rtpcr和实时荧光pcr区别

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rtpcr和实时荧光pcr区别

来源：baiyundou.net 日期：2024-09-25

本文转自：人民日报客户端

琼达卓嘎

近日，西藏高原医学研究所PCR实验室与西藏自治区人民医院病理科共同完成RT-PCR预实验和甲状腺肿瘤BRAF分子诊断。这标志着该院病理分子检测能力迈上分子诊断的新台阶，将进一步为肿瘤诊断，临床分级及预后，靶向药物精准治疗指导提供更坚实的保障。

分子诊断是当代医学发展的前沿领域，而PCR实验室（基因扩增检验实验室）则是开展分子诊断的重要基础设施。西藏自治区人民医院PCR实验室拥有罗氏COBAS 4800全自动核酸提取与荧光定量PCR系统等一批先进设备，能够保证实验的准确性和质量控制。随着PCR实验室通过技术审核，PCR技术的应用将推动遗传病基因诊断、肿瘤相关突变分析、个性化治疗、个性化用药、疾病预防等方面的进一步发展。

据介绍，BRAF为原癌基因，位于7q34染色体上，该基因的V600E（T1799A）点突变与多种肿瘤的发生有关，最常见于甲状腺乳头状癌和皮肤黑色素瘤，也见于结直肠癌、卵巢癌、乳腺癌和肺癌。乳头状癌约占所有甲状腺癌的85%以上。2023年7月，西藏自治区人民医院病理科已经开展的甲状腺乳头状癌B-raf检测。此外，检测BRAF V600E突变还具有提高诊断准确率、影响手术方案制定与碘-131治疗前评估、诊断毛细胞白血病，指导恶性黑色素瘤的靶向治疗，判断结直肠癌等恶性肿瘤的预后等重要临床意义。

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宓重详1158谁能帮我问清RT - PCR,Real time - PCR和Real time RT - PCR? -
扶申奚18488524193 ______ Real-time PCR中文译作“实时聚合酶链反应”,是一种最新发展的定量PCR技术.该技术借助于荧光信号来检测PCR产物,一方面提高了灵敏度,另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据,建立实时扩增曲线,准确地确定CT值,...

宓重详1158麻烦大家帮帮我,PCR里面逆转录反应液中这些都代表什么都是什么意思啊 -
扶申奚18488524193 ______ 5*prime script buffer 这个代表你给扩增的DNA一个反应环境,Prime script RT Enzyme mix 这个是原料混合液,就是组成DNA所需的A T C G,RNase Free H2O 这个是RBA酶不含水.Total RNA这个是你要扩增的目的基因.

宓重详1158PCR扩增仪与实时荧光PCR仪有何区别? -
扶申奚18488524193 ______ 用我自己的话说,就是PCR扩增仪是普通的PCR反应,反应后产物一般通过电泳查看结果.实时荧光PCR即real-time PCR,是在反应体系中加入目的基因的探针,PCR过程中,根据目标基因的表达量多少,探针可发荧光,RT-PCR仪通过检测...

宓重详1158RTPCR的目的是什么?如果只想检测目的mRNA的量,还需做RTPCR吗? -
扶申奚18488524193 ______ RT-PCR,就是先把RNA反转录为cDNA,再PCR扩增. 如果只想检测某个基因mRNA的量,可以做northern blot, 或者定量RT-PCR(荧光实时PCR)

宓重详1158荧光定量PCR RT - PCR荧光定量PCR和RT - PCR是一回事吗?若不是,它们之间有什么区别?谢谢! -
扶申奚18488524193 ______[答案] RT可能含义: reverse transcribe 是逆转录,那么相应pcr应该是由rna凡转录cdna过程 real time 实时定量那么就是荧光定量pcr了

宓重详1158禽流感的实验室诊断方法有哪些?
扶申奚18488524193 ______ 由于该病的症状变化较大且无典型性,所以确诊需要实验室方法进行,诊断方法主要... RT-PCR技术又分为常规、巢式、荧光、多元PCR和PCR- RFLP、荧光定MRT-PCR...

宓重详1158我还想请教一下哦,就是我的RTPCR,为什么不同的反转录的模板跑PCR,实验组和对照组的趋势每次会不同? -
扶申奚18488524193 ______ 同一模板是技术重复,看来不应该是仪器问题,而生物学重复性不好,这是RT常见问题,尤其是RT-qPCR,涉及的环节很多,需要逐步检查和设置对照; 样品处理控制,如细胞培养的处理组和对照组是否严谨; 细胞计数是否准确; 考虑好是一步法RT-PCR还是两步法; RNA提取(最可能出问题的),是否污染、及时、降解;RNA降解很快,很容易受到RNASE污染,务必注意; RNA提取后,每次做电泳和紫外,比较重复性是否好; pcr时,设置内参、阳性、阴性对照,做好标准曲线. 个人见解,目前想到的就这么多,欢迎继续讨论,祝实验顺利!

宓重详1158PCR和RT - PCR的区别与联系 -
扶申奚18488524193 ______[答案] PCR这里是指常规的PCR吧?就是以DNA为模板,dNTP为原料,在Taq DNA聚合酶的作用下,扩增DNA.RT-PCR即Reverse transcription-PCR,顾名思义就是讲mRNA通过反转录成第一链cDNA后,以第一链cDNA为模板进行PCR.

宓重详1158rt - pcr的值为什么意思 -
扶申奚18488524193 ______ 阈值指指数增长期荧光信号的临界值,一般PCR仪会自动给出阈值,而CT指就是扩增曲线达到阈值时的循环圈数.

宓重详1158实时荧光PCR和高通量PCR是同一意思么
扶申奚18488524193 ______ 不是,荧光定量PCR,是指在PCR的时候加入了与荧光型号连接的DNA探针,可以与目的基因特定的结合,在PCR合成双链DNA的过程中可以发出荧光型号,可以定性和定量的检测目的基因.高通量PCR也叫第二代PCR或者是第三代PCR,主要是能过快速大量的同时进行测序PCR.

（编辑：自媒体）