sirna和反义rna

2023年欧洲肝脏年会上（EASL2023），美国临床阶段生物制药公司（Aligos Therapeutics）研究人员介绍了另一项与小干扰RNA（siRNA）ALG-125755药物开发最新进展，即ALG-125755（一种GalNAc结合的siRNA）在小鼠肝脏中的药效学持久性与总siRNA和RNA诱导复合物（RISC）结合siRNA的相关性。

本研究来源Aligos公司，EASL2023

研究人员介绍，实现功能性治愈慢性乙型肝炎需要乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的持续消失。靶向小干扰RNAs（siRNAs）最近已在临床上证明可显著降低HBsAg。ALG-125755是一种新型N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）结合的siRNA，目前正处于临床开发阶段。

本研究展示了其作用机制，并在腺相关病毒（AAV）-HBV小鼠疗效模型中，将其与小鼠肝脏中的总siRNA和RNA诱导沉默复合物（RISC）结合的siRNA的持久药效学相关联。

为了证实ALG-125755的作用机制，研究人员使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对反义链（AS）ALG-125736诱导的目标S区HBVRNA序列的argonaute-2（AGO-2）降解进行了定性测量。在此前报道的腺相关病毒(AAV)-HBV小鼠疗效研究中，对采集的肝脏中进行了总siRNA和RISC结合siRNA定量，单次给药10 毫克/千克或每隔一周(Q2W)或每四周(Q4W) 5毫克/毫克重复给药长达70天，血清HBsAg均有显著而持久下降。

采用液相色谱-高分辨精确质量法分析单剂量组和重复剂量组的肝脏样本（给药前14、28、70天，给药后98和168天）以检测总siRNA，用免疫沉淀/反转录-定量聚合酶链反应法检测RISC结合的siRNA。

与HBV RNA序列S区高度互补的ALG-125736，可诱导AGO-2从HBV的S区裂解目标RNA序列。在AAV-HBV小鼠体内和体外均证实了ALG-125755与AGO-2蛋白的结合。在AAV-HBV小鼠体内单次给药后，RISC结合siRNA的半衰期（23.5天）是肝脏总siRNA半衰期（11.7天）的两倍。

重复Q2W给药后，RISC结合siRNA的动力学与总siRNA相似。重复给药后，RISC结合的siRNA浓度可保持稳定。RISC结合的siRNA可在重复给药（Q2W方案）的最后研究第168天和单次给药后的第98天均可定量。HBsAg下降的持久性与总的siRNA和RISC结合的siRNA一致。

该研究结果表明，在体外和体内模型中均证实ALG-125755与AGO-2的结合，ALG-125755的作用机制与siRNA的作用机制一致。在小鼠肝脏中，HBsAg降低的药效学反应和持久性与总siRNA和RISC结合的siRNA相关。RISC结合siRNA的半衰期较长，这表明在人体给药频率可少于每月一次的给药频率。

小番健康结语：这项研究重在说明，在AAV-HBV小鼠模型中，ALG-125755被证实与argonaute-2 (AGO-2)结合，也证实了ALG-125755作用机制和小干扰RNA的作用机制是一致的。HBsAg降低和持久性的药效学反应与小鼠肝脏中siRNA总量和RNA诱导复合物(RISC)结合的siRNA相关。本研究是由Aligos公司Kusum Gupta教授在本届大会上报告的。

鄂隶满4868说明什么是反义RNA和反义DNA? -
廖和新13723733661 ______[答案] 反义RNA是指与mRNA互补的RNA分子,也包括与其它RNA互补的RNA分子.由于核糖体不能翻译双链的RNA,所以反义RNA与mRNA特异性的互补结合,即抑制了该mRNA的翻译.通过反义RNA控制mRNA的翻译是原核生物基因表达调控的一种方式. ...

鄂隶满4868RNA干扰? -
廖和新13723733661 ______ 反义RNA技术指利用基因重组技术,构建人工表达载体,使其体外或体内表达反义RNA,从而抑制靶基因的表达.其作用原理有:①与前mRNA结合,影响mRNA的成熟和在胞浆内转运;②与相应的靶RNA结合从而激活RNase,加速靶RNA的降解;③直接与起始密码子AUG结合而阻止转录的启动;④互补作用于SD编码区的反义RNA可阻止核糖体在mRNA上的移动. RNA干扰:与靶基因同源的双链RNA诱导的特异转录后基因沉默现象.其作用机制是双链RNA被特异的核酸酶降解,产生干扰小RNA(siRNA),这些siRNA与同源的靶RNA互补结合,特异性酶降解靶RNA,从而抑制、下调基因表达.已经发展成为基因治疗、基因结构功能研究的快速而有效的方法.

鄂隶满4868沉默复合物在细胞中的产生过程是什么?
廖和新13723733661 ______ siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链,继之由反义siRNA再与体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶等)结合形成RNA诱导的沉默复合物(RNAinducedsilencingcomplex,RISC)

鄂隶满4868什么叫反义RNA -
廖和新13723733661 ______ 反义RNA,根据反义RNA的作用机制可将其分为3类:Ⅰ类反义RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分编码区,直接抑制翻译,或与靶mRNA结合形成双链RNA,从而易被RNA酶Ⅲ 降解;Ⅱ类反义RNA与mRNA的非编码区结合,引起mRNA构象变化,抑制翻译;Ⅲ类反义RNA则直接抑制靶mRNA的转录.

鄂隶满4868什么是小干扰法的基本原理?
廖和新13723733661 ______ 1、电力系统静态稳定计算一般采用小干扰法,即首先计算近似的线性微分方程组系数矩阵的特征根,然后根据特征根在复平面上的特性,判别电力系统运行的稳定性.2、存在于含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,具有吸收紫外线,在280nm波长...

鄂隶满4868什么叫正义RNA和反义RNA分子生物学名词 -
廖和新13723733661 ______[答案] 反义RNA是指与靶RNA(多为mRNA)具有互补序列的RNA分子,通过与靶RNA进行碱基配对结合的方式.参与基因的表达调控.

鄂隶满4868请问反义核酸与RNA干扰两个概念的不同点在哪里?这两个概念从原理到实施的效果都差不多,应该怎样区别呢? -
廖和新13723733661 ______[答案] 区别挺大.反义RNA是直接将单链的RNA放进细胞与mRNA互补.RNA干扰是将一段双链互补的RNA放进细胞,在细胞中某种蛋白质的作用下降解为单链再与mRNA互补,RNA干扰是线虫等低等生物本身具有的免疫机制,其效率比反义RNA高得多.

鄂隶满4868siRNA是什么 -
廖和新13723733661 ______[答案] Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成.SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默.siRNA原理:RNA干涉(RNAi)在实验室中是一种强大的实验工具,利用具有同源性的双链RNA(dsRNA)诱导序列特异的目...

鄂隶满4868请问什么是有义(正义)RNA,反义RNA? -
廖和新13723733661 ______[答案] 反义RNA是指与靶RNA(多为mRNA)具有互补序列的RNA分子,通过与靶RNA进行碱基配对结合的方式.参与基因的表达调控. RNAi (RNA interference) 即RNA干涉,是近年来发现的在生物体内普遍存在的一种古老的生物学现象,是由双...

鄂隶满4868什么是dsRNA? -
廖和新13723733661 ______ dsRNA是英语Double-stranded RNA的缩写.是指双链核糖核酸,在一些病毒里有.