pcr扩增体系
“红管管，白签签，大家一起做核酸。”在群众眼中，核酸检测很简单，只有两步：扫码采样和查询报告。但事实上，这在常人眼中看似简单的两步背后，却凝聚着核酸检测人员不为人知的辛苦付出。今天，我们就来一起探访宁津县人民医院检验科PCR实验室，带大家了解核酸检测人员的工作。
核酸检测人员是抗疫战中的排雷兵，每天与新冠病毒正面 “交锋”。进入实验室之前，他们必须全身“武装”，N95口罩、防护服、护目镜、防护面屏、双层手套、防水靴套等用品的穿戴必须执行严格要求，容不得一丝马虎。
“实验室里检验人员每天要不断重复着样本核对签收、样本灭活、手工加样、核酸提取、上机扩增、结果分析、出具结果报告等多个步骤，整个过程环环相扣，都只能纯手工操作，一个动作甚至需要重复上千次。”宁津县人民医院检验科检验技师武雅茹说。
只要进入实验室，检验人员不喝水、不进食、不如厕，一直坚持到检验完成。加上防护服密不透风，工作时间又长，每轮实验下来，都是对检验师体力和意志力的双重考验。
在PCR实验室，这个被称为“距离病毒最近的地方”，一份份核酸检测结果从这里出来。这里有一群抗疫“幕后无名英雄”，核酸检测实验室是他们的战场，他们默默地坚守着自己的岗位，履行着自己的职责和使命。
宁津县人民医院检验科主任陈春杰说：“我们检验科下设6个分组，包括分子组（PCR实验室）、临检组、生化组、免疫组、微生物组、艾滋病筛查组，总共有26名工作人员，其中PCR实验室6人，分为两班，白班和夜班，每个班次12个小时，这次核酸检测我们负责检测部分乡镇送来的核酸样本以及本院的医务人员和患者、陪人样本，愿检尽检样本，院外环境、重点场所环境样本，承接德城区样本，最高的时候一次接收达到4000多管。标本量多的时候，检验科全体人员24小时在岗在位，随时调整工作班次，科室还抽调了5人外出支援，所以很多时候都是其他小组做完日常检测工作后紧接着就去PCR实验室，中间只有30分钟吃饭时间。但我们不是在孤单奋斗，在医院和输血科、病理科等兄弟科室的大力支持下，我们确保了核酸结果及时准确地发出。8月28日以来，共检测核酸样本8000多管，共计17万人次。”
在宁津县人民医院核酸检测实验室，有三个功能分区，一区负责试剂的准备和实验耗材，二区负责接收标本、拆包、排板、编号、加样、扫码等，三区是扩增分析区。核酸检测的每一步都需要人工操作。从开箱拿出采样管，到核酸提取、体系配置、扩增检测、结果分析等，每个看起来有条不紊的操作程序背后，都充满了高度风险。检验师杨璐瑶与同事们穿着白色防护服，和病毒面对面、“零距离”接触，小心翼翼，全力筑牢生命安全防护线。
杨璐瑶：“穿上防护服的那一刻，就会有一份责任，就是这份责任让我们认真对待每一份标本，将标本精准高效地检测出来。”
一份“阴性”的核酸检测报告，是老百姓心中的一颗定心丸，更是宁津县打赢疫情防控的最大动力。一份份样本、一组组数据，筑起一道道病毒“防火墙”，宁津县人民医院马力全开单日最高检验核酸数可达6.4万人，用无畏姿态诠释了宁医人的担当！ （陈伟伟）
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莘急凡4574怎么判断PCR用哪个反应体系 -
厉败滕13175698150 ______ 楼上说的挺有道理,一般pcr反应体系的大小根据扩增的目的来确定,如果扩增后的产物还要用于后续的实验的话就要加大反应体系,50ul或者小体系25多做几管;如果仅仅是为了检测目的条带的话就可以做小体系的如10ul;体系内部的成分按比例变化就可以了
莘急凡4574反应体系是什么?有益吗?
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莘急凡4574什么是25微升PCR反应体系? -
厉败滕13175698150 ______ PCR体系就是指一定比例的PCR要素(水、引物、酶、镁、dNTP、模板)的混合物.常用的体系有10微升、20微升、25微升、50微升等.通常小体系用于检测、分析,而大体系用于回收PCR产物.但是要...
莘急凡4574基因扩增的基因扩增 - PCR技术 -
厉败滕13175698150 ______ 多聚酶链式反应的原理类似于DNA的天然复制过程.在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增2n倍. 1.变性:加热使模板DNA在高温下(94℃)变性,双链间的氢键断裂而形...
莘急凡4574PCR单轮扩增反应是如何呢?
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莘急凡4574哪位能介绍一下PCR反应体系啊?请大家介绍一些生物方面的论坛
厉败滕13175698150 ______ 这方面的知识可以到生物帮上那里了解啊,那拥有覆盖所有实验领域的精品技术文件,图文并茂的提供生物领域的学科知识、实验技术方法与技巧等,那里会有介绍. 标准的PCR反应体系: 10*扩增缓冲液10ul 4种dNTP混合物各200umol/L 引物...
莘急凡4574如果扩增一个2000 bp的DNA片段.pcr的反应体系是什么? -
厉败滕13175698150 ______ 这个反应体系一般根据你的mix性能,引物Tm值,以及扩增的片段长度而定.光看基因长度不行吗,因为我不知道你用的酶的扩增效率.
莘急凡4574PCR扩增1000bp左右的产物反应体系和温度一般怎样设定?
厉败滕13175698150 ______ 反应体系要看你引物和模板的量、性状,一般反应总体积为25微升的话,引物各1微升,10*buffer 2.5微升即可,DNA聚合酶参照其说明书加量,一般0.3-0.5微升. 循环参数:94°变性30-45s足够,72°延伸也可设45s-1min,复性温度很关键,要看引物的特性(G+C%、是否容易形成发卡、二聚体等)和特异性(与模板DNA的同源性)等,一般在50°左右. 此外,要根据出带与否以及带的亮度、性状(sharp与否)不断调整退火温度和Mg的浓度.
莘急凡4574关于生物学实验PCR扩增
厉败滕13175698150 ______ 这有这样的几种可能:1. 体系已经被污染.本人做实验时曾遇到不加模板结果也能扩增出来的情况.这往往是由于实验室环境控制的问题.2. 有可能她们使用的是Mixture.目前实验中许多厂商为了方便实验会生产Mixture,除了引物和模板都已...
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厉败滕13175698150 ______ 基因的PCR扩增技术原理类似于DNA的变性和复制过程,即将待扩增的DNA片段和与其两侧互补的两段寡聚核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后DNA扩增倍数可达2的n次方 倍. PCR反应的基本成分包括:模板DNA(待扩增DNA)...