qpcr内参gapdh+ct范围

滑楠炕5191qpcr怎么来检测microrna -
吴建览13777611747 ______ 提RNA你会吧... 反转录你会吧...如果只是检测一般的mRNA的表达量 就用poly T反转录就可以了 如果是特殊的必须去另外合成特异引物 如果你想得到确切的浓度值 那必须在做RT的时候检测一个标准品 就是这里面东西的浓度你是确切知道的 然后做一条标准品曲线 然后拿你要检测的那个得到的值带到那个曲线里面就算出浓度了 大部分时候都是检测相对含量 就是这个mRNA在不同东西里面的比较 那就不用做标准品曲线 直接把得到的几个值比较下关系就可以了 大部分检测用的内参都是GAPDH 其他还有U6 U7可选

滑楠炕5191qPCR数据中对照组在表格中标准差怎么计算 -
吴建览13777611747 ______ 3. Real-time qPCR定量方法 可以分为绝对定量和相对定量.绝对定量是用一系列已知浓度的标准品制作标准曲线,在相同的条件下目的基因测得的荧光信号量同标准曲线进行比较,从而得到目的基因的量.该标准品可以是纯化的质粒DNA,体...

滑楠炕5191做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 -
吴建览13777611747 ______ 内参就是在cDNA里面的啊 比如你有三种反转录的cDNA 就分别用内参的引物做三组 和目标基因一起做就行了 不过是要单独加 不是和目标基因的引物加在一个孔里

滑楠炕5191做WB时GAPDH可以用作核蛋白内参吗 -
吴建览13777611747 ______ 可以

滑楠炕5191荧光定量的某个组织内参曲线峰偏了是什么原因?其他组织的峰单一,只有一个组织的内参GAPDH单峰偏了,. -
吴建览13777611747 ______ 溶解曲线不止一个主峰1、引物设计不佳:避免二聚体和发夹结构的出现;2、引物浓度不佳:适当调整引物浓度;3、退火温度低:提高退火温度;4、镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度;5、模板中有基因组的污染:通过引物设计避免非特异扩增.

滑楠炕5191请帮忙解释一下,PCR,RT - PCR,GAPDH.real time之间的联系. -
吴建览13777611747 ______ 看来是做RT-PCR的, PCR是聚合酶链式反应,也就是体外特异性扩增DNA片段,是所有PCR技术的基础; RT-PCR有2种理解,即反转录RCR(reverse transcription PCR,以RNA为模板扩增DNA)或实时PCR(real time PCR),很显然,您指的...

滑楠炕5191荧光pcr相对定量的俩个标准曲线所用的标准品都是什么 -
吴建览13777611747 ______ 一个是你目的基因(P53,),一个是内参(GAPDH,ACTIN等)

滑楠炕5191求助选择什么作为内参 -
吴建览13777611747 ______ 搞不太清楚你想说什么.内参抗体一般选择 β-actin,GAPDH.hsp90也OK.一般内参抗体都是鼠源的埃既然一抗是鼠源,二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解埃

滑楠炕5191RT - PCR数据分析 -
吴建览13777611747 ______ 需要样本间平行比较.目的基因/GAPDH比值越大,说明目的基因表达量越高.比如1号样本目的基因/GAPDH比值等于0.5;2号样本目的基因/GAPDH比值等于0.8;那就说明2号样本中目的基因的表达量比1号样本高.

滑楠炕5191RT - PCR中内参蛋白GAPDH和b - actin人和小鼠的可以用同一对引物吗? -
吴建览13777611747 ______ 要回答这个问题必须看你引物的序列.你贴出来我帮你查一下,你自己也可以BLAST一下.如果在人和鼠的基因中都可以BLAST到,则可以用,否则就不可以. 虽然这些House Keeper基因的同源性很高,如果引物不在同源区,还是没办法混用的.