pcr引物计算公式

须虾芝2946你好,想问下q - PCR的产物Tm值为79度可以么?为什么其它他人都说要大于80度呢. -
乌蝶旭13948059805 ______ 大部分的定量PCR反应产物的片段长度在80~300bp左右,而80bp的TM值为80℃左右,所以绝大多数的定量产物都是大于80℃的.Tm值跟盐离子浓度、片段长度以及GC含量等因素有关系,所以不要太过拘泥于Tm值,建议你可以通过电泳-测序的方法来确认产物.

须虾芝2946PCR的原理是什么,它有什么用途? -
乌蝶旭13948059805 ______ PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA,然后才进行自动热循环,最后进行产物鉴定与分析.引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行,临床应用只需购买PCR检测试剂盒就可开展工作,PCR自动热循环...

须虾芝2946如何做成为PCR高手 -
乌蝶旭13948059805 ______ 1. 典型的引物18 到24 个核苷长.引物需要足够长,保证序列独特性,并降低序列存在于非目的序列位点的可能性.但是长度大于24 核苷的引物并不意味着更高的特异性.较长的序列可能会与错误配对序列杂交,降低了特异性,而且比短序列杂...

须虾芝2946操作基因扩增仪时需要注意的事项有哪些? -
乌蝶旭13948059805 ______ 基因扩增仪1. PCR引物设计:引物设计可能是PCR扩增成功最关键的因素.如引物设计欠佳,可能导致扩增产物不足,甚至扩增失败,其原因是设计欠佳的引物可导致非特异扩增和/或形成引物二聚体,此又成为PCR反应的竞争性产物,从而进...

须虾芝2946pcr扩增为什么需要两个引?pcr扩增为什么需要两个引物
乌蝶旭13948059805 ______ 不会脱落,因为引物的组分就是普通核酸,没必要让它再脱掉.PCR不像在生物体内一样,中没有那种降解酶H.要是有特殊要求的可能要脱.

须虾芝2946PCR的引物怎样设计,过程是怎样的?寻求详细答案.谢谢! -
乌蝶旭13948059805 ______ PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否. 要设计引物首先要找到DNA序列的保守区.同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构...

须虾芝2946pcr要加入什么原料是否需要RNA引物 -
乌蝶旭13948059805 ______[答案] 无明显同源性. 引物量: 每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会. 酶及其浓度 目前有两种Taq DNA聚合酶供应, 一种是从栖热...

须虾芝2946引物设计基本原则是什么? -
乌蝶旭13948059805 ______ 引物设计的原则和试验目的是相关的. 如果是为了检测某一个片段有没有,那么只要考虑特异性和片段好不好扩就行了.一般片段大小控制在500bp左右,上下游引物在57-57度退火温度,引物互补情...

须虾芝2946什么是梯度PCR? -
乌蝶旭13948059805 ______[答案] 对于一个PCR反应,虽然有各种各样的PCR仪引物设计软件或者经验公式计算最适的退火温度,可是由于模版中碱基的组合千变万化,对于特殊片断,经验公式得到的数据不一定能＂P＂出来结果,细微的变化对结果都可能产生决定性的影响,因而...

须虾芝2946有哪些条件可影响PCR反应 -
乌蝶旭13948059805 ______[答案] PCR反应条件为温度、时间和循环次数. 温度与时间的设置: 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点.在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至...