toyobo+sybr+green说明书

席纪柳1743跑琼脂糖电泳可否判断细胞是否染菌? -
祁逃寇19347699832 ______ 根据我多年的经验,少年,你的胶背景亮说明你的UV开得太亮了,正常时候不需要这么强光就能看到条带.从你胶的样子可以看出,你跑胶的时间太长了,看样子你用的是SYBR green,这种染料在你电泳的时候是会向条带相反方向移动的,跑...

席纪柳1743双重荧光定量PCR探针荧光基团该怎么选择 -
祁逃寇19347699832 ______ 荧光定量PCR法检测的是SYBR Green掺入到双链DNA中的量. SYBR Green掺入到双链DNA中后会发出荧光. 但是只要是双链,它都掺. 而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,...

席纪柳1743在做Real - time PCR实验时需要做SYBR Green RT - PCR预实验不?做这个实验有什么意义? 大家帮帮忙啊 、 -
祁逃寇19347699832 ______ SYBR Green是做RT PCR时用的染色剂,第一次做RT时通常先做内参如18s用来确定基线和每个样品的上样量,或者做一个半定量PCR.RT PCR是用来检测样品中各个基因的表达量的,例如先确定一个表达量,如果某一基因达到此表达量的循环数少则说明此基因在细胞中的表达量高,否则就低.如果不是熟手,都应该先做半定量.

席纪柳1743有谁懂SYBR和TAGMAN的区别和联系,最近想做这方面的东西,发点资料给我. -
祁逃寇19347699832 ______ SYBR是双链DNA结合的荧光染料,只“认识”DNA,没有序列特异性,因此非特异性的产物及引物二聚体也可以结合SYBR,对结果当然有影响.但SYBR价格便宜,通用性强,而且可以做退火曲线 TAGMAN水解探针有序列特异性,不会结合到非特异性产物,TAGMAN探针两端各有一个荧光素,其中一个可以淬灭PCR激发光激发另一个荧光素所发出的荧光,只有当探针结合到靶序列上后被Taq酶水解后才会发出荧光.TAGMAN合成周期为7天,价格贵,而且不能做退火曲线.各有特点,相对定量用SYBR的多,绝对定量TAGMAN多.上手资料可找公司的人要,他们挺乐意的,只要你要做.

席纪柳1743为什么用taqman荧光探针比sybr green i荧光探针更准确 -
祁逃寇19347699832 ______ 你说呢...

席纪柳1743求问一份DNA样品,如何判断是单链,还是双链? -
祁逃寇19347699832 ______ 可以用只染双链,不染单链的核酸染料染色,再跑胶,比如SYBR Green,用法跟EB类似. 如果知道DNA长度,跑胶也可以分辨出来,双链的大小差不多是单链的2倍.

席纪柳1743如何处理Real time PCR的数据结果 -
祁逃寇19347699832 ______ ..不同的处理方法得到不同的结果... 做的是相对定量,SYBR Green, 选用2^(-△ △ Ct)法 一般大家是怎么处理的呢?比方实验设置如下: 内参基因:对照组1、对照组2、对照组3 实验组1、实验组2、实验组3 目的基因:对照组1、对照...

席纪柳1743我定了一批taqman探针的引物,但是后来决定用sybr做,这两种实验方法的引物可以一样吗? -
祁逃寇19347699832 ______ 可以一样,但是sybr的引物要求更严格些.因为taqman的探针可以消除很多非特异信号.

席纪柳1743Ecor1 和 Nco1双酶切体系的配制如题,多少微升?选用什么buffer?总体积多少?酶各加多少?Ecor1有2种,1是toyobo公司的,1是fermentas的,Nco1是... -
祁逃寇19347699832 ______[答案] 你用的是哪个公司的酶?不同公司的buffer不一样的. 不过,对于一般的体系,可以选择10微升体系或20微升体系.具体是1/10体积的buffer,酶的总体积控制在1/10以内,比如10微升体系酶量不要超过1微升,20微升体系不要超过2微升.DNA加入1~1.5...

席纪柳1743Real - time PCR为什么不用吸光度法检测 -
祁逃寇19347699832 ______ Real-Time PCR结果不齐,建议使用多种方法多次尝试.一般出现不齐是因为加样量不一致,相差少许是由于实验误差. Real-Time PCR 技术,又称实时定量荧光PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个...