pcr过程引物的计算

却淑冠3656pcr 一段2000多bp的基因 引物设计 -
巫废显13052606111 ______ 目标产物的长度一般和引物设计关系不大.设计的时候,应注意如下要点: 1. 引物的长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于Taq DNA聚合酶进行反应[2]. 2. 引物序列在模板内应...

却淑冠3656荧光定量PCR的引物如何设计.. -
巫废显13052606111 ______ 如果你测定的基因序列未知,可以用同源基因或者别的物种的同类基因序列来设计引物,进行PCR,看看是否能够扩增出产物,并对产物进行确认,判断扩增的特异性. 如果确认无误,就可以进行荧光定量PCR.

却淑冠3656求助miRNA QRT - PCR引物设计 -
巫废显13052606111 ______ miRNA引物设计(茎环法+染料法检测) 设计方法:通用茎环后端加miRNA后面6个碱基的反向互补序列为反转录引物,正向引物为miRNA去除后面6个碱基的序列,反向引物在茎环上.反转录茎环通用序列:...

却淑冠3656PCR当中两个引物分别是怎么样的?具体详细的说一下.是怎么设计的?两个引物的关系以及在PCR中起的作用. -
巫废显13052606111 ______ PCR扩增的引物分上下游引物(或Sense primer, anti-sense primer), PCR 所扩增的片段就是上下游引物在DNA链上所截取的片段.上游引物与模板5'端序列相同,下游引物与模板3'端序列反向互补.一般引物序列长度为18~25碱基.primer5 来设计.两引物共同确定PCR扩增的产物的大小及位置.

却淑冠3656如何设计sybrgreen法荧光定量pcr引物 -
巫废显13052606111 ______ 引物 荧光定量PCR 是利用荧光定量PCR 仪(如ABI 7500、stepone、ROChe LightCycler、Bio-Rad CFX96 等)通过实时追踪 PCR 每一步循环的荧光信号 值来达到对起始模板量的定量分析.一次成功的荧光定量 PCR 反应除了需要稳 定的仪器...

却淑冠3656荧光定量PCR引物设计 -
巫废显13052606111 ______ 完全可以,PCR长度从50bp到数百都可以,不止局限于150-300个碱基对.楼上说的有道理,但是有一点要注意,最好计算一下扩增片段的Tm值,这样做溶解曲线的时候,光有一个峰还不够,而且得到的TM和你计算的Tm相吻合才行.是否在翻译区没有影响.

却淑冠3656如何设计pcr,以及它的要求是是什么 -
巫废显13052606111 ______ 设计的目的是在两个目标间取得平衡:扩增特异性和扩增效率.引物分析软件将试图通过使用每一引物设计变化的预定值在这两个目标间取得平衡.设计引用有一些需要注意的基本原理: ① 引物长度 一般引物长度为18~30碱基.总的说来,决定引...

却淑冠3656PCR中引物是怎么结合到模板链上的? -
巫废显13052606111 ______ PCR过程基本为变性,退火,延伸;温度高时,DNA变性,双链解开;温度降低,引物与DNA结合(温度降低时,DNA链复性,单链变双链,引物过量,DNA与引物通过碱基互补配对原则识别结合),之后在taq酶作用下进行延伸.

却淑冠3656质粒PCR原理不懂质粒pcr的详细过程及原理是怎样的 从设计引物开始 麻烦分布介绍一下 以及每一步的结果 求大神指教了 -
巫废显13052606111 ______[答案] 引物是可以设计在目的序列两端的,引物可以就是目的序列的一部分,当然还可以根据具体情况引入酶切位点、突变等等,最主要看你的实验设计是怎么要求的了.

却淑冠3656PCR时引物的概念包括加进去的酶切位点和保护碱基嘛?算进引物的长度吗?一块分析嘛?我设计的下游引物只有15个碱基,但primer5上的长度18个,如果... -
巫废显13052606111 ______[答案] 15个碱基有点少,可能特异性不够高.我一般设计20个左右,加上酶切位点和保护碱基就快30了.