pcr循环数怎么确定

耿哗饶1174PCR复制n次,至少需要加入多少引物? -
宓瑞柔18175448964 ______ 10uM浓度的引物,加个1ul足矣.在PCR反应中,经过n次循环,理论上DNA链的数目扩增了2的n次方.PCR的一个循环,一个DNA模板被复制为2个DNA片段. PCR循环次数通常就是30左右.循环数太多了,虽然在一定程度上能够提高产物量...

耿哗饶1174PCR循环次数能超过40次吗 -
宓瑞柔18175448964 ______ 可以的,一些模板浓度极低的样品,或者大片段扩增,为了获得足够的产物,有时候会超过40个循环.也有一些特殊的PCR,如染色体步移中的扩增,要扩增超过40个循环.

耿哗饶1174用于扩增子测序的pcr扩增一般采用多少循环数 -
宓瑞柔18175448964 ______ 没有规定,只要目的条带清晰可见就行,可以根据预实验来确定.过多的循环数会导致碱基错配,过少循环导致产物太少不利于测序.

耿哗饶1174如果将PCR反应设置为循环30次,则可以得到的DNA片段的量是原来DNA片段数量的多? -
宓瑞柔18175448964 ______ 这是一个天文数字二的30次方2113.实在是很难直接表示清楚5261.但是PCR的时候通常使用21次到410223次循环就足够了.因为23次以后1653得到的片段是原来的一千万倍.在这个基础上再加上二内的十次方才是你容所说的.30次循环.

耿哗饶1174pcr可以超过35个循环吗 -
宓瑞柔18175448964 ______ 一般来说,PCR可以进行超过35个循环的扩增.但是,随着PCR的进行次数增加,PCR反应的效率会逐渐降低,PCR扩增的特异性和准确性也会降低,同时还容易引起非特异性扩增.因此,一般情况下,PCR的扩增次数不宜超过40个循环,具体的扩增次数最好根据实验设计和反应特性来调整和选择.此外,也可以使用一些PCR优化技术(如增加模板DNA浓度、优化引物和试剂浓度、使用热启动酶等),来提高PCR反应的效率和特异性,从而在较少次数的PCR循环中得到对应的扩增产物.

耿哗饶1174PCR注意哪些细微操作? -
宓瑞柔18175448964 ______ 1.引物的设计是否合适:一对引物的Tm值最好比较接近,引物错配,形成茎环尽可能少;2.模板的浓度要合适,具体的浓度数值在分子克隆上有(我记不清了),基因组,质粒或是RT产物;3.最好有个正对照组和负对照组,监测你的PCR体系是...

耿哗饶1174PCR循环条件指的什么 -
宓瑞柔18175448964 ______ PCR分三步:变性、退火和延伸.PCR循环条件就是指这三步每一步的温度和时间.

耿哗饶1174实时荧光定量PCR的结果该怎样分析? -
宓瑞柔18175448964 ______ 1、如果有标准曲线,按照标准曲线计算; 2、一般都是相对量,则用delta delta CT方法来计算; 3、引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性; 4、模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起; 5、看CT值是分析...