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pcr条带图解

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-24

智通财经APP讯,凯普生物(300639.SZ)公告,公司全资子公司潮州凯普生物化学有限公司取得国家药品监督管理局批准的《医疗器械变更注册(备案)文件(体外诊断试剂)》。公司“高危型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)”率先获批增加宫颈癌初筛、宫颈癌联合筛查和ASC-US人群分流预期用途。

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方尹瑾2270最近做菌液pcr条带弥散,也看不见目的条带,求解 -
方荆詹13291168142 ______ 由图可见该结果,因为你的PCR条件的退火温度从高到低均有条带出现,所以最有可能是 1. 引物特异性较差引起的; 2. 挑取的不是你的目的菌株,是别的杂菌,所以测不出来; 3. 可能在你培养菌过程中染菌(污染)了

方尹瑾2270DNA酶切后电泳,条带呈复带的原因 -
方荆詹13291168142 ______ 你酶切的DNA是什么?质粒的话,双酶切中间有几十bp以上,切出来的条带就是两条,这个你应该能判断的.如果是pcr产物酶切出现了两条极近的带,那么很有可能是因为pcr产物纯化时有杂带污染,一开始跑胶的时候看不出来,后来你回收浓缩再加上酶切,再跑电泳的时候就出现了两条极近的带.其实将这两条带回收(上面那条是目的条带的可能性要大些),进行连接,只要操作和实验条件好的话,菌落的阳性率也挺高的,因为是双酶切连接.

方尹瑾2270PCR ISSR 条带很少,而且不清楚 -
方荆詹13291168142 ______ 因为你PCR扩增出来的量不够,所以其他条带都看不清了.从图里看,你的PCR条带都还比较一致,说明引物还好.建议你改一下PCR的条件和体系,可以做一个梯度试试.可以改的条件包括PCR结合阶段的温度(做一个温度梯度),延长阶段的时间,PCR循环数(可以加大到32),PCR体系的Mg离子浓度,模板量等等.

方尹瑾2270pcr反应电泳图上条带的强度说明什么
方荆詹13291168142 ______ 在电泳的时候加上DNA的分子量marker,一般16S的大小都是1.5 kb吧(很久不做了,记不太清楚).如果有明显的目的条带而且大小也合适的话那就一般不会错,如果...

方尹瑾2270pcr产物条带的问题 -
方荆詹13291168142 ______ 首先别以为步骤和你老师一样实际就一样了,加样的时候新手把试剂加多加少的事情很正常,比如加1微升的引物,操作不好的人仅仅粘附在枪头上的试剂就有两微升. EB温度控制不好就不要预先加,我都是跑完胶后再EB染色的,这样操作的时候也安全得多.胶的形状不好可能胶没有完全凝固,你倒完胶过个几个小时再用也没关系,保证完全凝固就行.

方尹瑾2270如何分析DNA经PCR扩增后的图谱? -
方荆詹13291168142 ______ 首先得需要确定你的目的扩增片段的大小,然后根据marker指示位置确认

方尹瑾2270PCR中,PCV2的引物扩增后,跑电泳的条带在多少bp? -
方荆詹13291168142 ______ 用dl2000marker的话,在750bp(从上往下第三条带)和1000bp(第四条带)之间,

方尹瑾2270这是我刚跑出来的pcr图片,看不懂啊,请大仙指教 跪求 -
方荆詹13291168142 ______ 你那对照是什么对照啊?阳性还是阴性? 你的目的片段大小应该是多少?现在这个marker图谱上,最后一条带是多少? 如果抛开对照不看,只看挨着marker的两条带,会让人觉得是引物二聚体,没有特异扩增. 但是如果说后面两个是阳性对照的话,可能你需要看看,调整下实验条件,例如减少模板的用量,并且设立阴性对照,即不含模板的反应管,其他都完全相同,这样根据阴性对照,你就可以判断,这些条带是因为加入了模板才扩增出来的,还是加不加都有的.如果加不加都有,再找原因吧.

方尹瑾2270求助PCR产物条带分析 -
方荆詹13291168142 ______ 看溴酚蓝的位置在很上面,说明条带分子量很小,电泳电压低,导致样品弥散,条带我怀疑是引物二聚体,而非目的条带.建议先跑touchdown,确定引物能够跑出来,再慢慢摸索具体的温度.

方尹瑾2270PCR跑出的条带与目的条带不同怎么办 -
方荆詹13291168142 ______ 存在两种可能性,第一,引物设计错误,可以将引物和参考序列进行拼接后看看能不能顺利拼接,以及拼接之后的目的片段长度;第二,可能是非特异扩增,这个时侯如果确定引物位置没有问题,可以调整退火温度,以及PCR体系内的各种物质浓度,看看能不能得到目的条带;如果反复试验都无法得到目的片段,那么就说明您的引物在基因组上可能存在2个或2个以上的结合位点,以至于无法得到合格的目的片段,这个时候就只能重新设计引物了.一般重新设计引物都能解决扩增问题的,祝好运

(编辑:自媒体)
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