qpcr+ct值过大

古浩和1193qpcr提高引物的浓度,扩增效率怎么变 -
项祁郑15758038655 ______ qpcr提高引物的浓度,扩增效率怎么变 Ct= -k lgX0+ b(线性方程)用这个方程可以通过Ct值算出样品的起始浓度 斜率=-1/lg(1+e) 扩增效率E=1, 斜率=-3.32 扩增效率范围:90%-110% 斜率范围:-3.1和-3.59之间 △△Ct这是相对荧光定量的一个计算公式的简化形式,用于比较不同样品之间的差.

古浩和1193ct值是什么意思 深入解析PCR检测中的关键参数ct值? -
项祁郑15758038655 ______ 总之,ct值是PCR检测中的一个关键参数,可以用来判断样本中目标基因的数量.在实际应用中,需要对PCR反应的效率进行校准,以保证检测结果的准确性.颤裂PCR技术是一种基于DNA扩增的方隐洞仿法,可用于检测病原体、基因突变、...

古浩和1193做荧光定量PCR时,△△Ct值是什么意思,它的计算公式是什么 -
项祁郑15758038655 ______ △△Ct = △Ct(试验样品) — △Ct(基准样品) △Ct(试验样品) = Ct(试验样品,目的基因) — Ct(试验样品,内参基因) △Ct(基准样品) = Ct(基准样品,目的基因) — Ct(基准样品,内参基因) 2 -△△Ct =2 -(-1.2)= 2.30

古浩和1193做定量PCR之前需不需要检测RNA的完整性 -
项祁郑15758038655 ______ 不需要,如果是做cDNA文库就要检测RNA的完整性.PCR只是扩增一个片段.追问:只是有些时候扩的ct值太大,不知道是基因表达少还是降解了.我提的肿瘤标本的,以前在细胞株上做内参的CT值是15左右,现在提的组织标本内参的CT值都25...

古浩和1193荧光定量PCR结果CT值输出问题
项祁郑15758038655 ______ 当然是有CT,机器设了阈值而已.除非阴性的样本本来就没有扩增.

古浩和1193荧光定量基因拷贝数低和酶或引物有关系么 -
项祁郑15758038655 ______ 没有阳性对照吗?如果内参的CT值不正常,那么很可能是你的qPCR体系的问题.内参正常的话,就有可能是引物或者目的基因丰度太低的原因了.引物的话,我们用的试剂盒推荐的浓度是25nM-900nM,是一个很广的范围了,我们自己也试过几个浓度,都可以.所以引物浓度并不是主要的问题,做做普通PCR看看能不能P出来,条带有多亮.

古浩和1193如何确定引物二聚体和扩增产物的Tm值? -
项祁郑15758038655 ______[答案] 最近在做qPCR,今天遇到个样品的浓度很低,想看看能不能做出样品10倍梯度稀释的曲线,于是照常做了. 结果最后的溶解曲线发现,头三个的Tm是84,之后的5个样品时77.从Ct值来看,也是头三个还有点像样,后面的Ct都是33-34. 很显然后面的...

古浩和1193q pcr中用水做对照,Ct值达不到35怎么办 -
项祁郑15758038655 ______ 是的,只要实验组的CT值比空白对照的小5,那这个CT值就是可信的

古浩和1193做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 -
项祁郑15758038655 ______[答案] 你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来. 常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值 但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,...