qpcr扩增效率怎么算

江罡素895实时荧光定量PCR的结果该怎样分析? -
芮巩淑18359553141 ______ 1、如果有标准曲线,按照标准曲线计算; 2、一般都是相对量,则用delta delta CT方法来计算; 3、引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性; 4、模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起; 5、看CT值是分析...

江罡素895PCR的原理是什么? -
芮巩淑18359553141 ______ PCR技术基本原理 PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板...

江罡素895实时荧光定量PCR扩增效率低怎么办 -
芮巩淑18359553141 ______ 引物和探针设计不当 为了最高效地设计用于实时荧光定量PCR的引物和探针,我们强烈建议您使用引物设计软件.大多数引物设计程序均包含了可调节的参数以设计最佳的引物和探针.这些参数涉及了引物/探针的Tm值、互补性、二级结构以及...

江罡素895PCR扩增效率与什么有关(扩增效率,澹醮 -
芮巩淑18359553141 ______ 主要考虑是否在模板稀释过程中出现问题,是否存在高浓度样品污染低浓度样品的情况.具体的要看了你的扩增曲线、溶解曲线以及标准曲线的结果才能判断.其次题主提到的两个问题1、模板浓度过高会抑制PCR反应,可能会导致扩增效率降低.但同时可能会出现非特异性扩增导致结果的Ct值不可信,最终导致扩增效率不可信.2、在一定范围内提高退火温度不会太影响扩增效率.

江罡素895老师,我想做标准曲线验证一下扩增效率,知道rna的浓度,怎么换算成拷贝数,有人说起码要知道bp数, -
芮巩淑18359553141 ______ 你这个情况不需要知道拷贝数目.把样品等比例稀释,比如1:4,或者1:10. 至少做4-5个点.PCR后按照相对浓度和扩增的Ct值做曲线,就可以得到扩增效率了. 如果要知道拷贝数目,必须有已知浓度的含有该序列的质粒来作为批准品做标准曲线.

江罡素895PCR的原理是什么 -
芮巩淑18359553141 ______[答案] 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术.它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至...

江罡素895如何调整实验条件优化qPCR的效率 -
芮巩淑18359553141 ______ 1、尽量少写 多层的for嵌套,影响效率.2、用memcache或者其他缓存技术,将常用的 数据字典数据缓存到内存中,也可以缓存到文本文件中,节省数据库连接数量及数据库的资源.3、尽可能少的去连接数据库,减少连接数量.4、数据库查询,少用select * ,建议用 select 字段1、字段2...还有很多...

江罡素895“双细则”是什么意思?
芮巩淑18359553141 ______ 所谓相对定量是指在测定目的基因的同时测定某一内源性管家基因,该管家基因的作... 这一方法要求外参、目的基因和管家基因的扩增效率一致. 标准曲线方法使用标准 ...

江罡素895电脑启动设置F1到F9按哪个
芮巩淑18359553141 ______ 演示机型:华为MateBook X系统版本:win10以华为MateBook X,win10为例:F1.电脑启动设置主要是因为BIOS中设置与真实硬件数据不符引起,可以分为以下几种情况:1、实际上没有软驱或者软驱坏了,而BIOS里却设置有软驱,就导致要按F1才能继续.2、原来挂了两个硬盘,在BIOS中设置成了双硬盘,后来拿掉其中一个的时候却忘记将BIOS设置改回来,也会出现这个问题.3、主板电池没有电了也会造成数据丢失从而出现这个故障.4、重新启动系统,进入BIOS设置中,发现软驱设置为1.44M了,但实际上机箱内并无软驱,将此项设置为NONE后,故障排除.

江罡素895关于RT - PCR扩增效率的问题初做RT - PCR,仪器会自动给出吗?我们用的Agilent Mx3000P,好像没有给出这个值,我要怎么得知这个值? -
芮巩淑18359553141 ______[答案] 做标准曲线时才有扩增效率,在仪器设定的时候选择标曲制作.