进行扩增,首先用第一对引物普通PCR,然后将第一轮扩增的产物稀释100倍后用第二对引物(巢式引物)二次扩增.因此采用巢式PCR可以大大增加困难模板扩增的特异性和有限靶序列的灵敏度.

阚顺艳1757巢式PCR是什么? -
裘钧咽19313049968 ______ 巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR),使用两对(而非一对)PCR引物扩增完整的片段.第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似.第二对引物称为巢式引物(因为他们在第一次PCR扩增片段的内部)结合在第一次PCR产物内部,使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增. 巢式PCR通过两轮PCR反应,使用两套引物扩增特异性的DNA片断.第二对引物的功能是特异性的扩增位于首轮PCR产物内的一段DNA片断. 第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在内引物的存在下进行第二轮扩增.从而提高反应的特异性.

阚顺艳1757请问谁能具体解释一下巢式PCR法? -
裘钧咽19313049968 ______[答案] 就是多重PCR,第一次获得产物浓度不够,但循环数过多会造成产物质量不好,就会以第一次PCR产物为模板,设计内引物进行第二次扩增,获得高质量产物

(编辑:自媒体)
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